GBT 29405-2012 粮油检验 谷物及制品脂肪酸值测定 仪器法.pdf

GB/T29405一2012粮油检验谷物及制品脂肪酸值测定仪器法1范围本标准规定了光度滴定仪法和智能电位滴定仪法测定谷物及制品脂肪酸值的术语和定义、原理、试剂与材料、仪器和设备、操作步骤、结果计算与表示。本标准光度滴定仪法适用于稻谷、糙米、大米脂肪酸值的测定，智能电位滴定仪法适用于玉米、稻谷、糙米、大米、小麦粉脂肪酸值的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备GB5491粮食、油料检验扦样、分样法GB/T5497粮食、油料检验水分测定法GB/T6682一2008分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1脂肪酸值fat acidity试样中游离脂肪酸的含量。以中和100g试样干物质中游离脂肪酸所需氢氧化钾的毫克数表示，即以干基KOH计单位为mg/100g。4光度滴定仪法4.1原理在一定温度条件下，用无水乙醇提取试样中的游离脂肪酸，以百里香酚蓝指示液做指示剂，用氢氧化钾标准溶液滴定。采用光学传感器检测透过滴定体系溶液的光能量变化，自动判定滴定终点，人工读数或自动记录提取液消耗氢氧化钾标准溶液的体积。同时，通过微处理器系统，利用内置模式识别系统来控制滴定过程和处理滴定结果。4.2试剂与材料除非另有规定，所有试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T66822008中三级水的规格。4.2.1无水乙醇。4.2.295%乙醇。1GB/T29405-20124.2.3N,N-二甲基甲酰胺。4.2.4百里香酚蓝。4.2.5中性乙醇：量取20L95%的乙醇(4.2.2)，滴加5滴酚酞指示剂(4.2.8)，用氢氧化钾标准滴定溶液(4.2.7)滴定至微红色，并于30s内不褪色，记下所耗氢氧化钾标准滴定溶液毫升数(V.);量取500mL95%的乙醇，准确加入V。mL(V。=25V,)氢氧化钾标准滴定溶液，混合均匀备用。4.2.6氢氧化钾标准储备液：0.5mol/L。按GB/T601配制和标定，储于聚乙烯塑料瓶中。注：氢氧化御标准储备液在常温(1525)下保存时间一般不超过2个月。当溶液出现浑浊、沉淀、颜色变化等现象时，应重新配制。4.2.7氢氧化钾标准滴定溶液：0.01mol/L。准确移取10.0mL氢氧化钾标准储备液(4.2.6)于500mL容量瓶中，用中性乙醇(4.2.5)定容，混匀后置于聚乙烯塑料瓶中。临用前配制。4.2.810g/L酚酞指示剂：称取1.0g酚酞溶于100mL95%的乙醇(4.2.2)。4.2.90.02g/L百里香酚蓝指示液：称取百里香酚蓝(4.2.4)0.02g(精确至0.0001g),用333mLN,N-二甲基甲酰胺(4.2.3)溶解，再用无水乙醇(4.2.1)定容到1000mL,混匀，置于棕色瓶中保存.4.2.10滤纸：快速定性滤纸，预先折叠。4.3仪器和设备4.3.1光度滴定仪：配75mL测量杯和加液装置。加液装置体积精度0.01mL。光度滴定仪分为全自动光度滴定仪和半自动光度滴定仪，其原理、技术参数和评价指标参见附录A。4.3.2天平：感量0.01g。4.3.3振荡器：往返式，振荡频率为100次/min。4.3.4实验砻谷机。4.3.5粉碎机：带0.8mm圆孔筛片的锤式磨，粉碎时应保持样品不发热。4.3.6具塞磨口锥形瓶：250mL。