GBT 14926.13-2001 实验动物 肺炎克雷伯杆菌检测方法.pdf

I C S 6 5.0 2 0.3 0B 4 4荡暴中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准G B/T 1 4 9 2 6G B/T 1 4 9 2 6G B/T 1 4 9 2 6G B/T 1 4 9 2 61 一1 4 9 2 6.6-2 0 0 18-1 4 9 2 6-1 7-2 0 0 1.4 1-2 0 0 1.4 4 一1 4 9 2 6.4 9-2 0 0 1实验动物微生物学检测方法(2)L a b o r a t o r y a n i m a l-Mi c r o b i o l o g i c a l e x a mi n a t i o n me t h o d s2 0 0 1 一 0 8 一 2 9发布2 0 0 2 一 0 5 一 0 1实施中华人民共和国国 家 质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局发 布目录G B/T 1 4 9 2 6.1-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.2-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.3-2 0 0 1 实验 动物G B/T 1 4 9 2 6.4-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.5-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.6-2 0 0 1 实 验动物GB/T 1 4 9 2 6.8-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.9-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 0-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 1-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 2-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 3-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 4-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 5-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.1 6-2 0 0 1 实验动物G B/T 1 4 9 2 6.1 7-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.4 1-2 0 0 1 实验动物G B/T 1 4 9 2 6.4 4-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.4 5-2 0 0 1 实验动物GB/T 1 4 9 2 6.4 6-2 0 0 1 实验动物G B/T 1 4 9 2 6.4 7-2 0 0 1 实验动物G B/T 1 4 9 2 6.4 8-2 0 0 1 实验动物G B/T 1 4 9 2 6.4，一2 0 0 1 实验动物沙门菌检测方法 ，1单核细胞增生性李斯特杆菌检测方法 甲 ，4，5耶尔森菌检测方法 .9皮肤病原真菌检测方法 ，。1 3多杀巴斯德杆菌检测方法.1 7支气管鲍特杆菌检测方法 ，2 1支原体检测方法 。，一2 5鼠棒状杆菌检测方法 “3 0 泰泽病原体检测方法 。3 4大肠埃希菌0 1 1 5 a,c:K(B)检测方法 3 9嗜肺巴斯德杆菌检测方法 4 2肺炎克雷伯杆菌检测方法 ，。，4 6金黄色葡萄球菌检测方法 .5 0肺炎链球菌检测方法 ，5 4乙型溶血性链球菌检测方法 ，甲，1 一，“5 8绿脓杆菌检测方法 6 2无菌动物生活环境及粪便标本的检测方法 ，一6 6念珠状链杆菌检测方法 ，6 9布鲁杆菌检测方法 .7 3钩端螺旋体检测方法.，一 7 8志贺菌检测方 法 ，8 3一结核分枝杆菌检测方法空肠弯曲杆 菌检测 方法GB/T 1 4 9 2 61 3-2 0 0 1前言 本标准是对 G B/T 1 4 9 2 6.1 3-1 9 9 4 实验动物肺炎克雷伯杆菌检验方法 的修订。本标准删除了G B/T 1 4 9 2 6.1 3-1 9 9 4中“3.1 S S琼脂，3.2 麦康凯琼脂、3.1 1肉浸液琼脂”，增加了较为方便的D H L琼脂。本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会 本标准主要起草人:范薇。本标准于 1 9 9 4 年 1 月首次发布。中 华 人 民 共 和 国 国 家 标准实验动物肺炎克雷伯杆菌检测方法GB/T 1 4 9 2 61 3-2 0 0 1L a b o r a t o r y a n i ma l-Me t h o d f o r e x a mi n a t i o n o f代替 G B/T 1 4 9 2 6.1 3-1 9 9 4Kl e b s i e l l a p n e u mo n i a范 围本标准规定 了实验动物肺 炎克雷伯杆菌的检测方法。本标准适用于小 鼠、大鼠、豚鼠、地 鼠、兔肺炎克雷伯杆 菌的检测。引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。G B/T 1 4 9 2 6.4 2-2 0 0 1 实验动物 细菌学检测标本采集 G B/T 1 4 9 2 6.4 3-2 0 0 1 实验动物细菌学检测染色法、培养基和试剂原理肺 炎克雷伯杆菌在培养基 上有特 定的生长、形 态和生理生化特征。主要设备和材料普通恒 温培养箱培养基和试剂5 门D HL琼脂平皿。5.2 克氏双糖铁或三糖铁琼脂。5.3 糖发酵培养基。5.4 缓冲葡萄糖蛋白陈水(甲基红、v-P试验用)。55 蛋白膝水、靛基质试剂。5，6 西蒙氏柠檬酸盐培养基。5.了 丙二酸钠培养基。5.8 氨基酸脱梭酶试验培养基。5.9 尿素培养基。5 门0 半固体琼脂培养基。中华人民共和国国家质f监 督检验检疫总局 2 0 0 1 一 0 8-2 9批准2 0 0 2一 0 5一 0 1实施GB/T 1 4 9 2 61 3-2 0 0 1检测程序标本DHL琼脂平皿可疑菌落接种碘化钾或T S I半固体动力试验生化试验报告操作步骤7 门采样 回盲部内容物或病灶组织等。了.2 分离培养 将已接种的 D H L琼脂置(3 6 士1)C培养 1 8 2 4 h,了.3 鉴定了3 门菌落特征 肺炎克雷伯杆菌在D HL琼脂平皿上形成菌落淡粉色，大而隆起，光滑湿润，呈粘液状，相邻菌落易融合成脓汁样，接种针挑取时可拉出较长的丝。7.3.2 菌体特征 革兰阴性短杆菌，大小为(0.3-0.5)p mX(0.6-6.0)p m，单个、成双或成短链排列，有英膜。病变组织直接涂片，呈卵圆形或球杆状，菌体外有明显荚膜，较菌体宽 2-3倍。连续传代后荚膜消失;无芽抱。7.3.3 本菌转种克氏双糖或三糖铁琼脂培养基(3 6 士D C 培养 1 8 2 4 h,斜面产酸，底层产酸产气，或仅产酸不产气，硫化氢阴性。7.3.4 生化鉴定 V-P试验阳性，硝酸盐还原试验阳性，M.R阴性，西蒙氏柠檬酸盐利用实验阳性，丙二酸盐试验阳 4 Rcs/T 1 4 9 2 61 3-2 0 0 1，尿素酶阳性、赖氮酸脱竣酶阳性、鸟氨酸脱梭酶阴性，利用葡萄糖和乳糖，靛基质阴性。3.5 半固体动力试验阴性。结果报告性又co凡符合上述各项检测结果者作出阳性报告，不符合者作出阴性报告。