SNT 3690-2013 转基因大米PCR-DHPLC检测方法.pdf

SN/T3690-20135.2.7蛋白K:20mg/mL。5.2.8TEAA液：三乙基铵醋酸盐液。5.2.9 DHPLC冲液 A:50 mL TAEE和250 L乙腈混合，加水定容至1000 mL。5.2.10 DHPLC冲液B:50 mL TAEE和250 mL乙腈混合，加水定容至1000 mL。5.2.11DHPLC液D:75%乙。5.2.12 Taq DNA。5.2.13UNG(dUTP代dTTP使用)。5.2.1410XPCR液。5.2.15氯化镁溶液：25mmol/L。5.2.16 dNTP溶液：dGTP,dCTP,dATP,dTTP或 dUTP各 2.5 mmol/L。5.2.17PCR所用引物：检测转基因大米内、外源基因和转基因水稻品系各引物信息见表1。表1检测引物信息一览表基因/品系名称引物名称引物序列(5-3)扩增产物/bp备注CGTGGCCTCGCGATCTGACTATTTC-FCGCACGTCCTTGCGos996内源基因CTCAGCGGCGGAGCTACAGACCCT-RTCACGAATTCCTGAGACGTGGCCTCGCGATCTGACTCCAATA-FCryIA(b)/CAGTTCCAGCTACAGCTA151外源基因CryIA(c)CTCAGCGGCGGAGCTACAGACAC-RCCACGATGTTACCGAGTCGTGGCCTCGCGATCTGACTATCAAC-FCAGAGGATCGAAGAGTCryIA(b)174内源基因CTCAGCGGCGGAGCTACAGATCGCG-RGAGAGCTGGGTTACGTGGCCTCGCGATCTGACTGAGTC-FCGTGGATGCTTTGTTCCryIA(c)111外源基因CTCAGCGGCGGAGCTACAGAATCATG-RGCGATGTTGGTGTCCGTGGCCTCGCGATCTGACTGCAC-FCATCGTCAACCACTACABar180外源基因CTCAGCGGCGGAGCTACAGAGAC-RCTCGCCGTCCACCTCCGTGGCCTCGCGATCTGACTAAGAT-FGCCTCTGCCGACAGTCaMV35S196外源基因CTCAGCGGCGGAGCTACAGAGCGAAG-RGATAGTGGGATTGTCGTGGCCTCGCGATCTGACTTGAATC-FCTGTTGCCGGTCTTNOS188外源基因CTCAGCGGCGGAGCTACAGACGTAT-RTAAATGTATAATTGCGGGAC3