GBT 36831-2018 松纺锤瘤锈病菌检疫鉴定方法.pdf

GB/T36831-20183基本信息中文名：松纺锤瘤锈病菌英文名：Southern fusiform rust学名：Cronartium fusiforme Hedgcock&.Hunt ex Cummins无性态：Peridermium fusiforme J.C.Arthur&.Kern.分类地位：真菌界Fungi,担子菌门Basidiomycota,柄锈菌亚门Puccniomycotina,.柄锈菌纲Puccin-iomycetes,柄锈菌目Pucciniales,柱锈菌科Cronartiaceae,柱锈属Cronartium。传播途径：松纺锤瘤锈病菌主要通过气流及感病寄主传播。近似种：油松疱锈病菌Cronarttum coleosporioides,北美松疱绣病菌C.comandrae,香蕨柱锈菌C.comptoniae,苏格兰松疱锈病菌C,taccidum。松纺锤瘤锈病菌的其他信息参见附录A附录C。4方法原理松疱锈病菌的形态学特征及S1$4核酸序列比对结果作为检疫鉴定该病菌的主要依据，同时参考病原菌的发生国家和地区寄主范围及为害症状5仪器用具和生要试剂5.1仪器用具高压灭菌锅显微镜、观显微镜泳箱、P心保扩增仪电泳纹凝胶成像仪、高速冷栋离心机、恒温水浴锅、样晶袋、标签、放大镜培养m载玻片盖男手术手术剪镊子、吸管、酒精灯、滤纸等。5.2主要试剂三羟甲基氨基甲烷乙酸缓冲液、乙二胺四乙酸(EDTA)、乙酸、乙醇，引物TS1/ITS4、PCR缓冲液、Tag聚合酶、dNs(dATP,dTTP、dCTP、dGTP)、DNA分子量Marker等分子生物学试剂及基因组提取试剂盒。6检疫鉴定6.1症状检查观察松属寄主植物：)主干和枝条上是否有圆形、纺锤形或不规则的肿瘤，肿瘤表面皮层不规则破裂，且破裂处当年生出新皮层，来年再破裂，皮层完全脱落后，露出浸透松脂的木质部，颜色较深，犹如灼伤：b)肿瘤上部枝条或树干日久便枯死或风折，检查在肿瘤裂缝处是否有桔黄色蜜滴溢出，其中混有性孢子；)肿瘤表皮下是否有黄色疱状孢子器，含有大量的黄色粉状锈孢子；d)受侵种苗是否出现丛枝。