GBT 14926.49-2001 实验动物 空肠弯曲杆菌检测方法.pdf

I C S 6 5.0 2 0.3 0B 4 4荡暴中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准G B/T 1 4 9 2 6G B/T 1 4 9 2 6G B/T 1 4 9 2 6GB/T 1 4 9 2 61 一1 4 9 2 6.6-2 0 0 18-1 4 9 2 6-1 7-2 0 0 1.4 1-2 0 0 1.4 4 一1 4 9 2 6.4 9-2 0 0 1实验动物微生物学检测方法(2)L a b o r a t o r y a n i ma l-Mi c r o b i o l o g i c a l e x a mi n a t i o n me t h o d s2 0 0 1 一 0 8 一 2 9发 布2 0 0 2 一 0 5 一 0 1实施中华人民共和国国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局发布目录G B/T 1 4 9 2 6.1-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.2-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.3-2 0 0 1 实验 动物G B/T 1 4 9 2 6.4-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.5-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.6-2 0 0 1 实 验动物GB/T 1 4 9 2 6.8-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.9-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 0-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 1-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 2-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 3-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 4-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 5-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 6-2 0 0 1 实验动物G B/T 1 4 9 2 6.1 7-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.4 1-2 0 0 1 实验动物G B/T 1 4 9 2 6.4 4-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.4 5-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.4 6-2 0 0 1 实验动物G B/T 1 4 9 2 6.4 7-2 0 0 1 实验动物G B/T 1 4 9 2 6.4 8-2 0 0 1 实验动物G B/T 1 4 9 2 6.4，一2 0 0 1 实验动物沙门菌检测方法 ，1单核细胞增生性李斯特杆菌检测方法 甲 ，4，5耶尔森菌检测方法 .9皮肤病原真菌检测方法 ，。1 3多杀巴斯德杆菌检测方法.1 7支气管鲍特杆菌检测方法 ，2 1支原体检测方法 。，一2 5鼠棒状杆菌检测方法 “3 0 泰泽病原体检测方法 。3 4大肠埃希菌0 1 1 5 a,c:K(B)检测方法 3 9嗜肺巴斯德杆菌检测方法 4 2肺炎克雷伯杆菌检测方法 ，。，4 6金黄色葡萄球菌检测方法 .5 0肺炎链球菌检测方法 ，5 4乙型溶血性链球菌检测方法 ，甲，1 一，“5 8绿脓杆菌检测方法 6 2无菌动物生活环境及粪便标本的检测方法 ，一6 6念珠状链杆菌检测方法 ，6 9布鲁杆菌检测方法 .7 3钩端螺旋体检测方法.，一 7 8志贺菌检测方 法 ，8 3一结核分枝杆菌检测方法空肠弯曲杆 菌检测 方法GB/T 1 4 9 2 6-4 9-2 0 0 1前台 本标准规定的猴空肠弯曲杆菌的检测方法，非等效参照国家标准 G B 4 7 5 9.9-1 9 9 4中空肠弯曲杆菌的检测方法以及医学检验中空肠弯曲杆菌的检测方法制定而成。本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:范薇。中 华 人 民 共 和 国 国 家 标准实验动物空肠弯 曲杆菌检测方法GB/T 1 4 9 2 6.4 9-2 0 0 1L a b o r a t o r y a n i ma l-Me t h o d f o r e x a mi n a t i o n o fC a m p y l o b a c t e r j e j u n i范 围本标准规定了实验动物空肠弯曲杆菌的检测方法。本标准适用于猴空肠弯曲杆菌的检测。2 引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。G B/T 1 4 9 2 6.4 2-2 0 0 1 实验动物细菌学检测标本采集 G B/T 1 4 9 2 6.4 3-2 0 0 1 实验动物细菌学检测染色法、培养基和试剂3原理空肠弯曲杆菌在培养基上有 特定的生 长、形态 和生理生化 特征。4主要设备和材料厌氧罐。混合气体5 0 0 氧气、1 0%二氧化碳和 8 5%氮气。真空泵。41棍们5 培养基及试剂5.1 C a r y-B l a i r 运送培养基。5.2 S k i r r o w琼脂平皿。5.3 改良C a mp-B A P琼脂平皿。5.4 血琼脂平皿。5.5 T T C琼脂。5.6 三糖铁琼脂。5.7 克氏双糖铁琼脂。58 氧化酶试剂。5.9 过氧化氢酶试剂。5.1 0 甘氨酸培养基。5 门1 硝酸盐培养基。5 门2 1%马尿酸钠溶液。中华人民共和国国家质f监督检 验检疫总局 2 0 0 1 一 0 8-2 9批准2 0 0 2 一 0 5 一 0 1实施c B/T 1 4 9 2 6.4 9-2 0 0 15.1 3 3 0 k g蔡吮酮酸药敏纸片。6检测程序7 操作步 骤了.1 采样 采取粪便或肛拭子。了.2 分离培养 将已接种的改良C a m p-B AP琼脂或 S k i r r o w琼脂尽快放人厌氧罐或玻璃干燥器内。如用厌氧罐，则先抽去罐内空气至负压7.3 X 1 0 P a(5 5 0 m m H g)，输人混合气使罐内压力恢复于零;再将罐内空气抽 g zG B/T 1 4 9 2 6-4 9-2 0 0 1至负压7.3 X 1 0 0 P a(5 5 0 m m H g)，同样输人混合气使罐内压力恢复于零，即可 放置温箱培养。如用玻璃干燥器，则按烛缸法进行，待蜡烛熄灭后放人恒温培养箱,(4 2 士1)c培养 4 8 h,73 鉴定7.3.1 菌落特征 本菌在改良C a m p-B AP琼脂或S k i r r o w琼脂平皿上(4 2 11)C 4 8 h可形成两型菌落。第一型菌落不溶血，灰色、扁平、湿润、有光泽，看上去呈水滴样，有从接种线上向外扩散的倾向;第二型菌落也不溶血，常呈分散凸起的单个菌落，直径为 1 2 m m，边缘完整、湿润、有光泽。了.32 菌体特征 本菌为革兰阴性菌，呈 S形、螺旋型或纺锤形，在固体培养基上培养时间过久或条件不适宜的情况下常呈现球形菌。大小为(0.3-0.4)p mX(1.5-3)p m。在暗视野显微镜或相差显微镜下观察，动力明显。7.3.3 过氧化氢酶和氧化酶试验均为阳性。7.3 4本菌接种克氏双铁或三糖铁(4 2 士力微需氧环境下培养 4 8-7 2 h,斜面和底层皆呈碱性反应;硫化氢纸条法显示阳性。7,15 甘氨酸耐受试验阳性 本菌接种于 1%甘氨酸培养基中，培养 4 8 h呈云雾状生长。7.3.6 不耐受 3.5%氯化钠 接种于3.5%氯化钠肉汤培养基培养4 8 h，不生长。7.3.7 禁v M 1 酸试验 将本菌涂布血平皿，贴上含3 0 p g蔡陡酮酸药敏纸片，培养 4 8 h出现抑菌环。7.3.8 T T C琼脂试验阳性。将本菌涂布 T TC琼脂平皿，培养 4 8 h，生长出紫色菌苔并有光泽。7.3.9 马尿酸钠水解试验阳性。7.3 门0硝酸盐还原试 验阳性8 结果报告凡符合上述各项检测结果者作出阳性报告，不符合者作出阴性报告。