GBT 7649-1987 谷物籽粒氨基酸测定的前处理方法.pdf

中华 人民 共 和 国 国 家 标 准UDC 6 3 3.1:5 4 3-0 5谷物籽粒氨基酸测定的前处理方法G B 7 6 4 9-8 7P r e t r e a t me n t me t h o d f o r d e t e r mi n a t i o n 吐 a mi n oa c i d s i n c e r e a l g r a i n s1 适用范围 本标准适用于氨基酸分析仪测定谷物籽粒中氨基酸含量的样品前处理。2 方法原理 谷物籽 粒中 的氨基酸.系 按一定顺序结合成不同 类型的 肤和蛋白 质，因而在测定前要用一定浓度的酸使蛋白质中肤键断裂，水解成多种氨基酸后，用氨基酸分析仪测定.由于色氮酸在酸性溶液中水解时易被破坏，须用碱水解。3 仪器设备 3.1 分析天平:感量0.0 0 0 1 8,3.2 实验室用粉碎机。3-5 喷灯。3.4 真空泵。3.5 真空规。3.6 恒温干燥箱。3.7 水解管:用九五料玻瑞制的球形管或圆底试管。体积 1 5 -2 0 m l,3.8 聚四氟乙烯管;l o x l 0 0 m m,3.9 玻璃试管:0 1 5 X 1 8 0 m m,3.1 0 浓缩器(可控温，减压)或真空干燥器。3.1 1 容量瓶:2 5 m l,4 试荆 除注明者外均为分析纯。配制试剂均用去离子水，电导率大于 1 m。一 。4.1 4.2 4.3一 7 7,4.4 6 m o l/L 盐酸:盐酸(G B 6 2 2-7 7)，优级纯，与水按 1，1 混合。4 m o l/L氢氧化铿:用水溶解 1 6 8.8 g 氢氧化理(Q/H G 1 2-3 2 5-8 3),稀释至1 0 0 0 m 1;p H 2.2 缓冲液:1 9.6 g 柠橄酸三钠(H G 3-1 2 9 8-8 0)用水溶解后，加入1 6.5 m 1 盐酸(G B 6 2 2优级纯),5 m l 2 5 写硫代双乙醉,l g 苯阶(H G 3-1 1 6 5-7 8),最后定容至1 0 0 0 m 1,p H 4.3缓冲液:1 4.7 1 8 柠椒酸三钠(H G 3 一 1 2 9 8 一 8 0)和 2.9 2 g 氛化钠(G B 1 2 6 6 一 7 7)，1 0.5 0 8 柠檬酸(H G 3-1 1 0 8-8 1),溶解在5 0 0 m l 水中，再加入5 m l 2 5 硫代双乙醇，0.1 m l 辛酸，最后定容至l 0 0 0 m l a4.5 冷冻剂:液氮或干冰加丙酮(或加乙醇)。中华人民共和国农牧渔业部1 9 8 7-0 3 一 2 6 批准1 9 8 7 一 1 1 一 1 5 实施GB 7649一 875 试样制备5.1 取有代表性的样品，用四分法分取2 5 g 左右，拣去杂质，带壳籽粒进行脱壳。5.2 将样品放在6 0 6 5 恒温干燥箱中。干燥 8 h 左右冷却后在粉碎机中碾碎，全部通过孔径为0.2 5 m m的筛子，充分混匀后装入磨口瓶中备用。6 处理方法6.1 酸水解步驻6.1.1 称样称取样品3 0 士5 m g，准确至0.l m g,置于水解管中，同时另称样品按 G B 3 5 2 3-8 3(谷类、油料作物种子水分测定法，测定水分含量。6.1.2 水解 6.1.2.1 在水解管内加人 6 m o l/L盐酸 l O m l,管子放入冷冻剂中，冷却至溶液呈固体后取出，m m H g)后封口。在距管口2 c m左右处，用喷灯灼烧并拉一细颈。再将接在真空泵的抽气管上，使减压至7 P a 蕊5 X 1 0-6.1.2.2将封好口的水解管放在1 1 0 士1 的恒温干燥箱内，水解2 2-2 4 h 后，取出冷却。6.1.2.3 打开水解管，将水解液定量转移到2 5 m 1 容量瓶内，定容过滤，吸取滤液I m l，用旋转浓缩器(4 5 5 0 C)或置于真空干燥器内真空干燥，残留物用1-2 m 1 去离子水溶解蒸干，如此反复进行 1-2次，最后一次蒸干后，加p H 2.2 缓冲液溶解，供仪器测定.6.2 砚水解步钾B-2.1 称样 称取样品 6 0 f 5 m g准确至0.1 m g,置于聚四氟乙烯管内，同时按G B 3 5 2 3-8 3 测定水分。6 2，2 水解 6.2.2.1 在聚四氟乙烯管内加入4 m o l/L氢氧化锉l m l，使样品均匀湿润，然后把管子放人玻璃试管中，在玻璃管上端，离聚四氟乙 烯管4-5 c m处.用喷灯灼烧并拉一细颈，再放到冷冻剂中，冷却至溶液呈固体后取出，接在真空泵的抽气管上，减压至7 P a(5 X 1 0-m m H g)后封口。6,2.2.2 把管子放在1 1 0 士1 的恒温干操箱内水解2 0 h，取出冷却，将水解液定量转移到2 5 m l 容量瓶内，用6 m o l/L盐酸中和后，再用p H 4.3 的缓冲液定容，过滤后供测定色氨酸用。w w w.b z f x w.c o mGB 7649一 87 附录A氮墓酸分析仪测定的结果计算 (补充件)A。1式中A.2A.弓计算公式某 种 氨 基 酸，%(T 基，一 In(粤H X 1 0-X 2 5 X 1 0 0A测得的某种氮基酸在每毫升水解液中的含量，m g;。样品的质量，m g;H 样品的水分百分率;2 5-稀释倍数。结果衰示两个平行样品的测定结果用算术平均值表示，保留小数点后有效数字两位。结果的允许差两个平行测定值相对差不得大于 8%.附加说明:本标准由上海农科院测试中心负贵起草。本标准主要起草人顾金炎。