SNT 5046-2018 进出口饲料中丁基羟基茴香醚的测定 气相色谱-质谱法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 50462018进出口饲料中丁基羟基茴香醚的测定 气相色谱-质谱法Determination of butylhydroxyanisole in feed for import and exportGas chromatography-mass spectrometry method2018-03-12 发布2018-10-01 实施ICS 65.120B 46中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布SN/T 50462018I前 言本标准按照 GB/T 1.12009 给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：东莞出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心、广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心。本标准主要起草人：李菊、谢建军、陈泽铭、王璐、陈文锐、黄伟、黄雪琳、杨丽、刘淑君。1SN/T 50462018进出口饲料中丁基羟基茴香醚的测定 气相色谱-质谱法1 范围本标准规定了进出口饲料中丁基羟基茴香醚的气相色谱-质谱测定方法。本标准适用于饲料中丁基羟基茴香醚的检测。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3 试样制备与保存取样品中有代表性部分约 500 g，用粉碎机充分捣碎混匀，均分为两份，分别装入洁净容器内作为试样，密封，并标明标记。试样置于常温状态下避光保存。4 测定方法4.1 方法提要试样经乙酸乙酯萃取，固相萃取（SPE）净化后浓缩定容，用气相色谱-质谱联用仪进行测定，外标法定量。4.2 试剂和材料4.2.1 乙酸乙酯：色谱纯。4.2.2 丁基羟基茴香醚（BHA）标准品：C11H16O2，CAS 号：25013-16-5，纯度 98.0%。4.2.3 BHA 标准储备溶液：精密称取适量 BHA 标准品，用乙酸乙酯配制成 1 000 g/mL 的标准储备溶液，放置于 0 4 冰箱保存。4.2.4 BHA 标准工作溶液：根据实验所需用乙酸乙酯配制成系列适当浓度的标准工作溶液，放置于0 4 冰箱保存。4.2.5 石墨化碳黑-中性氧化铝复合柱（250 mg/3 g/6 mL）：用前使用 4 mL 乙酸乙酯活化，待用。4.3 仪器和设备4.3.1 气相色谱-质谱联用仪：配 EI 离子源。4.3.2 电子天平：感量为 0.1 mg 和 0.01 g。4.3.3 粉碎机。2SN/T 504620184.3.4 旋涡混合器。4.3.5 氮吹仪。4.3.6 离心机：不低于 4 500 r/min。4.3.7 容量瓶：10 mL。4.3.8 离心管：50 mL。4.3.9 试管：10 mL，30 mL。4.3.10 微孔滤膜：0.22 m,有机系。4.4 分析步骤4.4.1 提取称取 1.0 g（精确至 0.01 g）试样于 50 mL 离心管中，加 10.0 mL 乙酸乙酯，加盖，振荡 10 min，置离心机6 000 r/min 离心5 min，吸取上清液于30 mL试管中；再加入10.0 mL乙酸乙酯重复提取一次，振荡、离心 5 min，合并上清液，上清液在 45 下氮吹仪吹氮浓缩至约 0.5 mL，待净化。4.4.2 净化 将 4.4.1 中待净化液过已活化的石墨化碳黑-中性氧化铝复合柱后，用乙酸乙酯 2 mL 洗涤 2 次盛装待净化液的 30 mL 试管，洗液同样过柱，再用 4 mL 乙酸乙酯洗脱复合柱，流速控制在 1 mL/min，收集全部洗脱液于 10 mL 试管中，在 45 下氮吹仪吹氮浓缩至近干，用乙酸乙酯涡漩振荡溶解残渣，定容至 2.0 mL，待测。4.4.3 测定4.4.3.1 气相色谱-质谱条件由于测试结果取决于所使用的仪器，因此不可能给出气相色谱-质谱分析的通用参数。设定的参数应保证色谱分析时被测组分与其他组分能得到有效的分离，下列给出的参数可供参考：a）毛细管色谱柱：DB-5MS，30 m（柱长）0.25 mm（内径）0.25 m（膜厚）或相当者；b）进样口温度：230 ；c）柱温：初始温度 60，保持 1 min，以 20 /min 速率升至 160，以 10 /min 速率升至180，保持 5 min，以 25 /min 速率升至 280，保持 3 min；d）载气：氦气，控制方式为恒流，流速为 1.8 mL/min；e）色谱-质谱接口温度：280 ；f）电离方式：EI；g）电离能量：70 eV；h）离子源温度：230 ；i）四极杆温度：150 ；j）质量扫描方式：选择离子监测（SIM）模式；k）选择监测离子（m/z）：定量离子为 137；定性离子为 165，180；l）进样方式：分流，分流比为 5:1；m）进样量：1 L；n）溶剂延迟时间：4 min。4.4.3.2 定量分析根据样液中丁基羟基茴香醚含量的情况，选定浓度相近的标准工作曲线溶液（不得少于 4 个浓度点），标准工作溶液和样液（4.4.2）中丁基羟基茴香醚响应值应在仪器检测的线性范围内。在上述测3SN/T 50462018定条件下，丁基羟基茴香醚的保留时间为 7.563 min，参照附录 A 给出的丁基羟基茴香醚标准溶液选择离子色谱图和质谱图。4.4.3.3 定性测定对标准溶液与样液均按上述规定的条件进行测试，如果样品色谱图所得到的峰保留时间与标准溶液的丁基羟基茴香醚保留时间相符则予以确证，在扣除背景的样品谱图中，选定的监测离子（m/z）：137，165，180 都出现，同时样品主要质谱峰强度比与标准溶液的相关离子的相对丰度相符则予以确证,且各碎片离子的相对丰度比偏差不超过表 1 的规定范围，即可确定样品中含有丁基羟基茴香醚。表 1 定性测定时相对离子丰度最大容许偏差%相对离子丰度（基峰）5020 5010 20 10允许的相对偏差202530504.5 空白试验除不加试样外，按上述测定步骤进行。