中华人民共和国国家标准GB5009.261—2016食品安全国家标准贝类中神经性贝类毒素的测定2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布GB5009.261—2016Ⅰ前言本标准代替SN/T1573—2013《出口贝类中神经性贝类毒素检验方法小鼠生物法》。本标准与SN/T1573—2013相比,主要变化如下:———标准名称修改为“食品安全国家标准贝类中神经性贝类毒素的测定”。GB5009.261—20161食品安全国家标准贝类中神经性贝类毒素的测定1范围本标准规定了贝类中神经性贝类毒素(NSP)检测的小鼠生物测定方法。本标准适用于贝类及制品中神经性贝类毒素(NSP)的检测。2原理用乙醚提取贝类中神经性贝类毒素,提取物经减压蒸干后,再以1%吐温-60生理盐水为分散介质,制备NSP-1%吐温-60生理盐水混悬液,将该混悬液注射入腹腔,观察小鼠存活情况,计算其毒力。3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。3.1试剂3.1.1盐酸(HCl)。3.1.2无水乙醚(C4H10O)。3.1.3吐温-60(C64H126O26)。3.1.4氯化钠(NaCl)。3.1.5次氯酸钠(NaClO)。3.2试剂配制3.2.1氯化钠溶液(0.85%):称取0.85gNaCl,加水溶解并定容至100mL。3.2.21%吐温-60:称取1.0g吐温-60,用0.85%氯化钠溶液溶解并定容至100mL。3.2.3次氯酸钠溶液(5%):称取次氯酸钠50g,用水溶解,并稀释至1000mL。3.3标准品短裸甲藻毒素标准品(brevetoxin-2),纯度≥90%。3.4材料小白鼠:体重为19g~21g的健康ICR品系雄性小鼠。4仪器和设备4.1旋转蒸发器。4.2均质器。GB5009.261—201624.3天平:感量为0.1g。4.4分液漏斗。4.5圆底烧瓶。4.6布氏漏斗。4.7一次性注射器:1mL。4.8离心机:转速≥6000r/min。4.9金属筛网:孔径约2mm。5分析步骤注:橡胶手套、玻璃制品等用过的器材,以及废弃的提取液应在次氯酸钠溶液(5%)中浸泡1h以上,以使毒素分解。5.1试样制备5.1.1样品采集每个分析样品至少要取10个以上贝类,并使贝肉达200g以上。冷冻样品置于保温盒中冷冻送检,或保证其处于低温状态(0℃~10℃)送检。如为带壳样品,应开壳去除水分后冷冻送检。5.1.2试样制备5.1.2.1生鲜带壳样品用清水将贝壳外表彻底洗净,切断闭壳肌,开壳,用水淋洗内部去除泥沙及其他外来物。将闭壳肌和连接在胶合部的组织分开,取出贝肉,切勿割破肉体。开壳前不要加热或用麻醉剂。收集200g贝肉放在孔径约2mm的金属筛网上沥水5min,捡出碎壳等杂物,将贝肉均质,备用。5.1.2.2冷冻样品在室温下,使冷冻样品呈半冷冻状态...
