GBT 36841-2018 桃丛簇花叶病毒检疫鉴定方法.pdf

ICS65.020.01B16中华人民共和国国家标准GB/T36841一2018桃丛簇花叶病毒检疫鉴定方法Detection and identification of Peach rosette mosaic virus2018-09-17发布2019-04-01实施国家市场监督管理总局中国国家标准化管理委员会发布的涂层查真伪GB/T36841-2018桃丛簇花叶病毒检疫鉴定方法1范围本标准规定了桃丛簇花叶病毒检疫鉴定的血清学和分子生物学检测方法。本标准适用于桃树、葡萄、李、洋李等植物材料及传播介体如线虫中桃丛簇花叶病毒的检疫和鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3基本信息中文名：桃丛簇花叶病毒学名：Peach rosette mosaic virus缩写：PRMV分类地位：伴生豇豆病毒科(Secoviridae)豇豆花叶病毒亚科(Comovirinae)线虫传多面体病毒属(Nepovirus)。桃丛簇花叶病毒的其他信息参见附录A。4方法原理桃丛簇花叶病毒的血清学特性和基因组特征是该病毒检疫鉴定的依据，生物学测定为辅助鉴定手段。根据PRMV与抗体之间的特异性反应，对植物样品进行双抗体夹心酶联免疫吸附测定(DASELISA)和斑点酶联免疫吸附测定(Dot-ELISA);依据PRMV的基因组特征进行逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测。5仪器用具与试剂5.1仪器电子天平（感量0.001g)、高速冷冻离心机、小型瞬时离心机、普通冰箱、超低温冰箱（一80）、制冰机、旋涡振荡器、磁力搅拌器、高压灭菌锅、pH计、超净工作台、PCR仪、微波炉、电泳仪、电泳槽、凝胶成像分析仪、酶标仪、洗板机、恒温水浴锅。5.2用具酶联板、可调移液器(2.5uL、10L、20L、100L、200L、1000L)和可调移液器头、离心管(1.5mL、2.0mL)、研钵、微型磨杵等。