中华人民共和国国家标准GB5009.273—2016食品安全国家标准水产品中微囊藻毒素的测定2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布GB5009.273—2016Ⅰ前言本标准代替SN/T2678—2010《进出口淡水产品中微囊藻毒素的检测方法酶联免疫吸附法》。本标准与SN/T2678—2010相比,主要变化如下:———标准名称修改为“食品安全国家标准水产品中微囊藻毒素的测定”;———增加了液相色谱-串联质谱法。GB5009.273—20161食品安全国家标准水产品中微囊藻毒素的测定1范围本标准规定了水产品中微囊藻毒素(环状七肽)的液相色谱-串联质谱和间接竞争酶联免疫吸附的测定方法。本标准适用于鱼、虾、河蚌等水产品中微囊藻毒素的测定。第一法液相色谱-串联质谱法2原理试样中的微囊藻毒素(MC-LR,MC-RR和MC-YR)经甲醇溶液提取,固相萃取小柱净化,液相色谱-串联质谱测定,外标法定量。3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。3.1试剂3.1.1甲醇(CH4O):色谱纯。3.1.2甲酸(CH2O2):色谱纯。3.1.3甲酸铵(CH5O2N):色谱纯。3.1.4乙腈(C2H3N):色谱纯。3.1.5氮气:纯度≥99.99%。3.2试剂配制3.2.1甲醇溶液(20%):将20mL甲醇与80mL水混合均匀。3.2.2甲醇溶液(80%):将80mL甲醇与20mL水混合均匀。3.2.3淋洗溶液:10mL水;10mL甲醇溶液(20%)。3.2.4含0.1%甲酸的甲醇溶液:用甲醇将0.1mL甲酸定容至100mL。3.3标准品微囊藻毒素标准品:微囊藻毒素-LR(MC-LR,C49H74N10O12,CAS号101043-37-2)、微囊藻毒素-YR(MC-YR,C52H72N10O13,CAS号101064-48-6)、微囊藻毒素-RR(MC-RR,C49H75N13O12,CAS号111755-37-4),纯度均≥95%。3.4标准溶液配制3.4.1微囊藻毒素标准储备液(10μg/mL):分别称取微囊藻毒素标准品MC-LR、MC-YR、MC-RR各GB5009.273—201620.5mg(按实际含量折算,精确至0.01mg),用500μL甲醇溶解,再用水定容至50mL。标准储备液贮存于密闭棕色玻璃瓶中,于-20℃储存,有效期为3个月。3.4.2标准中间液(10ng/mL):吸取微囊藻毒素标准储备液(10μg/mL)10μL于10mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度。标准中间液于-20℃冷冻避光保存,有效期为3个月。3.4.3基质匹配的混合标准系列工作液:用空白基质溶液将微囊藻毒素标准中间溶液(10ng/mL)稀释成含量为0.1μg/L、0.2μg/L、0.5μg/L、1.0μg/L、2.0μg/L和5.0μg/L的混合标准系列工作液。现用现配。3.5材料3.5.1固相萃取小柱:ODSC18柱,500mg/6mL,或性能相当者。3.5.2有机相微孔...
