GBT 18932.13-2003 蜂蜜中苯酚残留量的测定方法 高效液相色谱-荧光检测法.pdf

G B/T 1 8 9 3 2.1 3-2 0 0 3前言G B/T 1 8 9 3 2 的本部分等同采用加拿大标准A C C-0 1 8-V 3.l a 蜂蜜中笨酚残留量的测定方法高效液相色谱荧光测定法。对加拿大标准 A C C-0 1 8-V 3.1 的个别内容作了编辑性修改。本部分的附录A和附录B为资料性附录。本部分由中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局提出。本部分由中华全国供销合作总社归口。本部分起草单位:中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局。本部分主要起草人:庞国芳、李学民、曹彦忠、范春林、张进杰、贾光群。本部分系首次发布的国家标准。G B/T 1 8 9 3 2.1 3-2 0 0 3蜂蜜中苯酚残留量的测定方法 高效液相色谱一 荧光检测法范围G B/T 1 8 9 3 2 的本部分规定了蜂蜜中苯酚残留量高效液相色谱测定方法。本部分适用于蜂蜜中苯酚残留量的测定。本部分苯酚的方法检出限为。.0 2 0 m 刃k g.2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过 G B/T 1 8 9 3 2 的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。G B/T 6 3 7 9 测试方法的精密度通过实验室间试验确定标准测试方法的重现性和再现性(G B/T 6 3 7 9-1 9 8 6,n e q I S O 5 7 2 5;1 9 8 1)G B/T 6 6 8 2 分析实验室用水规格和试验方法(G B/T 6 6 8 2-1 9 9 2,n e q I S O 3 6 9 6:1 9 8 7)3 原理试样用水溶解，经过滤的试样水溶液通过反相液相色谱柱洗脱，苯酚用配有荧光检测器的高效液相色谱仪测定，外标法定量4 试荆和材料 除另有说明外，所用试剂均为优级纯，水为G B/T 6 6 8 2 规定的一级水。4.1 乙睛:色谱纯。4.2 苯酚标准物质:纯度)9 9%,4.3 苯酚标准储备溶液:准确称取适量的苯酚标准物质(4.2)，用水配制成浓度为。.1 m g/m 工标准储备溶液。4.4 苯酚标准工作溶液:根据需要用水将苯酚标准储备溶液(4.3)稀释成适当浓度的标准工作溶液。5 仪器5.15.25.3高效液相色谱仪:配有荧光检测器注射过滤器:容积为3 m l,或5 m l。微量注射器:1 0 0 u L o6 试样制备与保存6.1 试样的制备 对无结晶的实验室样品，将其搅拌均匀。对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过6 0 的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温。分出。.5 k g 作为试样。制备好的试样置于样品瓶中，密封，并标明标记。1G B/T 1 8 9 3 2.1 3-2 0 0 36.2试样的保存 将试样于常温下保存。7 分析步甄7.1 试样溶液的制备 称取5 g 试样，精确到0.0 1 g，加水使试样完全溶解，然后用水定容至1 0 m L 2 5 m L，摇匀后，用注射过滤器将试样溶液过滤至样品瓶内，摇匀后，供液相色谱仪测定。7.2 测定7.2.1 液相色谱条件 a)色谱柱:H y p e r s i l C,s 5)a m 1 5 0 m m X 4.6 m m(内径)或相当者;b)流动相:乙睛+水(3 0+7 0);c)流速:1.0 mL/mi n;d)检测波长:激发波长2 7 0 n m，发射波长2 9 5 n m;e)进样量;1 0 0 Ii L,7.2.2 液相色谱测定 根据试样溶液中苯酚含量情况，选定峰高相近的苯酚标准工作溶液。标准工作溶液和试样溶液中苯酚的响应值均应在仪器测定的线性范围内。对标准工作溶液和试样溶液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，苯酚的参考保留时间为7.5 2 m i n,苯酚标准物质的色谱图参见附录A中的图A.1,本方法的添加回收率数据参见附录B,7.3 平行试验 按上述步骤，对同一试样进行平行试验测定。7.4 空白试验 除不称取试样外，均按上述分析步骤进行。8 结果计算蜂蜜中苯酚残留量利用数据处理系统计算或按式(1)计算:h 二 V.气 告.h，.斤忍1 0 0 01 0 0 0.。.。.。.。.。二。.。二。.(1)式中:X 试样中苯酚的残留含量，单位为毫克每千克(m g/k g);h 试样溶液中苯酚的峰高，单位为毫米(mm);h,标准工作溶液中苯酚的峰高，单位为毫米(m m);几 标准工作溶液中 苯酚的浓度，单位为微克每毫升(p g/m L);V试样溶液最终定容体积，单位为毫升(m L);。最终试样溶液所代表的试样质量，单位为克(9)。注:计算结果需将空白值扣除。9 精密度本部分精密度数据是按照G B/T 6 3 7 9 的规定确定的，其重复性和再现性的值是以9 5%的可信度来it*9.1，复性在重复性条件下，蜂蜜中苯酚的含量在0.0 2 0 m彭k g-0.5 0 mg/k g范围，获得的两次独立测试结G B/T 1 8 9 3 2.1 3-2 0 0 3果的绝对差值不超过重复性限(r)，本部分的重复性限按方程式(2)计算 r=0.0 5 7 3 m十0.0 0 0 4 ”“(2)式中:二 两次测定值的平均值，单位为毫克每千克(m g/k g)e 如果两次测定值的差值超过重复性限，应舍弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定。9.2 再现性 在再现性条件下，蜂蜜中苯酚的含JR在0.0 2 0 m g/k g -0.5 0 m g/k g范围，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过再现性限(R)，本部分再现性限按方程式(3)计算:1 g R=0.9 5 1 6 l g m一0.9 9 2 2(3)式中:m两次测定值的平均值，单位为毫克每千克(m g/k g),G B/T 1 8 9 3 2.1 3-2 0 0 3 附录A (资料性附录)标准物质液相色谱图苯酚标准物质液相色谱图，见图A.1.苯阶 7.5 2 3图 A.附录B(资料性附录)回收率本方法中苯酚添加浓度及平均回收率的试验数据:在添加量为。.0 2 m g/k g 时，平均回收率为8 7.9%;在添加量为。.0 5 m g/k g 时，平均C07 收率为9 1.4%;在添加量为。.2 m g/k g 时，平均回收率为9 3.4%;在添加量为。5 m g/k g 时，平均回收率为9 4.1%.