GBT 24829-2009 毛刺线虫属（传毒种类）检疫鉴定方法.pdf

GB/T24829-20096现场检疫注意观察苗木的生长状况、根部为背状，以及是否带介质、土壤等。重点选取有生长不良或粗短根等症状的苗木及根际介质或土壤，如无可疑症状则按要求随机取样。取样后立即置密封塑料袋，标记后及时送实验室检测。具体抽样比例按SN/T1157和SN/T1158执行：7实验室检验7.1线虫分离线虫分离方法参见附录B。7.2体视显微镜镜检毛刺属线虫多数体长5004m10004m,放大1C倍以上可见。虫体呈圆柱形，短胖，行动缓慢。7.3标本制作若发现可疑毛刺属线虫，需制作临时玻片或永久玻片（参见附录C)。7.4生物显微镜观襄、摄彩和测量应针对雕、雄虫主要鉴定特征仔细观赛并显徽摄影，重点包括整体形态、齿针、雌虫阴道骨化结构及侧体孔、雄虫交合刺及泄殖腔前附着器等，并在每张图片上加相应标尺。需观察、测量获得多岐检索表中各鉴定特征数字代码（参见附录D,附录E、附录F、附录G),并计算a、b、V等值。样品足够时，应观察和拍摄雌、雄虫各15条以上。8形态学鉴定8.1毛刺属形态鉴定特征雄虫：热杀死后虫体尾部显著腹弯，呈“丁”形，表皮不强烈膨胀，后食道腺通常不覆盖肠（但有时背面或腹面覆盖肠)。通常有1个一3个腹中颈乳突，偶尔缺或有4个，般于齿针基部和神经环之间具1对侧颈孔，精子大，具呈香肠形或圆形的大精核。交合刺腹弯，光滑或具有纹饰、刚毛或缘膜。交合刺悬肌形成显著的悬肌囊包围交合刺，无交合伞（除T.paracedarus和T.cylindricus外）。通常有3个泄殖腔前附着器，很少为2、4或5个，通常至少有1个在缩回交合刺区域内。斜纹交配肌延伸到距缩回交合刺基端数倍体宽处。雌虫：热杀死后略向腹面弯曲，双生殖腺对伸，有受精囊（除T.nanjingensis外）。阴道约占半个体宽，阴道收缩肌发达，骨化结构显著。阴门孔状或横裂，很少纵裂。通常有1对4对侧体孔，其中1对侧体孔位于阴门附近一个体宽内，并且通常位于阴门后。肛门位于近末端，尾短圆，有1对尾孔。雌虫阴道骨化结构的形状以及雄虫交合刺的形状是最重要的种类鉴定依据，其他主要鉴定特征还有齿针长度、交合刺长度、泄殖腔前附着器、腹中颈乳突、交合刺的纹饰、雌虫侧体孔、引带等。8.2传毒种类形态鉴定特征传毒种类形态鉴定特征参见附水H,8.2.1圆筒毛刺线虫(T.cylindricus Hooper,1962)雄虫：热杀死后虫体后部较直。排泄孔前有3个腹中颈乳突，第】个腹中颈乳突位于齿针区域内，在齿针基部稍后有1对侧颈孔，具3个泄殖腔前附着器，最后一个位于缩回交合刺区域内。交合刺通常具光滑的柄状体，杆部前具横纹和刚毛，杆部后膨大且光滑，具较小的交合伞。雌虫：热杀死时虫体向腹面微弯曲，食道与肠从腹面略重叠，其他前部特征与雄虫相同。阴道为桶状，阴门骨化结构发育良好，侧面观为圆三角形，且三角形尖端指向阴门。阴门腹面观为一短横裂，有1对阴门后体孔。与近似种比较：圆筒毛刺线虫雄虫与T.cottieri、T.obscurus相似，三者交合刺的杆后部膨大，且最