中华人民共和国国家标准谷物及其制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定方法GB/T14929.5一94Methodfordeterminationofdeoxynivalenolincerealandcerealproducts1主题内容与适用范围本标准规定了谷物及其制品(蛋糕、饼千、面包等)中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的薄层色谱测定法及免疫测定法(ELISA)的基本要求。本标准适用于谷物(d、米、玉米、大麦等)及其制品〔蛋糕、饼干、面包等)中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定。第一法的最低检出浓度为0.1mg/kg,第二法的最低检出浓度为。1ng/kg,第一篇薄层色谱测定法2原理谷物及其制品中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇经提取、净化、浓缩和硅胶G薄层展开后，加热薄层板。由于在制备薄层板时加入了三氯化铝，使脱氧雪腐镰刀菌烯醇在365nm紫外光灯下显蓝色荧光，与标准比较。3试剂以下试剂除特殊规定外均为分析纯试剂，水为蒸馏水或同等纯度的水。三氯甲烷。无水乙醇。甲醇。石油醚(60_90'C或30^-60C).乙酸乙醋。乙睛。丙酮。异丙醇。乙醚。无水乙醚。氯化铝(AICI_,·6H,O):化学纯。JI门1﹄，J月勺反J六匕7子OU八廿:可.…可.勺Jq曰，JqJ恤JIJ寸Jl口，J中性氧化铝:层析用，经300'C活化4h,置千燥器中备用。活性炭:20g活性炭，用3mot/L盐酸溶液浸泡过夜、抽滤后，用热蒸馏水洗至无氯离子，在310洲312313中华人民共和国卫生部1994一01一24批准1994一08一01实施GB/T14929.5一94120C烘干备用。3门4硅胶(s薄层层析用。3.15脱氧雪腐镰刀菌烯醇(以下简称DON)标准溶液，精密称取5.0mgDON，加乙酸乙酷一甲醇(19:1)溶解。转入10mL容量瓶中，用乙酸乙醋一甲醇(19:1)稀释至刻度，此标准溶液含DONO.5mg/ml。吸取此标准溶液。.5mL，用乙酸乙醋一甲醇(19:1)稀释至10mL，此溶液每毫升含DON25pg,4仪器4.1小型粉碎机。4.2电动振荡器。4.375mL玻璃蒸发皿。4.4层析柱:内径2cm，长10cm，不具活塞4.510mL具塞浓缩瓶:底部具0.2mL刻度尾管。4.6玻璃板:5X20cm,4.7薄层涂布器:。.3mm4.8展开槽:N长25cm，宽6cm，高4cm,4.9紫外光灯:365nm,4.10微量注射器:10[,L,50pL,4.1150ml平底管。4.12双波长薄层扫描仪:带数据处理机。5分析步蕊5门提取称取20g粉碎样品置于200mL具塞锥瓶中，加8mL水和100mL三氯甲烷一无水乙醇(8:2),密塞。在瓶塞上徐层水，盖严防漏，振荡1h，通过折叠快速定性滤纸过滤，取25mL滤液于75ml_玻璃蒸发皿中，置90C水浴上通风挥干。5.2净化5.2.1液一液分配5.2.1.1谷物:用50ml，石油醚分次溶解燕发皿中的残渣，洗入100mL分液漏斗中，再用20mL(玉米样品用30mL)甲醇...
