GBT 26628.1-2011 粮油检验 储粮真菌标准图谱 第1部分：曲霉属.pdf

I C S6 5 0 2 0 0 1B0 4a 亘中华人民共和国国家标准G B T2 6 6 2 8 1 2 0 1 1粮油检验储粮真菌标准图谱第1 部分：曲霉属I n s p e c t i o no fg r a i na n do i l s-S t a n d a r da t l a so fs t o r e dg r a i nf u n g i P a r t1：A s p e r g i l l u s2 0 11-0 6-1 6 发布2 0 1 1-1 1 一0 1 实施丰瞀粥紫瓣警糌瞥星发布中国国家标准化管理委员会厘1 1 1刖瞢G B T2 6 6 2 8 1 2 0 1 1G B T2 6 6 2 8(p 翼一瞎。o樊。二。影，峨：一，。7*#自_ mv i p e b)图2 752 8 土曲霉(A t e r r e u s)b)图2 86 图谱说明G B T2 6 6 2 8 1 2 0 1 16 1菌落图谱中的3 0 表示培养温度为(3 0 _-t-1)，6 D 表示6 天，C D 表示培养基采用高盐察氏培养基，C A 表示培养基采用察氏培养基。6 2 显微特征图谱中的X 代表放大倍数，如2 0 0 x 表示放大2 0 0 倍。G B T2 6 6 2 8 1 2 0 1 1附录A(规范性附录)粮食中曲霉菌落观察及显微观察操作步骤A 1 设备和材料A 1 1 显微镜：放大倍数为l0 0 0 倍以上，内置光源，强度可调，宜具备数码照相功能，数码照相机的分辨率宜在3 0 0 万像素以上。A 1 2 目镜测微计：具有l o 倍的双目镜。A 1 3 物镜：配备1 0 倍、2 0 倍、4 0 倍、1 0 0 倍(油镜)。A 1 4 生物培养箱。A 1 5 冰箱。A 1 6 超净工作台。A 1 7 放大镜。A 1 8 酒精灯。A 1 9 接种钩针。A 1 1 0 解剖针。A 1 1 1 滴瓶。A 1 1 2 三角瓶。A 1 1 3 载玻片。A 1 1 4 盖玻片。A 1 1 5 培养皿。A 1 1 6 镊子。A 1 1 7 高压蒸汽灭菌器。A 2 培养基和试剂A 2 1A 2 2A 2 3A 2 4A 2 5A 2 6A 2 7乳酸一苯酚液：按G B4 7 8 9 2 8察氏培养基：按G B4 7 8 9 2 8 一高盐察氏培养基：按G B4 7 8 9香柏油。二甲苯。无菌水。7 5 乙醇。A 3 操作步骤2 0 0 3 的3 2 4 规定配制。2 0 0 3 的4 7 7 规定配制。2 82 0 0 3 的4 7 8 规定配制。A 3 1 菌落观察A 3 1 1用种植分离法或稀释分离法把粮食籽粒上的曲霉分离并纯化，将纯化后的未知菌株保存于斜面试管中备用。A 3 1 2 将分装于2 5 0m L 或5 0 0m L 三角瓶中已灭菌的高盐察氏培养基(A 2 3)熔化后，放人4 5 水浴中保温备用。A 3 1 3 将熔化培养基在超净工作台(A 1 6)中以无菌操作倾注于直径9c m 1 0c m 的培养皿(A 1 1 5)中，每个培养皿注入1 2m L 1 5m L，凝固后备用。3 2G B T2 6 6 2 8 1-2 01 1A 3 1 4 将接种针(A 1 9)经火焰灭菌并冷却后，从斜面试管(A 3 1 1)上蘸取极少量孢子，点植于培养皿中的培养基(A 3 1 3)上，一般点植成三角形的三点。A 3 1 6 将接完种的培养皿倒置并放入3 0 恒温培养箱(A 1 4)中培养6 天，用肉眼或放大镜观察菌落的生长或发育速度、菌落的颜色、菌落表面质地、菌落边缘、培养基颜色变化等。A 3 2 显微观察A 3 2 1取一片洁净的载玻片(A 1 1 3)，在中央滴一滴乳酸一苯酚液(A 2 1)。A 3 2 2 用接种针(A 1 9)或解剖针(A 1 1 0)从培养皿(A 3 1 5)或试管(A 3 1 _ 1)的纯化菌落上挑取少许含有子实体的菌体放人载玻片的液滴(A 3 2 1)中，并将菌丝体挑开，勿使成团。