4.3.7玻璃短颈漏斗。4.3.8移液管：50mL、25mL、10mL.4.3.9具塞试管（大于25mL)或具塞锥形瓶(50mL).4.4操作步骤4.4.1扦样和分样按GB5491执行。4.4.2试样的制备4.4.2.1稻谷试样制备：分取稻谷试样100g以上，用砻谷机(4.3.4)脱壳。再取脱壳后的髓米约80g,用粉碎机(4.3.5)粉碎，收集全部粉碎样品，充分混合均匀后装入磨口瓶中备用。4.4.2.2髓米、大米试样制备：分取糙米、大米试样约80g,同4.4.2.1粉碎、装瓶备用。注：试样制备后，应在2.内进行游离脂肪酸提取，以避免试样中脂肪酶的水解作用。4.4.3试样含水量测定按GB/T5497定温定时烘干法执行。4.4.4提取称取试样(4.4.2)10g士0.01g于250mL具塞磨口锥形瓶(4.3.6)中，用50mL移液管(4.3.8)准确加人50mL无水乙醇(4.2.1)，摇匀，置振荡器(4.3.3)上振摇10min。2GB/T29405-20124.4.5过滤振荡后静置1min2min,用玻璃短颈漏斗(4.3.7)和滤纸(4.2.10)过滤，弃去最初几滴滤液，用具塞试管或具塞锥形瓶(4.3.9)收集滤液25mL以上。4.4.6滴定光度滴定仪(4.3.1)的滴定管加满氢氧化钾标准滴定溶液(4.2.7)，并自动校正零点。用25mL移液管(4.3.8)准确移取25.0L滤液至测量杯中，再用另一支移液管准确移取25.0mL百里香酚蓝指示液(4.2.9)至测量杯中，加入搅拌子。将测量杯放入仪器测量池中并盖上盖，启动“滴定”按钮，当“终点”指示灯亮时即为滴定终点，光度滴定仪自动停止滴定。采用半自动光度滴定仪滴定，人工记下所耗用的氢氧化钾标准滴定溶液体积(V,)。采用全自动光度滴定仪滴定，仪器自动记存所耗用的氢氧化钾标准滴定溶液体积(V)。4.4.7空白试验用25.0mL无水乙醇(4.2.1)代替滤液，其余操作同4.4.6。采用半自动光度滴定仪滴定，人工记下所耗用的氢氧化钾标准滴定溶液体积(V。)。采用全自动光度滴定仪滴定，仪器自动记存所耗用的氢氧化钾标准滴定溶液体积(V。)。4.4.8平行试验取两份平行试样，按4.4.4一4.4.6分别进行测定。4.5结果计算4.5.1采用半自动光度滴定仪滴定，试样脂肪酸值(Ax)按式(1)计算：Ak-112oc%-V2c102。100m式中：Ax一试样脂肪酸值（以KOH计），单位为毫克每百克(mg/100g);11220一换算成氢氧化钾毫克数的常数，即56.12100；V滴定25mL试样提取液所耗氢氧化钾标准滴定溶液体积，单位为毫升(mL);V。滴定空白液所耗氢氧化钾标准滴定溶液体积，单位为毫升(L);氢氧化钾标准滴定溶液的浓度，单位为摩尔每升(ol/L);m试样质量，单位为克(g)；w试样水分质量分数，即100g试样中含水的质量，单位为克(g)。4.5.2采用全自动光度滴定仪滴定，输入试样含水量(4.4.3)和试样质量(4.4.4)后，仪器自动计算出试样脂肪酸值（以KOH计），以毫克每百克表示(mg/100g)。5智能电位滴定仪法5.1原理在一定温度条件下，用无水乙醇提取稻谷、糙米、大米、玉米中的游离脂肪酸，以苯提取小麦粉中的游离脂肪酸，用氢氧化钾标准溶液滴定，以电极作为指示终点的传感器，在滴定终点附近，被测离子的浓度发生突变，引起电极电位的突跃，采用模糊逻辑控制算法（灰度模型）与反向传播算法(BP神经网络)控制滴定过程，采集电极的动态信号，根据拟和曲线确定滴定终点，仪器自动计量并计算试样脂肪酸值。3