GBT 28976-2012 草莓潜隐环斑病毒检疫鉴定方法.pdf

GB/T28976-20125.4.2 SLRSV抗体、Trizol、.焦碳酸二乙酯(DEPC)、液氮、三氯甲烷、异戊醇、异丙醇、乙醇、B巯基乙醇、AMV反转录酶、Tag DNA聚合酶、DNA相对分子质量标记、溴化乙锭、琼脂糖、溴酚蓝等。血清学和分子生物学检测试剂配制见附录B。6症状观察及抽样6.1症状观察现场检疫主要观察进境植物材料上病毒为害的症状，SLRSV为害症状描述参见附录A。6.2抽样发现有病毒为害症状的植物材料直接送检：未发现症状的，则按SN/T2122中规定进行抽样，并送实验室检疫鉴定。7检疫鉴定7.1鉴定流程判定样品中是否携带草莓潜隐环斑病毒，应经过两种或两种以上的检测方法相互验证。具体操作流程可参照图1。病毒寄主植物/样品DAS-ELISART-PCR两种方法检测仅一种方法检测结两种方法检测结果均为阳性果为阳性结果均为阴性样品携带SLRSV样品不携带SLRSV免疫电镜、鉴别寄主反应或实时荧光RT-PCR至少一种方法检测结果均为阴性检测结果阳性图1 SLRSV鉴定流程图2