GBT 18649-2014 牛传染性胸膜肺炎诊断技术.pdf

C1120中华人民共和国国家标准GB/T18649-2014代替GB/T18649一2002牛传染性胸膜肺炎诊断技术Diagnostic techniques of contagious bovine pleuropneumonia2014-09-30发布2015-03-01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会发布GB/T18649-2014牛传染性胸膜肺炎诊断技术1范围本标准规定了牛传染性胸膜肺炎的病原学检查、聚合酶链式反应(PC)、补体结合试验、竞争ELISA(C-ELISA)试验诊断技术要求。病原学检查和聚合酶链式反应(PCR)适用于急性、亚急性及慢性病牛的病原诊断，补体结合试验和竞争ELISA(C-ELISA)试验适用于牛传染性胸膜肺炎感染牛的抗体检测。本标准适用于口岸、产地及集散地、养殖企业或养殖户对牛传染性胸膜肺炎的诊断。2流行病学健康牛和病牛接触，由呼吸道吸人病牛的“飞袜”是本病的主要传染途径。在该病的常在地区多见亚急性和慢性病程，以地方流行性为特点。但在新发生本病地区以急性经过为主。慢性病牛长期带菌，成为隐蔽的传染源。3临床症状暴发流行时多呈急性病程，体温在41以上稽留。呼吸系统症状非常明显，表现为：呼吸困难，呈腹式呼吸，咳嗽弱而无力，有浆液或脓性鼻汁流出。食欲废绝。4病理变化急性期病变以浆液渗出性纤维素性胸膜肺炎，间质多孔多汁，肺小叶出现各期肝变、多色，呈大理石样肺，肺胸膜和肋胸膜粘连，以及胸腔渗出液大量潴留为特征。转为慢性后逐渐形成肺包膜或坏死块。5病原分离鉴定5.1材料准备10%马血清马丁肉汤和琼脂培养基：见附录A。5.2病料采集用灭菌器械（注射器、剪刀、青霉素瓶、棉拭子等）无菌采集关节液、胸腔积液、鼻腔拭子和全血，关节液和胸腔渗出液置于青霉素瓶内。5.3病料的保存病料均放人4冰箱内保存，并在24h内送到指定实验室。如果在24h内不能送达，应放人一20冰箱内保存。5.4培养方法在无菌条件下吸取胸腔渗出液或关节液0.1mL0.3mL接种于培养基中即可。鼻腔拭子用1