中华人民共和国国家标准谷类、豆类作物种子粗蛋白质测定法(半微量凯氏法)UDC633.1/.8:543.85.06GB2905一82Methodforindeterminationofcrudeproteincerealsandbeansseeds(Semi一microkjeldahlmethod)1适用范围本标准适用于测定谷类、豆类作物种子粗蛋白质含量。2仪器、设备2.12.22.32.42.52.62.7分析天平:感量。.0001克。实验室用粉碎机。半微量凯氏蒸馏装置(推荐使用龙科半微量滴定管:容积10毫升。硬质凯氏烧瓶:容积25毫升,50毫升锥形瓶:容积150毫升。电炉:600瓦。一A型半微量蒸馏装置)。3试剂3.1盐酸(GB622-77)或硫酸(GB625-77)。分析纯。0.02N、0.05N标准溶液(邻苯二甲酸氢钾法标定)3.2氢氧化钠(GB629-77):工业用或化学纯。40溶液(W/V)3.3硼酸一指示剂混合液。3.3.1硼酸(GB628-78):分析纯。2%溶液(W/V)3.3.2混合指示剂:嗅甲酚绿(HG3-1220-79)0.5克,甲基红(HG3-958-76)0.1克,分别溶于95写乙醇中,混合后稀释至100毫升。将混合指示剂与2%硼酸溶液按1:100比例混合,用稀酸或碱调节pH值为4.5,使呈灰紫色。即为硼酸一指示剂混合液。注:此溶液放置时间不宜过长,斋在一个月之内使用。3.4加速剂:五水合硫酸铜(GB665-78)分析纯,10克,硫酸钾(HG3-920-76)分析纯,100克,在研钵中研磨,仔细混匀,过40目筛。3.5浓硫酸(GB625-77)比重1.84,无氮。3.630%过氧化氢(HG3-1082-77):分析纯。3.730%过氧化氢一硫酸混合液(简称混液):30%过氧化氢、硫酸、水的比例为3,2,1,即在100毫升蒸馏水中慢慢加人200毫升浓硫酸,待冷却后,将其加人300毫升30过氧化氢,混匀。注:此混液可一次配制500-1000毫升贮藏于试剂瓶中备用。夏天最好放人冰箱或荫凉处贮藏,室温(20'C)上、下时不必冷藏,贮藏时间不超过一个月。3.8蔗糖(HG3-1001-76):分析纯。国家标准总局1982一,02一21发布1983一511一01实施GB2905-824试样的选取和制备4.1用一‘’选取有代表性的种子(带壳种子需脱壳)挑拣干净,按四分法缩减取样,取样量不得少于20克。将种I放1'60--65C烘箱中于燥8小时以上,用粉碎机磨碎,95%通过40目筛,装人磨口瓶备5测定步骤5.1称样称取0.1克试样两份(含氮1一7毫克),准确至。.0001克,同时测定试样的水分含量。5.2消煮:5.2.1将试样置于25毫升凯氏瓶中,加人加速剂粉末。除水稻为1克外,其他均为2克。然后加3毫升浓硫酸,轻轻摇动凯氏瓶,使试样被硫酸湿润,将凯氏瓶倾斜置于电炉上加热,开始小火,待泡沫停止后加大火力,‘保持凯氏瓶,f,的液体连续沸腾,沸酸在瓶颈中部冷...