4.6 结果计算与表述按式（1）计算试样中的丁基羟基茴香醚（BHA）含量，结果以毫克每千克（mg/kg）表示：（1）式中：X 试样中 BHA 的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；标准工作溶液中 BHA 的浓度，单位为毫克每升（mg/L）；空白试液中 BHA 的浓度，单位为毫克每升（mg/L）；V 样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；n 稀释倍数；m 试样的质量，单位为克（g）。计算结果保留两位小数，以两次测定的平均值作为测试结果。5 检测低限、定量限和回收率5.1 检测低限和定量限本方法测定 BHA 含量的检出限（LOD）为 0.50 mg/kg，定量限（LOQ）为 1.0 mg/kg。5.2 回收率配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料、精料补充料、鱼粉与肉骨粉中丁基羟基茴香醚的添加浓度与回收率数据见表 2。4SN/T 50462018表 2 丁基羟基茴香醚的添加水平与回收率数据样品名添加水平mg/kg回收率%样品名添加水平mg/kg回收率%配合饲料194.25浓缩饲料191.80299.102105.081098.611098.18添加剂预混合饲料1104.80精料补充料194.172100.46296.221095.391097.41鱼粉199.85肉骨粉196.582110.322102.0010103.741093.005SN/T 50462018附 录 A（资料性附录）标准品选择离子色谱图与质谱图标准品选择离子色谱图与质谱图见图 A.1 和图 A.2.图 A.1 丁基羟基茴香醚（BHA）标准品的选择离子色谱图（SIM）图 A.2 丁基羟基茴香醚标准品选择离子质谱图7SN/T 50462018ForewordThis standard was drafted according to rules of GB/T 1.12009.This standard was proposed by and is under the charge of the Certification and Accreditation Administration of the Pepoples Republic of china.This standard was drafted by Inspection and Quarantine Comprehensive Technology Center of DongGuan Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau,GuangDong Inspection and Quarantine Technology Center of GuangDong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau.The main drafters of this standard are Li Ju,Xie Jian Jun,Chen Ze Ming,Wang Lu,Chen Wen Rui,Huang Wei,Huang Xue Lin,Yang Li,Liu Shu Jun.9SN/T 50462018Determination of butylhydroxyanisole in feed for import and export Gas chromatography-mass spectrometry method1 ScopeThis standard specifies determination of butylhydroxyanisole in feed for import and export by GC-MS.This standard specifies determination of butylhydroxyanisole in feed.2 ReferenceThe item in the following listed files would become the items of this file by their citing in the relative part.For the files without an indication of date,the last version would be applicable in this file.GB/T 6682 Specification and test method for water used in analytical lab.3 Sample preparation and storagePresentative sample,about 500 g,which is crushed with pulverizer.The sample is mixed and divided into two equal portion in a clean container,which is sealed and labeled.The test sample should be stored below-18.4 Method of determination4.1 PrincipleThe butylhydroxyanisole（BHA）in the test sample are extracted with ethyl acetate,cleaned up by SPE.The eluant is evaporated and made up to a definite volume.Determination and confirmation is made by means of GC/MS,using external standard method.4.2 Reagent and materialsUnless otherwise specified,all r