GBT 36850-2018 番茄严重曲叶病毒检疫鉴定方法.pdf

GB/T36850-2018番茄严重曲叶病毒检疫鉴定方法1范围本标准规定了番茄严重曲叶病毒的免疫学及分子生物学的检疫鉴定方法。本标准适用于可能携带番茄严重曲叶病毒的寄主植物及其产品的检疫鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法SN/T2122进出境植物及植物产品检疫抽样SN/T2964植物病毒检测规范3基本信息中文名：番茄严重曲叶病毒学名：Tomato severe leaf curl virus缩写：ToSLCV异名：番茄严重卷叶病毒分类地位：双生病毒科(Geminiviridae)菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)。番茄严重曲叶病毒的其他信息参见附录A。4方法原理番茄严重曲叶病毒(ToSLCV)的免疫原性和基因组特征是该病毒检疫鉴定的依据。根据ToSLCV与抗体之间的特异性反应，对样品进行双抗体夹心酶联免疫吸附测定(DAS-ELISA);依据ToSLCV的基因组特征建立聚合酶链式反应(PCR)和环介导等温扩增技术(LAMP)检测方法：通过这些方法的有效组合，判断样品是否带有ToSLCV。5仪器、用具及试剂5.1仪器电子天平（感量0.001g)、高速离心机、小型瞬时离心机、普通冰箱、超低温冰箱（一80）、制冰机、涡旋振荡器、磁力搅拌器、高压灭菌锅、pH计、超净工作台、PCR仪、微波炉、电泳仪、电泳槽、凝胶成像分析仪、酶标仪。5.2用具酶联板、可调移液器(2.5L、10:L、20uL、1004L、200uL、1000uL)和可调移液器头、离心管1