农业部2349号公告-4-2015 饲料中可乐定和赛庚啶的测定 高效液相色谱法.pdf

农业部2349号公告一4一2015前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由农业部畜牧业司提出。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC76)归口。本标准起草单位：上海市兽药饲料检测所。本标准主要起草人：黄士新、吴剑平、顾欣、李丹妮、严凤、张鑫、商军、黄家莺、陆淳、华贤辉、田恺、张浩然。农业部2349号公告一4一20154.14固相萃取小柱：混合型强阳离子交换柱，60mg/3mL,或其他性能类似的小柱。4.15滤膜：0.45m,尼龙。5仪器和设备5.1高效液相色谱仪：配二极管阵列检测器或紫外检测器。5.2分析天平：感量为0.00001g和0.01g各1台。5.3旋转蒸发仪。5.4离心机：转速不低于8000r/min或离心力不低于8000g。5.5粉碎机。5.6涡旋振荡器。5.7固相萃取装置。5.8梨形瓶：50mL。5.9离心管：50ml6采样和试样制备STANDARD6.1采样按GB/T14699.BLISHING RESEA定抽取有代表性的样品，四分法缩减取6.2试样制留按GB/T20195的视定制备试样，粉碎，全邵通过子径为0.45m孔径筛，淮刀装密闭容器中，备用。7分析步骤7.1提取称取2g(精确至0)g试样于L离心管中，准确加入0.1%盐酸乙晴潘液5)15mL充分振荡提取l0min,8000rn可心3n,取上清液至梨形瓶中。加01%盐酸乙腈浴液(4.)15mL重复提取一次。合并上清液旋转至干加10乙崩盐酸溶液(4，.7)5榕解残渣后备用。7.2净化固相萃取小柱先用甲醇3mL,盐酸(4.63l活化。取备用液全部过柱依次用0.1%盐酸(4.6)3mL和甲醇1mL淋洗，用5%氨水甲醇落液(4.8)6L洗脱抽干，收集洗脱液，50减压旋转蒸发至干，加10%乙腈盐酸溶液(4.71.00m溶解过0,45m滤膜后供高效液相色谱仪测定。7.3样品测定7.3.1液相色谱参考条件色谱柱：C1柱（柱长150mm,柱内径4.6mm,粒径5m),或性能相当色谱柱；柱温：30；进样量：10uL流速：l.0mL/min;流动相：A为0.1%盐酸溶液；B为乙腈，梯度洗脱程序见表1；检测器：二极管阵列检测器，扫描波长190nm400nm,检测波长210nm;或紫外检测器检测波长210nm7.3.2定性测定选择210m作为检测波长进行检测，样品中待测物质的保留时间与标准品混合工作液中对应的保2