A 3 2 3 用镊子(A 1 1 6)取盖玻片(A 1 1 4)，从一边轻轻加盖，避免产生气泡，如果有气泡，可在酒精灯(A 1 8)上微微加热除去。A 3 2 4 用显微镜(A 1 1)观察载片标本中菌丝、子实体、孢子等的特征。A 4 观察结果A 4 1 将A 3 1 5 的观察现象与第5 章的菌落标准图 a)图)对照，确定菌的种类。A 4 2 将A 3 2 4 的观察现象与第5 章的显微特征标准图 b)图)对照，确定菌的种类。G B T2 6 6 2 8 1 2 0 1 1附录B(资料性附录)常见曲霉的主要形态特征B 1 黄曲霉(A f l a v u s)圈1菌落生长较快，在C D 培养基上5 天7 天直径3c m 4C m 或4c m 7c m，最初带黄色，然后变为黄绿色，反面无色或带褐色。在低倍显微镜下观察可见分生孢子头疏松放射状，继变为疏松柱状。顶囊烧瓶形或近球形，全部顶囊着生小梗，小梗单层、双层或单、双层同时生在一个顶囊上。分生孢子球形、近球形，粗糙。B 2 寄生曲霉(A p a r a s i t i c u s)图2菌落在c D 培养基上生长较快，5 天7 天直径4c m 7c m，平坦或带放射状沟纹，幼时带黄色，老后呈暗绿色，反面奶油色至淡褐色。低倍显微镜下观察，分生孢子头呈疏松放射状。分生孢子梗光滑或粗糙，顶囊近球形或烧瓶形。分生孢子球形，极粗糙，具小刺。B 3 杂色曲霉(A v e r s i c o l o r)图3菌落在C D 培养基上生长较局限，5 天7 天直径2c m 4c m，绒状、絮状或两者同时存在。颜色变化相当广泛，不同菌系可能局部淡绿、灰绿、浅黄甚至粉红色；反面近于无色至黄橙色或玫瑰色。有的菌落有无色至紫红色的液滴。分生孢子头疏松放射状，顶囊半椭圆形至半球形，上半部或四分之三部位上着生小梗，小梗双层。分生孢子球形，粗糙。B 4 构巢曲霉(A n i d u l a n s)图4菌落在C D 培养基上生长较局限，5 天7 天直径3c m 5C I T I，绒状，绿色，有的菌系由于产生较多的闭囊壳而显现黄褐色，反面紫红色。分生孢子头短柱形，分生孢子梗极短，常弯曲。小梗双层。分生孢子球形，粗糙。B 5 棕曲霉(A o c h r a c e u s)图5菌落在c D 培养基上生长较局限?5 天7 天直径3C m 5c m，褐色或浅黄色。反面带黄褐色或绿褐色。分生孢子头幼时球形，老后分裂成2 个3 个柱状分叉。分生孢子梗有明显麻点。顶囊球形。小梗双层，自顶囊全部表面密集着生。分生孢子球形至近球形，常粗糙。B 6 棒曲霉(A c l a v a t u s)图6菌落在C D 培养基上生长较局限，5 天7 天直径1c m 4c I n，绒毛状或厚毛毡状，灰淡青绿色，分生孢子头棍棒状。分生孢子梗粗大，表面光滑，无色。顶囊棍棒状。小梗一层，短，密生在顶囊表面。分生孢子椭圆形，光滑。B 7 巨大曲霉(A g i g a n t e u s)图7菌落在C D 培养基上生长较局限，5 天7 天直径2c m 4C I T I，绒毛状或厚毛毡状，淡蓝绿色至灰蓝绿色，分生孢子头近似棒状，但不如棒曲霉明显。分生孢子梗粗大，表面光滑，无色。顶囊棒状。小梗一层，短，密生在顶囊表面。分生孢子椭圆形，光滑。3 4G B T2 6 6 2 8 1 2 0 11B 8 栖土曲霉(A t e r r i c o l a)图8菌落在C D 培养基上生长较快，5 天7 天直径3c m 7c m，黄色或黄褐色，细密。分生孢子梗无色，光滑或具小颗粒。分生孢子头较小。小梗大部分双层，少数单层，单层和双层小梗通常可以在同一个分生孢子头内观察到。分生孢子有粗疏小刺。B 9 文氏曲霉C A w e n t i i)圈9菌落在C D 培养基上生长较快，5 天7 天直径3c r n 7c r i l，白色，密集成絮团状，菌落中间有棕褐色或咖啡色的分生孢子头区域。