GB 15569-1995 农业植物调运检疫规程.pdf

中华 人 民 共 和 国 国 家 标 准农 业 植 物 调 运 检 疫 规 程C B 1 5 5 6 9 一 1 9 9 5P l a n t q u a r a n t i n e r u l e s t r a n s p o r t i n g o f a g r i c u l t u r a l p l a n t，主题内容与适用范围 本标准规定了在国内 调运农业植物种子、苗木和其他繁殖材料及应施检疫的植物、植物产品检疫的程序 本标准适用于各类农业植物种子、苗 木和其他繁殖材料及应施检疫的植物、植物产品的调运检疫。2 术语2.1 调运检疫 指各 类植物种子、苗木和其他繁 殖材料及应施检疫的植物、植物产品在 流通(包括托运、邮寄、自 运、携带、销售等)过程中，农业专职植物检疫人员根据植物检疫法规进行的检疫检验和签证22 应施检疫的植物及植物产品 指国家和省(自 治区、直辖市)公布的应该实施检疫的植物和植物产品。23 检疫对象 指国家公布的农业植物检疫对象和省(自治区、直辖市)公布的补充检疫对象。2A 批 指同一时间、同一发运地点、收货地点、if 11 一 品名i 品种)、同一运输工具的全部应检物品2.5 件 指同，包装的全部应检物品。3 调运检疫程序调运检疫程序见下图。国家技术监督局1 9 9 5 一 0 6 一 0 2 批准1 9 9 6 一 0 1 一 0 1 实施G B 1 5 5 6 9 一 1 9 9 54 准备工作4.1 凭介绍信(或身份证)受理并审核农业植物调运检疫报验申 请单 附 录A(补充件月，调人地提交要审核的农业植物调运检疫要求书 附录B(补充件)，复检时核查植物检疫证书。4.2 向中报人查询货源安排、运输工具、包装材料等情况，准备检疫工具，确定检疫时间、地点和方法5 现场检查51 现场检查内容 现场调运应检农业植物、植物产品及其包装材料、运载工具、堆放场所等，是否有检疫对象，有无病原物和害虫各虫态及其排泄物、分泌物、蜕皮壳、蛀孔等痕迹 复检时应核查调运应检农业植物及其产品与检疫证书是否相符。5.2 抽样 根据不同应检农业植物及其产品、不同包装、不同数量，分别采用对角线五点取样或分9 z 设点等方法取样。川肉眼或手持放大镜直接观查抽件样品G B 1 5 5 6 9 一 1 9 9 55.3 检查 对种子 过筛检查，对苗木、接穗、块茎、果实等仔细检查根部、枝条、茎秆、皮层内外、叶片、芽眼和果实表面、曹洼、果梗等部位有无害虫各虫态及蛀孔、虫道、虫瘦;有无病害症状、肿瘤、菌廖、杂草籽等。具休抽查件数见表 1表 1 现场抽样件数标准表种类按货物总件数抽样百分率，%抽样最低数种子类-4 0 0 0 k g 的2 51 0 0 0 0 株的 3-51 0 0 -1 0 0 0 0 株的6-1 01 0 0 株果实类、块根茎0.2-5.05 件或 1 0 0 k g中药材、烟草0.2-5.05件注:J 散装种子 1 0 0 k g 为一件，苗木1 0 0 株为一件。下足抽样最低数的全部检验。其他类可参照表中比例抽查.6 室内检验6 门取样6.1.1 对现场检查难以得出有无检疫对象，需要室内检验或认为有必要保存样品的，应结合现场抽件检查，取样带回室内检验或保存。6 门.2 取样方法 根据不同应检农业植物及其产品、不同包装、不同数量、不同检疫对象，注意货物不同部位的代表性，采用对角线、棋盘式或随机取样的方法提取代表样品，取样份数和每份祥品数量见表2 和表3 0 表 2 现场取样份数货物总量取样份数1 0 0 件以下11 0 1-5 0 0 件25 0 1 3 0 0 0 件33 0 0 0 件以上4表 3 每份样品数量植物种类每份样品数量，9 或株种子类块茎、块根、葱头、大蒜、红枣等2 0 0 2 5 0 0花生、玉米、大豆、蚕豆、菜豆等1 0 0 0 -1 5 0 0稻谷、麦类、高粱、绿豆、棉籽等1 0 00谷子、小米、芝麻、油菜籽、亚麻籽等5 0 0蔬菜、牧草籽、花卉籽等1 00烟籽等1 0-3 0苗木类柑桔、苹果、花卉、薯苗等1 0-1 0 0果实类柑桔、苹果等2 0 0 02 5 0 0注:士 训也 类参照表中类型抽取样品。