中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T5207—2020蓝莓休克病毒检疫鉴定方法Detectionandidentificationofblueberryshockvirus2020-12-30发布2021-07-01实施ICS65.020CCSB16中华人民共和国海关总署发布SN/T5207—2020I前言本文件按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位：中华人民共和国福州海关、福建省农业科学院、中国检验检疫科学研究院、福建农林大学。本文件主要起草人：蔡伟、谢丽雪、李雪珍、李韬、张永江、沈建国、高芳銮、吴祖建、陈寿铃。1SN/T5207—2020蓝莓休克病毒检疫鉴定方法1范围本文件规定了蓝莓休克病毒检疫鉴定的原理，仪器设备、用具及试剂，检测与鉴定，结果判定与记录，以及样品的保存。本文件适用于进出境蓝莓种苗中蓝莓休克病毒的检测。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。SN/T2122进出境植物及植物产品检疫抽样方法3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4基本信息蓝莓休克病毒的基本信息如下：——学名：Blueberryshockvirus，缩写：BlShV。——分类地位：雀麦花叶病毒科（Bromoviridae）、等轴不稳环斑病毒属（Ilarvirus）成员。——蓝莓休克病毒的分类地位、寄主范围、病害症状、分布地区、传播途径、粒体形态、病毒基因组等参见附录A。5原理蓝莓休克病毒的血清学和分子生物学特性是制定本检疫鉴定方法的主要依据。6仪器设备、用具及试剂6.1仪器设备高速冷冻离心机、电子天平（1/1000g）、PCR仪、电泳仪、水平电泳槽、-20℃低温冰箱和-80℃超低温冰箱、全自动酶联免疫分析系统、凝胶成像分析系统、pH计、微波炉、磁力搅拌器、恒温水浴锅、高压灭菌锅、超净工作台、酶标仪等。6.2用具各种量程的可调移液器（1000μL、200μL、100μL、20μL、10μL、2μL）、PCR反应管、无RNase离心管（1.5mL）、研钵、酶联板等。2SN/T5207—20206.3试剂双抗体夹心酶联免疫吸附测定（DAS-ELISA）试剂见附录B，普通RT-PCR检测试剂见附录C，巢式RT-PCR检测试剂见附录D，实时荧光RT-PCR检测试剂见附录E。7检测与鉴定7.1抽样检查按照SN/T2122给出的方法进行抽样、取样，并检查植株是否有矮化、畸型，叶片花叶、斑...
