GBT 14702-1993 饲料中维生素B6测定方法.pdf

中华 人 民 共 和 国 国 家 标 准饲 料 中维 生 素 B 6测 定 方 法G B/T 1 4 7 0 2 一 9 3Me t h o d f o r d e t e r mi n a t i o n o f v i t a m i n B 6 i n f e e d1 主题内容与适用范围 本标准适用于配合饲料，预混合饲料，浓缩饲料中所添加维生素B。的测定。测定范围为0.0 8-3.5p g/m l2 原理 用水提取，在p H 7 条件下，用荧光法测定维生素B-3 试剂和溶液 除特殊规定外，本标准所用试剂均为分析纯，水为蒸溜水或相应纯度的水。11 p H 7 缓冲液 称取2 9.3 0 2 3 g 磷酸氢二钠(N a,H P O,1 2 H 2 0,G B 1 2 6 3)和3.8 1 1 5 g 柠檬酸(C,H,O H B O,H G B 3 2 9 6)于1 0 0 m L 容量瓶中，用煮沸后冷却的水，溶解并定容至刻度。混匀备用。3.2 维生素B。标准贮备溶液 称取4 0 m g(中国药典参照标准)维生素B s，或复合维生素(中国药典参照标准)B,4 0 m g,B,1 0 0 m g,B,5 0 m g(精确至0.0 0 0 1 g)于1 0 0 m L容量瓶中，加水溶解定容至刻度，此液1 m l 一 含4 0 0 p g的维生素B s o3.3 维生素B。标准工作溶液 吸取(3.2)贮备液1 m L于1 0 0 m L容量瓶中加水稀释至刻度，混匀，此液1 m l含4 p g 的维生素 B。4 仪器设备4.1 荧光分光光度计;4.2 分析天平 感量0.0 0 0 1 g o4.3 实验室用器皿 容址瓶1 0 0 0 mL,1 0 0 mL,5 0 m l,2 5 mL a 刻度移液管1 0 m L,5 m L,l m l。5 分析步骤5 门试样的选取和制备 选取有代表性的试样，粉碎通过。.2 8 m m孔筛，用四分法缩减至 1 0 0 g，密封保存，以防试样维生素B,变化或变质。5.2 测定步骤国家技术监督局 1 9 9 3 一 1 1 一 0 6 批准1 9 9 4 一 0 6 一 0 1 实施G B/T 1 4 7 0 2 一 9 35.2.1 维生素B。的提取 称取试样(配合 饲料，浓缩饲料，预混合饲料)0.5-2 g,(精确至。.0 0 0 1 g)于1 0 0 m l容址瓶中，加水溶解后，定容至刻度，振荡1-2 m i n,静置待沉清，或离心(4 0 0 r/m i n)1 0 m i n5.2-2 试样的测定 移取试样的上清液1 m L(-4 0 p g V B,)于2 5 m L容量瓶中，加入(3.1)p H 7 缓冲液至刻度，混匀，用1 c m石英比色杯，置入荧光分光光度计内，于激发波长3 2 6 n m、发射波长 3 9 5 n m测定其荧光强度 同时做空白试验。5.2.3 工作曲线的绘制 取0.0 0,0.5 0,1.0 0,1.5 0,2.0 0,2.5 0 m L维生素B,标准S作液(3.3)分别于2 5 m L容量瓶中，加入p H 7 缓冲液(3.1)至刻度，混匀，用1 c m石英比色杯，置入荧光分光光度计内，于激发波长3 2 6 n m,发射波长3 9 5 n m测定其荧光强度，以荧光强度为纵坐标，维生素B。量为横坐标，绘制工作曲线。6 分析结果计算和表述 维生素B。的含量(m g/k g)按下式计算:V B,(m g/k g)=MXD/WX(1 0 0 0/1 0 0 0)=MXD I W式中:M工作曲线上查得维生素B。含量，p g/m L;W试样的质量，9;I)试样的总体积，m L e了 允许差7.1 每个试样称取两份平行测定，取算术平均值为测定结果并保留两位小数。7.2 维生素B 6 含量少于4 0 m g/k g以下，平行测定结果相对差值不大于 1 0%，维生素B。含量大于4 0 m 盯k g 的平行测定结果相对差值不大于5%0附加说明:本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出。本标准由国家饲料质量监督检验中心(北京)负责起草。本标准起草人刘素云、张瑜、赵兰芝。