分生孢子头很大，圆球形。分生孢子梗很长。顶囊圆形。小梗二层，遍生于顶囊表面。分生孢子球形或椭圆形，表面通常粗糙，也有光滑的。B 1 0 灰绿曲霉群C A g l a u c u sg r o u p)图1 0菌落在C D 培养基上生长较快，5 天7 天直径3c m 7c m，绒毛状或絮状，呈灰青绿色，老时变为褐绿色或暗绿色。分生孢子头疏松辐射状。分生孢子梗光滑，有隔膜。顶囊不大，圆球形或圆顶形。小梗一层生于顶囊的全部或上部，小梗较粗。分生孢子椭圆形到近球形，有短刺。部分种产生大量黄色、橙色或橘红色的子囊孢子。B 1 1阿姆斯特丹曲霉C A a m s t e l o d a m i)图1 1菌落在C D 培养基上生长较快，5 天7 天直径3c r o 7c i n，绒毛状或絮状，菌落深绿色，带有硫黄色斑点，反面无色到淡黄色。子囊孢子扁豆形，表面粗糙，中央有明显的纵沟和隆起的边缘。B 1 2 薛氏曲霉C A c h e v a l i e r i)图1 2菌落在c D 培养基上生长较快，5 天7 天直径3c m 7c n l，最初为白色的短羊毛状，后变成具有成块的淡青色区域和埋藏有橙色子囊孢子区域。子囊孢子扁豆形，表面平滑或近似平滑，中央有脊线或纵沟，脊薄，呈鸡冠状，形状如滑轮。B 1 3 赤曲霉C A r u b e r)图1 3菌落在C D 培养基上生长较快，5 天7 天直径3c m 7C i T I，绒毛状或絮状，菌落为锈红色到深红棕色。产生大量赤红色子囊孢子。子囊孢子扁豆形，表面平滑或近似平滑，中央有脊线或纵沟，脊低而钝圆，中央沟宽而浅。B 1 4 近橄榄色曲霉(A s u b o l i v a c e u s)图1 4菌落在C D 培养基上生长较局限，5 天7 天直径2c m 4c i i l，菌落呈淡黄橄榄色或灰橄榄色，分生孢子头球形至放射状或柱状。小梗单层或双层，通常在同一菌种上可以看到这两种情况。分生孢子梗具有显著的小刺。分生孢子光滑或近于光滑。B 1 5 匍匐曲霉C A r e p e n s)图1 5菌落在C D 培养基上生长较快，5 天7 天直径3c m 7c I n，绒毛状或絮状，菌落污绿色混有黄色，产生大量橙红色子囊孢子。子囊孢子扁豆形，表面平滑或近似平滑，中腰有纵痕，无中央脊，也无中央沟。B 1 6 局限曲霉C A r e s t r i c t u s)图1 6菌落在C D 培养基上生长局限，5 天7 天直径1c m 3c m，菌落暗绿色到褐绿色。分生孢子头3 5G B T2 6 6 2 8 1 2 0 11小，为细长的柱状，类似青霉属中一些单轮生青霉穗。顶囊不大，近半球形。分生孢子卵圆形到圆桶形，表面粗糙。B 1 7 爪甲曲霉(A u n g u i s)图1 7菌落在C D 培养基上生长较局限，5 天7 天直径1c r n 3C I T I，绒状，暗黄至绿色，具有镶饰盒细尖的菌丝存在。分生孢子头短柱形，分生孢子梗极短，常弯曲。小梗双层。分生孢子球形，粗糙，具有小刺。B 1 8 烟曲霉(A n m i g a t u s)图1 8菌落在C D 培养基上生长较局限，5 天7 天直径2c m 4c m，绒状或带絮状，暗绿色、烟绿色，反面具有相同颜色。分生孢子头柱状，幼时青绿色。分生孢子梗短，表面光滑。顶囊瓶状。小梗一层，在顶囊的上半部或三分之二部密生。分生孢子球形，有小刺。B 1 9 黄叉曲霉(A f l a v p f u r c a t i s)图1 9菌落生长较快，在C D 培养基上5 天7 天直径4c r n 7c m，深黄绿至褐色然后呈暗褐色。分生孢子头较大，呈疏松放射状。顶囊烧瓶形或近球形，全部顶囊着生小梗，小梗单层、双层或单、双层同时生在一个顶囊上。分生孢子具有显著的小疣。B 2 0 无花果曲霉(A f i c u u m)图2 0菌落在C D 培养基上生长较快，5 天7 天直径3c m 5c m，粗地毡状，炭黑色，初期有