2 7 6C B 1 5 5 6 9 一 1 9 9 56.，.3 提取检验样品6.1.3.1 种 f-类 现场取回的代表样品，分别进石充分混匀后，铺在玻璃板上，样品厚度不超过 1 c m,分法，抽取室内检验所需样品的数量。6.1.3.2 苗木、果实、块根(茎)类 现场所取的样品逐一检查，检取带有害虫及病虫为害症状者，进行室内剖检和镜检等6.2 仪器设备 农业植物调运检疫检验所用仪器设备，见附录Q(参考件)。6.3 室内 一 般检验方法 植物检疫人员根据应检物品情况采取一种或几种检验方法6.3.1 种子过筛检验 将受检样品倒入相应孔径筛内，筛孔规格见表4 0 表 4 样品种类及其筛孔孔径规格表再用正方形四样品种类筛层数各层孔径规格，m m孔形花生米、大豆、玉米、蓖麻籽等33.5,2.5,1-5圆形水稻、麦类、高粱、大麻籽等22.5,1.5圆形谷子、油菜籽、芝麻、亚麻籽等22.0,1.2圆形 必要时按下列公式计算含量。每公斤含量一发现数量(g)/试样重量(g)X L 0 0 06.3.2 种子比重检验 运用病种子、虫蛀种子与健康种子间的比重差异，用不同比重的溶液区分沉浮，然后捞取浮种进一步检查。6.3.3 种子染色检验6.3.3.1 高锰酸钾染色法 主要用于检验禾谷类种子。取洁净样品1 5 g 放人金属网或塑料网中，在3 0 C 温水中浸泡1 m i n，移入1 g 高锰酸钾溶液中 再浸泡1 m i n取出立即用清水漂洗2 0-3 0 m i n 至干净，在放大镜下检查，对粒面有。.5 m m左右的黑斑种粒者挑出进一步检查。6.13.2 碘化钾染色法 主要用于检验豆类种子。将样品5 0 g 放入金属网 或塑料网中，放入1%碘化钾溶液或2%碘酒中1 1.5 m i n，移入。.5 氢氧化钠或氢氧化钾溶液中浸泡2 0 -3 0 s，取出，用清水冲洗0.5 m i n后，用扩大镜或肉眼检查 对粒面有1-2 m m黑圆点者挑出进一步检查。6.113 油浸检验法 主要用于检验豆类种子。按1 g 豆粒用橄榄油或凡士林或机械油1-1.5 m L 拌匀，浸泡0.5 h，则油脂浸润的豆粒变唬拍色，幼虫孔道呈透明斑纹。6.3.4 直接镜检 将查获害虫各虫态，在双筒解剖镜下鉴定种类，挑取样品病变部分，沾涂于玻片上，用显微镜检查病原物种类63.5 洗涤检验G s 1 5 5 6 9 一 1 9 9 5 将受检样品5 一2 5 g 倒入1 0-5 0 m l 无菌水的三角瓶内，振荡5 1 0 m m,离心浓缩.取其浓缩的沉淀液适当稀释，段于显微镜下检查病原物种类 必要时计算病原物接种体的负荷址，63.6 解剖检查 对疑难病害或隐蔽型病虫为害的应检农业植物及其产品，用刀解剖被害处或切片，片解剖镜或显微镜下检查63.了 分离培养检验 将受检样品消毒，并移于相应的培养荃上培养检验6.38 血清反应检验 分别采用特制的抗血清检验细菌、病毒、类菌原体6.3.9 噬菌体检验 利用专化性噬菌体的浸染试验快速检验细菌6.3.1 0 萌芽检验 常用的有保湿培养、沙土萌芽、土内萌芽、试管幼苗症状观测等检验方法6.4 几种主要检疫对象的检验方法 下列几种检疫对象的检验按下列方法进行，其他检疫对象和补充检疫对象的检验，按照国家和有关省(自治区、直辖市)的规定执行。6.4.