GBT 5009.85-2003 食品中核黄素的测定.pdf

GB/T5009.85-20034.4核黄素吸附柱：见图1。50mL8mm图1核黄素吸附柱4.5荧光分光光度计。5分桥步骤整个操作过程需避光进行。5.1试样提取5.1.1试样的水解准确称取2g10g样品（约含10g200g核黄素）于100mL三角瓶中，加50mL0.1mol/L盐酸，搅拌直到颗粒物分散均匀。用40mL瓷坩埚为盖扣住瓶口，置于高压锅内高压水解，10.310Pa30min。水解液冷却后，滴加1mol/L氢氧化钠，取少许水解液，用0.4g/L.溴甲酚绿检验呈草绿色，pH为4.5。5.1.2试样的酶解5.1.2.1含有淀粉的水解液：加入3mL10g/L淀粉酶溶液，于3740保温约16h。5.1.2.2含高蛋白的水解液：加3mL10g/L木瓜蛋白酶溶液，于3740保温约16h。5.1.3过滤上述酶解液定容至100.0mL,用干滤纸过滤。此提取液在4冰箱中可保存一周。5.2氧化去杂质视试样中核黄素的含量取一定体积的试样提取液及核黄素标准使用液（约含1g一10g核黄素）分别于20mL的带盖刻度试管中，加水至15mL。各管加0.5mL冰乙酸，混匀。加30g/L高锰酸钾溶液0.5mL,混匀，放置2min,使氧化去杂质。滴加3%双氧水溶液数滴，直至高锰酸钾的颜色退掉。剧烈振摇此管，使多余的氧气逸出。5.3核黄素的吸附和洗脱5.3.1核黄素吸附柱：硅镁吸附剂约1g用湿法装入柱，占柱长1/22/3（约5cm)为宜（吸附柱下端用一小团脱脂棉垫上)，勿使柱内产生气泡，调节流速约为60滴/min。5.3.2过柱与洗脱：将全部氧化后的样液及标准液通过吸附柱后，用约20mL热水洗去样液中的杂质。然后用5.00mL洗脱液将试样中核黄素洗脱并收集于一带盖10mL刻度试管中，再用水洗吸附柱，收集洗出之液体并定容至10L,混匀后待测荧光。618