GBT 20752-2006 猪肉、牛肉、鸡肉、猪肝和水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法.pdf

GB/T20752-20066试样的制备与保存6.1试样的制备实验室样品用组织捣碎机绞碎，分出0.5kg作为试样。6.2试样保存试样置于一18冰柜，避光保存。7测定步骤7.1混合基质标准校准溶液的制备7.1.1样品称取和脱脂称取5个阴性样品2g(精确到0.01g),分别置于50mL棕色离心管(5.9)中，加入10mL甲醇-水混合溶液(2+l),均质1min,再用5mL甲醇-水混合溶液洗涤均质器刀头，二者合并4000r/min离心5mi,吸取上清液弃掉。向5个离心管中分别加入适量四种硝基呋喃代谢物混合标准溶液(4.18)，使四种硝基呋喃代谢物最终测定浓度分别为0.5ng/mL、1.0ng/mL、2.0ng/mL、4.0ng/mL、10.0ng/mL。再向每个离心管中加入适量混合内标标准溶液(4.20)，使四种硝基呋喃代谢物内标物最终测定浓度均为2.0ng/mL。7.1.2水解和衍生化向上述每个离心管中加人10mL0.2mol/L盐酸溶液(4.11)均质1min,用10mL0.2mol/L盐酸溶液洗涤均质器刀头，二者合并后加入0.3mL衍生剂(4.13)，用液体混匀器混匀，置于37恒温振荡水浴(5.6)中避光反应16h。7.1.3净化上述衍生溶液放置至室温后，加入5mL0.1mol/L磷酸氢二钾溶液(4.10)，用1mol/L氢氧化钠溶液(4.12)调节溶液pH约为7.4,4000r/min离心10min,上清液（若待测样品含脂肪较多，上清液加5mL正己烷，振荡2min,4000r/min离心l0min吸取并弃掉正己烷)倒入下接Oasis HLB固相萃取柱(4.21)的贮液器(5.11)中，在固相萃取装置(5.4)上使样液以小于2mL/min的流速通过Oasis HLB柱，待样液全部通过固相萃取柱后用10mL水洗涤固相萃取柱，弃去全部流出液。用真空泵(5.7)在65kPa负压下抽千Oasis HLB固相萃取柱15min。用5mL乙酸乙酯(4.3)洗脱被测物于25mL棕色离心管中，使用氮气吹干仪(5.5)，在40水浴中吹干，用样品定容溶液(4.14)溶解并定容至1.0mL,混匀后过0.24m滤膜(4.22)用液相色谱-串联质谱测定。7.2待测样品溶液的制备称取待测样品2g(精确到0.01g),置于50mL棕色具塞离心管(5.9)中，加人10mL甲醇-水混合溶液(2+1)，均质1min,再用5mL甲醇-水混合溶液洗涤均质器刀头，二者合并4000r/min离心5mi,吸取上清液弃掉。向离心管中加入适量混合内标标准溶液，使四种硝基呋喃代谢物内标物最终测定浓度均为2.0ng/mL。按7.1.2和7.1.3操作。7.3阴性样品基质空白溶液的制备称取阴性样品2g(精确到0.01g),置于50mL棕色具塞离心管(5.9)中，加入10mL甲醇-水混合溶液(2+l),均质1min,再用5mL甲醇-水混合溶液洗涤均质器刀头，二者合并4000r/min离心5min,吸取上清液弃掉。按7.1.2和7.1.3操作。7.4测定7.4.1液相色谱条件a)色谱柱：Atlantis-C8,3.54m,150mm2.1mm(内径)或相当者；b)柱温：35；3