ICSB565.150中华人民共和国国家标准GB/T19528-2004奥尼罗非鱼亲本保存技术规范Techniquestandardinholdingtheparentsofhybridbetweenniletilapia早andbluetilapia含2004-05-31发布2004-10-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会发布GB/T19528-2004oli青本标准的附录A、附录B和附录C为规范性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口本标准起草单位:中国水产科学研究院淡水渔业研究中心。本标准主要起草人:吴婷婷、杨弘、李建林。GB/T19528-2004奥尼罗非鱼亲本保存技术规范1范围本标准规定了奥尼罗非鱼亲本—奥利亚罗非鱼(Oreochromisaurea)和尼罗罗非鱼(Oreochromisniloticus)的来源、纯种鉴别、隔离饲养、提纯复壮和建档管理技术。本标准适用于奥尼罗非鱼亲本的保存。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。NY/T5054无公害食品尼罗罗非鱼养殖技术规范SC1027尼罗罗非鱼SC1042奥利亚罗非鱼SC/T1045奥利亚罗非鱼亲鱼SC/T1046奥尼罗非鱼制种技术要求3亲本来源3.1奥利亚罗非鱼来源按SC/T1045的规定执行。3.2尼罗罗非鱼来源按NY/T5054的规定执行。4亲本纯种鉴别4.1形态学鉴别奥利亚罗非鱼的外部形态特征应符合SC1042的规定，尼罗罗非鱼的外部形态特征应符合SC1027的规定。42细胞遗传学鉴别奥利亚罗非鱼的染色体数与核型应符合SC1042的规定;尼罗罗非鱼的染色体数与核型应符合SC1027的规定。4.3生化遗传学鉴别在血清醋酶的等电聚焦电泳图谱上，奥利亚罗非鱼具有一条等电点为pH4.69的特异性酶带，尼罗罗非鱼具有一条等电点为pH4.63的特异性酶带。血清醋酶等电聚焦技术见附录A,4.4分子遗传学鉴别4.4.1酶切线粒体DNA标记技术用限制性内切酶PvuI酶切在尼罗罗非鱼mtDNA上有3个或4个Pvun位点，奥利亚罗非鱼mtDNA上有5个Pvun位点。酶切线粒体DNA标记技术见附录B,4.4.2随机扩增多态性DNA技术(简称RAPD技术)应用RAPD技术筛选出四种引物可检测奥利亚罗非鱼或尼罗罗非鱼。引物OPZ06，奥利亚罗非鱼有一条900bp的片段，在尼罗罗非鱼中没有。引物OPZ10，尼罗罗非鱼有一条1500bp的片段，在奥利亚罗非鱼中没有。引物OPZ12，尼罗罗...
