SNT 4675.30-2017 出口葡萄酒中拜氏接合酵母检验 SYBR Green Ⅰ荧光PCR法.pdf

SN/T4675.30-2017出口葡萄酒中拜氏接合酵母检验SYBR Green I荧光PCR法1范围SN/T4675的本部分规定了葡萄酒中拜氏接合酵母(Zygosaccharomyces bailii)的SYBR Green I荧光PCR检验方法。本部分适用于红葡萄酒、白葡萄酒和桃红葡萄酒中拜氏接合酵母的定性检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1拜氏接合酵母Zygosaccharomyces bailii拜氏接合酵母属王酵母科(Saccharomycetaceae),接合酵母属(Zygosaccharomyces),营养细胞呈椭圆形，(3.5um6.5um)(4.5um11.54m)。无运动，以多边出芽无性生殖为主；在2530条件下，培养3d7d在营养琼脂培养基上菌落光滑、圆形、呈奶油色或白色，菌落直径2mm3mm。4缩略语下列缩略语适用于本文件。DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonuleic acid)dNTP:脱氧核苷酸三磷酸(deoxyribonucleoside triphosphate)CTAB:十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrithylammoniu bromide)Tris:三（羟甲基）氨基甲烷tris(hydroxymethyl)aminomethaneEDTA:乙二胺四乙酸(ethylene diaminetetraacetic acid)OD值：光密度值(optical density)5方法提要采用SYBR Green I荧光PCR法进行检验，通过加入反应体系中的SYBR Green I荧光染料特异性地掺人新合成的DNA双链后，发射荧光信号，观察荧光PCR仪获取的扩增曲线，判断反应体系中是否存在特异的DNA靶标，从而对葡萄酒中的拜氏接合酵母进行快速检验。