GBT 14551-2003 动、植物中六六六和滴滴涕测定的气相色谱法.pdf

GB/T 1 4 5 5 1-2 0 0 3前言 本标准是对 G B/T 1 4 5 5 1-1 9 9 3 生物质量六六六和滴滴涕的测定气相色谱法 进行下述内容的修订:原标准中2.3制备色谱柱时使用的试剂、材料和3.6 色谱柱及 5.2.3校准数据表示的内容全 部删去;在第 5章色谱测定操作步骤中增加了测定条件 B、毛细管色谱柱及图谱;把 6.2.2精密度、6.2.3 准确度和6.2.4检测限的数据表格全部放到附录A中，原精密度用标 准偏差表示改为采用相对标准偏差表示 本标准的附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准的起草单位:农业部环境保护科研监测所。本标准的主要起草人:黄士忠、刘潇威、黄永春、王继军、买光熙、徐应明、李志祥、张克强。GB/T 1 4 5 51-2 0 0 3动、植物 中六六六和滴滴涕测定的 气相色谱法1范围 本标准规定了动物(禽、畜、鱼、E酬)、植物(粮食、水果、蔬菜、茶、藕)中六六六、滴滴涕残留量的测定方法。本标准适用于动物性样品(禽、畜、鱼、蛆蝴)、植物性样品(粮食、水果、蔬菜、茶、藕)中有机抓农药残留量的分析。2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准。然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。G B/T 1 7 3 3 2-1 9 9 8 食品中有机氯和拟除虫菊醋类农药多残留的测定 NY/T 3 9 7 农、畜、水产品污染监测技术规范3原理 动、植物样品中的六六六和滴滴涕农药残留量分析采用有机溶剂提取，经液一 液分配及浓硫酸净化或柱层析净化除去干扰物质，用电子捕获检测器(E C D)检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量。4 试荆与材料4.1 载气:氮气(NO，纯度)9 9.9 9%.4.2 标准样品及样品分析时使用的试剂和材料。所使用的试剂除另有规定外均系分析纯，水为蒸馏水。4.2.1 农药标准品:a-B H C 丰-B H C,Y-B H C,8-B H C,P.P-D D E,O.P -D D T,P.P -D D D,P.P -D D T，纯度为9 8.0%-9 9.0%.4.2.1.1 农药标准溶液的制备:准确称取农药标准样品每种 1 0 0 m g(准确到士。.0 0 0 1 g),溶于异辛烷(汗 B H C 先用少量苯溶解)，在1 0 0 m L容量瓶中定容至刻度，在冰箱中 贮存。4.2.1.2 农药标准中间溶液的配制:分别准确量取八种农药标准溶液，移至 1 0 0 mL容量瓶中，用异辛烷稀释至刻度，八种农药标准溶液的体积比为:Vo-B H C:V P B H C I V t B H C V&B H C I V P.，一。、，V O.P 二，VP.P-D M，V P.P-D D T=1，1，3.5，1，3.5，5，3，8,(适用于填充柱)4.2.1.3 农药标准工作液的配制:根据检测器的灵敏度及线性要求，用石油醚或正己烷稀释农药标准中间溶液，配制成几种浓度的标准工作液，在 4 下贮存。4.2.2 正己烷(C 6 H14):沸程6 7 C-6 9 0C，重蒸。4.2.3 石油醚:沸程 6 0 C-9 0 C，重蒸。4.2.4 异辛烷(C 8 H,.).4.2.5 丙酮(C H,C O C H,)，重蒸。4.2.6苯(C G HG):优级纯GB/T 1 4 5 51-2 0 0 34.2.7 浓硫酸(H 2 S O,):优级纯。4.2.8 发烟硫酸(H 2 S O,X S O,)e4.2.9 高氯酸(H C I O,):优级纯。4.2.1 0 冰乙酸(C H,C O O H):优级纯。4.2.1 1 无水硫酸钠(N a g S O,):在 3 0 0 烘箱中烘烤4h，存放于干燥器中备用。