GBT 22262-2008 饲料中氯羟吡啶的测定 高效液相色谱法.pdf

GB/T22262-20085.5离心机：5000r/min.5.6旋转蒸发器：50，5.7涡轮混合器：2500r/min.5.8氧化铝净化柱：长度200mm,内径10mm玻璃柱。柱底部装有G4砂芯板，装人氧化铝约10cm的高度，使用前用20mL甲醇淋洗。6试样的选取和制备6.1按GB/T11699.1采样。6.2选取有代表性饲料样品至少500g,按GB/T20195制备样品。7分析步骤7.1试液的制备7.1.1提取准确称取配合饲料5g10g或浓缩饲料1g一5g、复合预混合饲料1g一5g(精确至0.001g),于50mL离心管中，加人甲醇25mL,旋涡混合，于振荡器振荡30min,3000r/min离心5min,取上清液备用。7.1.2净化准确吸取上清液10mL,移人氧化铝净化柱中，用10mL甲醇洗柱内壁。将过柱溶液及洗脱液全部接收于旋转蒸发瓶中，用50水浴的旋转蒸发器将溶剂蒸。用1mL甲醇溶解残渣，过0.454m的滤膜，滤液进液相色谱仪检测。7.2测定7.2.1液相色谱条件色谱柱：具有Cw填料的柱子（粒度为5m),柱长150mm,内径4.6mm。流动相：乙腈十水=10+90（体积比），以1.0mL/min流速洗脱。检测器：二极管矩阵检测器或紫外检测器，检测波长为270nm。7.2.2定量测定按高效液相色谱仪说明书调整仪器操作参数。向液相色谱柱中注人待测定氯羟吡啶标准工作液(4.5.2)及试液(7.1)，得到色谱峰面积响应值，用外标法定量。7.2.3结果计算试样中氯羟吡啶的含量X以质量分数(mg/kg)表示，按式(1)计算：X=P.XVXc.X V.P XmxV;式中：P,试样溶液峰面积值：V-样品的总稀释体积，单位为毫升(mL):c:一-标准溶液浓度，单位为微克每毫升（g/mL)；V一标准溶液进样体积，单位为微升（L);P标准溶液峰面积平均值；m一试样质量，单位为克(g)；V一-试样溶液进样体积，单位为微升（L)。平行测定结果用算术平均值表示，保留三位有效数字。8重复性同一分析者对同一试样同时两次平行测定结果的相对偏差不大于10%。2