农业部2259号公告-15-2015 转基因植物及其产品环境安全检测 抗除草剂水稻 第1部分：除草剂耐受性.pdf

农业部2259号公告一15一20154.2.3试验地周围生态类型参照农业部953号公告一9.1一2007中4.2.3的规定执行。4.2.4气象资料参照农业部953号公告一9.1一2007中4.2.4的规定执行。4.3安全控制措施参照农业部953号公告一9.1一2007中4.3的规定执行。5试验方法5.1水稻对目标除草剂的耐受性5.1.1试验设计随机区组设计，不少于3次重复。种于田间，每重复面积1m2(1m1m),相互间距离0.5m以上：或种于网室或温室种植池（或盛装稻田土的苗盆）中，每重复水稻苗不少于50株。供试转基因水稻及非转基因水稻对照按常规方法浸种催芽至露白后，按200粒/m的密度播种。5.1.2试验处理与管理设置农药标签推荐剂量中量、2倍中量、4倍中量及清水对照。水稻4叶1心时排干田水，进行除草剂或清水的茎叶喷雾，各除草剂剂量与对照的用水量一致。喷药时的水分管理按目标除草剂使用要求进行（如：草甘膦、草胺磷喷药前应排干田水，且至少2d内不灌水），其他按当地常规方法管理。5.1.3调查和记录药前剔除弱苗，并调查健壮的稻苗总数。药后1周、2周、4周分别调查和记录各重复的正常苗（表1中0级、1级稻苗)数量：药后4周时还需按照表1标准目测和记录2级一5级稻苗的数量。表1除草剂药害症状的分级标准药害级别症状描述0级无药害，与清水对照生长一致1级微见药害症状，局部颜色变化（包括心叶轻微失绿），药害斑点占叶面积10%2级轻度抑制生长或失绿，药害斑点占叶面积11%25%3级对植株影响较大，植株矮化或叶畸形或药害斑点占叶面积26%50%4级对植株影响大，梢株明显矮化或叶严重畸形或叶枯斑占叶面积达51%75%5级药害极重，植株死亡或药害斑占叶面积75%5.1.4结果分析5.1.4.1按式(1)计算稻苗的药害率，结果保留1位小数。P=(T-N)/T100(1）式中：P一药害率，单位为百分率(%)：N一正常苗数；T一一药前调查的健壮苗总数。5.1.4.2用方差分析法比较药后不同时间调查的稻苗药害率的差异，并分析目标除草剂对水稻的作用特点。依据施药后4周的调查结果，按表2标准判断供试转基因水稻和非转基因水稻对照对目标除草剂的耐受性强度。农业部2259号公告一15-2015表2水稻对目标除草剂耐受性等级的判别标准耐受性等级症状描述优秀推荐剂量中量4倍处理时，药害率为0.0%良好推荐剂量中量4倍处理时有轻微药害（药害率50.0%，无4级和5级稻苗）：且推荐剂量中量2倍处理时稻苗药害率为0.0%一般推荐剂量中量2倍处理时有轻微药害（药害率0.0%，无4级和5级稻苗）：且推荐剂量中量处理时药害率为0.0%不合格推荐剂量中量处理时稻苗药害率0.0%5.1.5结果表述检测结果表述为“检测样品X对目标除草剂的耐受性表现为”，并描述非转基因水稻对照的具体药害症状；若转基因水稻表现为“良好”及以下等级，也描述具体的药害症状。5.2稻田杂草对目标除草剂的耐受性5.2.1耐目标除草剂稻田杂草的调查5.2.1.1试验方法5.2.1.1.1选择历年草害发生严重的稻田，在当地常规水稻种植季节翻耕整地，除按当地直播稻方式进行水分管理外，不进行其他农事操作。采用完全随机设计，不少于3个重复，每重复面积不少于300m2。5.2.1.1.2翻耕整地后30d35d,用目标除草剂推荐剂量中量进行茎叶喷雾处理1次。喷药时田间水分的管理按目标除草剂使用要求进行，其他按当地常规方法管理。5.2.1.2调查记录施药前目测田间杂草种类并记录其名称。药后2周目测各类杂草的存活情况，记录死亡（茎叶枯死)和存活的杂草名称，并对存活杂草进行标记（便于与除草剂使用后萌发的杂草区分）；药后4周时对其进行进一步观察，记录其死亡情况。5.2.1.3结果分析依据杂草在不同小区出现的情况，分析所发现的杂草种类及其分布情况；并将药后4周有存活植株的杂草种类当作对目标除草剂的候选耐性杂草。5.2.2耐性杂草对目标除草剂的耐受性5.2.2.1试验方法针对5.2.1中发现的候选耐性杂草，取其种子或幼苗种植于田间或室内（温室或网室），按当地直播稻苗期管理方式进行水分管理。采用完全随机设计，不少于3个重复，每重复植株数量不少于12株。5.2.2.2试验处理设置农药标签推荐剂量中量、2倍中量、4倍中量及清水对照。在杂草苗期进行除草剂或清水的茎叶喷雾，不同剂量处理与清水对照的用水量一致；喷药时的水分管理按日标除草剂使用要求进行，其他按当地常规方法管理。5.2.2.3调查记录药前记录杂草植株总数。药后1周、2周、4周分别目测和记录各重复的正常苗（表1中0级、1级植株)的数量。5.2.2.4结果分析按式(1)计算杂草的药害率。并采用方差分析法比较同一种杂草不同时间、不同剂量的药害率差异，分析除草剂对杂草产生药害的程度与时间进程，并分析杂草所能耐受的目标除草剂剂量范围。3