农业部2483号公告-6-2016 饲料中金刚烷胺和金刚乙胺的测定 液相色谱-串联质谱法.pdf

ICS65.120B46中华人民共和国国家标准农业部2483号公告一6一2016饲料中金刚烷胺和金刚乙胺的测定液相色谱一串联质谱法Determination of amantadine and rimantadine in feeds-Liquid chromatography-tandem mass spectrometry2016-12-23发布2017-04-01实施中华人民共和国农业部发布农业部2483号公告一6一2016前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由农业部畜牧业司提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC76)归口。本标准起草单位：中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所。本标准主要起草人：邱静、李丹、贾琪、范理。农业部2483号公告一6一2016(4.12)、D-金刚烷胺(4.13)、金刚乙胺(4.14)和D,-金刚乙胺(4.15)标准品于10mL容量瓶中，用甲醇(4.1)溶解并稀释至刻度，分别配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备溶液。一20以下保存，有效期为3个月。4.17金刚烷胺和金刚乙胺混合标准工作溶液：分别量取1.0mg/mL的金刚烷胺、金刚乙胺标准储备溶液(4.16)适量，于100mL容量瓶中用甲醇(4.1)稀释至刻度，配制成金刚烷胺、金刚乙胺浓度为10.0g/mL的混合标准工作溶液。28保存，有效期为14d。4.18Ds金刚烷胺和D,-金刚乙胺混合内标工作溶液：分别量取1.0g/mL的Ds金刚烷胺和D,金刚乙胺标准储备溶液(4.16)适量，于100mL容量瓶中用甲醇(4.1)稀释至刻度，配制成D-金刚烷胺和D,金刚乙胺浓度为1.0g/mL的混合内标工作溶液。28保存，有效期为14d。5仪器和设备5.1液相色谱一串联质谱仪：配有电子源(ESI)。5.2天平：感量0.01g。5.3分析天平：感量0.015.4振荡器。5.5涡旋混合器S下A小D25.6固相萃取仪5.7高速离心机：车)00 r/mi5.8氮吹仪。S)。OIN二O1T5.9固相萃取柱：混相离子交换固相萃取柱(60mg,3mL),或性能相当者。5.10微孔滤莫：0，有机系工6采样和试样制备采样按照GB/T46y的定护取代表性的品小分法缩减样一/T20195的规定制备试样，将饲料样品磨碎过(5 mm筛，混匀，装人密闭容器中，避光低温保有备月7分析步骤7.1提取准确称取2g(精确至0.01g)试样至50mL离心管中，加，人20L1.0gmL的混合内标工作溶液(4.18),然后加入10mL1%乙酸乙睛溶液(4.7)，涡旋1min,于振荡器中室温振荡30min,10000r/min离心10min,上清液转移至50m离心管中，残渣用10mL1%乙酸乙腈溶液(4.7)涡旋2min,10000rmin离心10min,上清液合并至50ml离心管中，待净化C若样品中月标物浓度过高，可从提取液中分取1mL2mL,用1%乙酸乙腈溶液(4.7)定容至10m,混匀后待净化。7.2净化混合阳离子固相萃取柱先用3mL甲醇(4.1)活化，3mL水平衡，然后将上清液上柱，流速控制在2滴/s3滴/s,依次用3mL2%盐酸水溶液(4.9)、3mL甲醇(4.1)淋洗，抽干3min,用5mL5%氨水甲醇(4.10)洗脱，收集洗脱液于15mL离心管中，50条件下氮气吹干，1.00mL50%乙腈水溶液(4.11)复溶，涡旋30s后过0.22m滤膜到样品瓶中，上机测定。7.3标准曲线绘制准确量取适量金刚烷胺和金刚乙胺混合标准工作溶液(4.17)、D:金刚烷胺和D,-金刚乙胺混合内标工作溶液(4.18)，用50%乙腈水溶液(4.11)稀释配制成金刚烷胺和金刚乙胺浓度为2.00ug/L、2农业部2483号公告一6一20164.00ug/L、20.0g/L、100.0ug/L、200.0g/L、1000.0g/L,Ds-金刚烷胺和D-金刚乙胺浓度均为20.0ug/L的系列标准工作溶液，供液相色谱一串联质谱测定。分别以金刚烷胺和D金刚烷胺、金刚乙胺和D,金刚乙胺的定量离子质量色谱峰面积之比为纵坐标，对应的标准溶液浓度比为横坐标，绘制标准曲线，求回归方程和相关系数。7.4测定7.4.1液相色谱参考条件色谱柱：C1s,柱长150mm,内径2.1mm,粒径3.5m;或性能相当者。流动相：A为0.1%甲酸水溶液(48)，B为甲醇(4.1)流速：0.30mL/min进样量：10LTADA三流动相梯度洗脱强序见表%0分人八90901010901090901090107.4.2质请参离子源电威子源扫描方士子扫描。检测方立离子监测(RM)。脱溶剂气气、碰撞气均为高纯氮气或其他合适气体喷雾电压等参数应优化至最优灵敏度监测离子参见表表2法、D金刚烷胺、金乙胺和D,-金刚乙胺特往子参考质谱条件定性离子对化合物定量离子对碰撞能(CE)m/eV152.0/13.0金刚烷胺4518152.0/93.152.0/135.04835D:金刚烷胺167.3/150.167.3/150.34815金刚乙胺180.216324015180.2/163.2180.281.04532D,-金刚乙胺184.2/167.0184.2/167.048157.4.3定性测定在相同试验条件下，待测物在样品中的保留时间与标准工作溶液中的保留时间偏差在士2.5%之内，并且色谱图中各组分定性离子对的相对丰度，与浓度接近标准工作液中相应定性离子对的相对丰度进行比较，若偏差不超过表3规定的范围，则可判断为样品中存在对应的待测物。表3定性测定时相对离子丰度的最大允许误差相对离子丰度，%50205010-2010允许的相对偏差，%202530503