GBT 5009.199-2003 蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测.pdf

GB/T5009.199-2003前言有机磷和氨基甲酸酯类农药在蔬菜中的残留问题和引发中毒的情况较为突出。本标准提供的两种检验方法，能快速检测有机磷和氨基甲酸酯类农药在蔬菜中的残留，以便及时发现问题，采取措施，控制高残留农药蔬菜的上市，保障人们食菜安全。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准起草单位：卫生部食品卫生监督检验所、北京市产品质量监督检验所、广东省疾病预防控制中心。本标准主要起草人：王林、王晶、张莹、邓峰、杨大进。570GB/T5009.199-200310.2显色剂：分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)和15.6mg碳酸氢钠，用20mL级冲溶液溶解，4冰箱中保存。10.3底物：取25.0mg硫代乙酰胆戮，加3.0mL蒸馏水溶解，摇匀后置4冰箱中保存备用。保存期不超过两周。10.4乙酰胆碱酯酶：根据酶的活性情况，用级冲溶液溶解，3mim的吸光度变化A。值应控制在0.3以上。摇匀后登4冰箱中保存备用，保存期不超过四天。10.5可选用由以上试剂制备的试剂盒。乙酰胆碱酯酶的A,值应控制在0.3以上。11仪器11.1分光光度计或相应测定仪。11.2常量天平。11.3恒温水浴或恒温箱。12分析步骤12.1样品处理：选取有代表性的蔬菜样品，冲洗掉表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取样品1g,放入烧杯或提取瓶中，加入5mL缓冲溶液，振荡1min2min,倒出提取液，静置3min5min,待用。12.2对照溶液测试：先于试管中加人2.5mL缓冲溶液，再加人0.1mL酶液、0.1mL显色剂，摇匀后于37放置15min以上（每批样品的控制时间应一致）。加入0.1mL底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放人仪器比色池中，记录反应3min的吸光度变化值A,。12.3样品溶液测试：先于试管中加入2.5mL样品提取液，其他操作与对照溶液测试相同，记录反应3min的吸光度变化值A:。13结果的表述计算13.1结果计算见式(1)。抑制率(%)=（A0一A:)/AX100(1）式中：A。一对照溶液反应3min吸光度的变化值，A,一一样品溶液反应3min吸光度的变化值。13.2结果判定结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。当蔬菜样品提取液对酶的抑制率50%时，表示蔬菜中有高剂盘有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复检验2次以上。对阳性结果的样品，可用其他方法进一步确定具体农药品种和含量。14附则14.1薛抑制率法技术指标14.1.1灵敏度指标：酶抑制率法对部分农药的检出限见表2。573