ics67-040.10C53中华人民共和国国家标准GB/T18625-2002茶中有机磷及氨基甲酸醋农药残留量的简易检验方法酶抑制法Methodforsimpledeterminationoforganophosphorusandcarbamatepesticideresiduesintea-Enzymeinhibitionmethod2002一01一28发布加02一06一01实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布GB/T18625-2002前言本标准在制定过程中主要参考了以下标准:美国公职分析化学师协会AOAC12"29.049-29.055《食品中有机磷农药残留测定—胆碱醋酶抑制法》。本标准的附录A是规范性附录。本标准由辽宁省质量技术监督局提出。本标准由沈阳农业大学、沈阳市质量技术监督局苏家屯分局负贵起草。本标准主要起草人:周艳明、高淑英、张会娟、王晓光、李亮亮、吴小琳、牛森。GB/'r18625-2002茶中有机磷及氨基甲酸醋农药残留量的简易检验方法酶抑制法范围本标准规定了用酶抑制法测定茶中有机磷农药及氨基甲酸醋农药残留的简易检验方法。本标准适用于茶中有机磷农药及氨基甲酸醋农药残留的测定.2原理有机磷农药及氨基甲酸醋类农药对胆碱酷酶的活性有抑制作用，在一定条件下，其抑制率取决于农药种类及其含量。在pH8的溶液中，碘化硫代乙酞胆碱被胆碱酷酶水解，生成硫代胆碱。硫代胆碱具有还原性，能使蓝色的2,6一二氛靛酚褪色，褪色程度与胆碱醋酶活性正相关，可在600nm比色测定，酶活性愈高时，吸光度值愈低。当样品提取液中有一定量的有机磷农药或氨基甲酸醋类农药存在时，酶活性受到抑制，吸光度值则较高。据此可判断样品中有机磷农药或氨基甲酸酷类农药的残留情况。样品提取液用氧化剂氧化，可提高某些有机磷农药的抑制率.因而可提高其测定灵敏度.过量的氧化剂再用还原剂还原，以免干扰测定。试荆3.1底物溶液:2%碘化硫代乙酞胆碱水溶液，1g碘化硫代乙酞胆碱，加缓冲液溶解并定容至50mL,3.2缓冲液pH8的三经甲基氨基甲烷(Tris)-盐酸缓冲液,50mL0.1mol/LTris加29.2mL0.1mol/L盐酸加水定容至100MI。3.3显色剂:0.04%2,6一二氯靛酚水溶液。3.4氧化剂:0.5%次抓酸钙水溶液。3.5还原剂:10%亚硝酸钠水溶液。3.6胆碱酷酶液:0.2g酶粉(其制备方法见附录A)hp10ml，缓冲液溶解。3.7脱色剂:活性炭。3.8丙酮:分析纯。I9碳酸钙:分析纯。仪器分光光度计。分析步骤样品提取取。.5g茶置于10mL烧杯中。加5mL丙酮浸泡5min，不时振摇，再加。.2g碳酸钙.注:以上操作应存15--35(ia彦下决杆GB/T18625-20025.2叙化取0.5mL丙酮提取液于5mL烧杯中，吹干后加0.3mL缓冲液溶解。加人氧化剂0...