，水稻细菌性条斑病检验方法 详见附录 D，(补充件)6.4.2 小麦矮腥黑穗病检验方法 详见附录E,(辛 卜 充件)6.4.3 棉花枯黄萎病检验方法仁 详见附录F，(补充件)6.4.4 柑桔溃疡病检验方法 详见附录G，(补充件)76.4.5 马铃薯癌肿病检验方法 详见附录H，(补充件)6.4.6 甘薯瘟病检验方法 详见附录 J,(补充件)6.4.7 小麦黑森瘦蚊鉴定方法仁 详见附录K，(补充件)6-4.8 苹果绵蚜和苹果蠢蛾鉴定方法 详见附录1，(补充件)6.4.9 柑桔大实蝇鉴定方法 详见附录M，(补充件)6.4.1 0 美国白 蛾鉴定方法仁 详见附录N，(补充件门6.4.1 1 毒麦鉴定方法 详见附录P，(补充件)7 评定与签证了.1 评定 根据现场或室内检验结果，对受检农业植物及其产品进行评定了.2 签证 未发现检疫对象的签发植物检疫证书并放行，复检不签证;发现带有或感染有检疫对象的植物或产品，除保留样品和标本外，签发农业植物调运检疫检验结果通知单 详见附录C,(补充件)，通知申 报单位或个人.立即采取消毒、改变用途、控制使用或销毁等处理并监督执行。G B 1 5 5 6 9 一 1 9 9 5附录A农业植物调运检疫报验申请单 (补充件)编号:植物及产品名称包装材料及方法备注件数重鳍(株数)产地起运地点运往地点运输工具发货单位 人)收货单位(人)申 请单位(盖章):联 系 人(签字):电话。邮政编码:年月日 附录B农业植物调运检疫要求书 (补充件)检字植物检疫姑:兹介绍 单位)同志去接洽调运种子(苗木)及其他植物、植物产品公斤(株)，检疫对象为:签发机关检疫专用章检疫员有效期止:年月日 年月日一一、一一一，一一一一一注 本表共三联，第一联交调出 地检疫机关，第二联寄调出省检疫机关，第三联留存签发机关G B 1 5 5 6 9 一 1 9 9 5 附录C农业植物调运检疫检验结果通知单 (补充件)()检()字第货 仁接受人样品名称检验 目的检验方法和结果代理人接收 日期抽样数量检验 日期处理意 见签发机关检疫专用章站长检疫员 年月日注式二联。第一联交报检单位(人)，第二联留存签发检疫机关。附录D水稻细菌性条斑病检验方法 (补充件)D 1 检验样品 种子脱壳后，取谷壳1 0三种方法之一检测有无细菌B，加磷酸缓冲液P B S(p H 7.0)2 0 m L，浸泡过夜，过滤得滤液样品，可用下列D 2 噬菌体检验法 取灭菌培养皿三套，分别加入条斑病菌悬浮液(1 0 C f u/m L)l m L，并逐个加入样品滤液。.2,0.5 和1.0 m 1，混匀，每皿中加入嫡化后冷却至4 5 5 0 营养琼脂培养基 9 m L,摇匀，冷却后，放在2 8 C 恒温箱中培养1 2-1 8 h，观察有无圆形透明的噬菌斑出现。结果判别:无噬菌斑的表示为无病种子，噬菌斑的数量与病害的严重度相关。D 3 直接分离法 取滤液 1 0 m l-，离心(8 0 0 0 r/m i n)1 0 m i n，沉淀，再悬浮在1 m L P B S中，取2 0 0 p L涂抹在预先制备好的营养琼脂平板上 重复 1 0 个培养皿。在2 6 -2 8 0C 恒温箱中培养3-7 d，观察有无圆形、隆起及质地均匀蜜黄色的典型菌落出现。G B 1 5 5 6 9 一 1 9 9 5D 4 血清学检验法 检验技术有多 种可选择，最常用的是酶联免疫吸附分析(E L I S A)，免疫荧光法(I F)，反向间接血凝技术及金黄葡萄球菌共凝集反应。酶联免疫吸附分析法常用的是双抗体夹心法，详见柑桔溃疡病检验方法 附录G,(补充件);反向f9 1 接血凝法可参见附录1(补充件)金黄葡萄球菌共凝集反应较为简单易行。取浓缩样品悬浮液一滴放于载玻片上，加人经抗体致敏的金黄葡萄球菌一滴，用灭菌牙签或细竹针搅拌3 0 -5 0 s，如出现絮状凝集，表示阳性反应，否则即为阴性反应，以灭菌水或 P B S液为阴性对照。附录E小麦矮腥黑穗病检验方法 (补充件)将小麦样品按四分法提取两份试样，每份5 0 g，分别倒人三角瓶，加入1 0 0 m L蒸馏水，用力振荡5-1 0 m i n，再将全部洗液分别倒入清洁离心管内，以1 0 0 0 r/m i n的速度离心5 m i n,倒出上清液。底部的沉淀物加入1 m L席尔氏液，再摇动离心管，用清洁吸管吸取悬浮液于玻片上。一个样品镜检5 个玻片。鉴定矮腥冬抱子时，每个样品必须测量2 5-3 0