4.2.1 2 硫酸钠溶液:2 0 g/L,4.2.1 3 硅藻土:试剂级。4.2.1 4助滤剂 c C e l i t e 5 4 5.4-2.1 5 消解液:将 6 0%高氯酸及冰乙酸等体积混合。5仪器5.1 样品瓶，适宜的玻璃磨 口瓶。5.2 旋转蒸发器。5.3 索氏提取器。5.4 水浴锅。5.5 振荡器。5.6 万能粉碎机。5.7 组织捣碎机5.8 真空泵。5.9离心机。5.1 0 玻璃器皿:2 5 0 mL,5 0 0 mL分液漏斗，1 0 0,2 5 0,3 0 0 mL具塞锥形瓶，5 0 0 mL抽滤瓶，直径5 c m-9 c m 布氏漏斗，直径0.6 c m-1.0 c m，长2 0 c m玻璃层析柱，5 0 m L,1 0 0 mL量筒，2 5 0 mL平底烧瓶，1 0 m1 _ 2 0 mL刻度试管(经标定)，研钵。5-1 1 微量注射器。5.1 2气相 色谱 仪 带 电子捕获检测器(Ni 放射源)6样品6.1 样品性状6.1.1 样品种类:动物性样品(禽、畜、鸟、兽、鱼、蛆蝴);植物性样品(粮食、水果、蔬菜、茶、藕)。6.1.2 样品的状态:固体。6 _ 1.3 样品的稳定性，在各种样品中的六六六、滴滴涕化学性质稳定。6.2 样品的采集与制备 按照 NY/T 3 9 7规定采集。6.2.1 禽畜(包括鸟兽):家禽取 1 只3只杀好的，从脊背切开，取其整体一半，去骨骼，然后捣碎，混合，备用。家畜，根据测试目的，取其有代表性的样品。.5 k g-1.0 k g，捣碎，混匀，备用。6.2.2 鱼:去鳞、鳍、内脏，沿背脊纵剖后取其二分之一或数分之一 5 0 g以下者取整体)，剔刺，用滤纸吸干表面水，切碎，混匀，备用。6.2.3 贩闯:从田间采集贩闯 2 0条一5 0条，在玻璃器皿中自然排泥2天(皿底垫滤纸加水湿润，然后洗净，用滤纸吸干表面水，取 2 0条切碎，混匀，备用。6.2.4 粮食:采取 5 0 0 g具代表性的(小麦、稻米、玉米等)样品，粉碎，过 4 0目筛混匀，装人样品瓶备用。6.2.5 果蔬、藕:取其代表性的果蔬、藕的可食部分 1.0 k g，切碎，取 2 0 0.0 g测水分含量，其余供实验用。GB/T 1 4 5 51-2 0 0 36.2.6 茶叶:鲜样同6.2.5，干样同6.2.4,6.3 样品的保存生物样品，采集后应尽快分析，如暂不分析可保存在一1 8 冷冻箱中。7分析步骤7.1 提取7.1.1 粮食7.1.1.1 A法:准确称取1 0.0 g 样品 置于2 5 0 m L具塞三角瓶中，加人6 0 m L 石油醚浸泡过夜，将上清液转人2 5 0 mL分液漏斗中，再用 4 0 mL石油醚分两次洗涤三角瓶及样品，合并洗涤液于分液漏斗中，待净化。7.1.1.2 B 法:准确称取1 0.0 g 样品置于2 5 0 m L 具塞 三角瓶中，加人 1 0 0 m L石油醚，于电动振荡器上振荡 l h，提取液转移人 2 5 0 mL离心杯中(每次用 2 0 mL石油醚洗涤三角瓶后，倒人离心杯中离心1 0 m in)，上清液合并于2 5 0 m L分液漏斗中，待净化。7.1.2 果蔬、水生植物样(藕)7.1.2.1 A法:准确称取 2 0 0.0 g样品置于组织捣碎机缸内，快速捣碎 1 m i n 2 mi n，称取匀浆5 0.0 g，置于2 5 0 mL三角瓶中，加丙酮 1 0 0 mL，振摇 1 mi n,浸泡 l h后过滤人 5 0 0 mL分液漏斗中，残渣用3 0 mL 丙酮分三次洗涤，洗涤液合并于分液漏斗中，然后加人 5 0 mL石油醚，振摇 1 min，静置分层后，将下层丙酮水溶液移人另一 5 0 0 mL分液漏斗中，用 5 0 mL石油醚再提取一次，用 2 0 m L石油醚洗涤分液漏斗，并加人提取液中，然后加 2 0 0 mL硫酸钠溶液，振摇 1 mi n，静置分层，弃去下层丙酮水溶液、石油醚提取液，待净化。7.1.2.2 B 法:准确称取 鲜样5 0.0 g，加2 5 g 无水硫酸钠于 组织 捣碎机缸中，加人丙酮8 0 m L，石油醚2 0 mI，快速捣碎 2 m i n，浆液经装有助滤剂 5 4 5的布氏漏斗抽滤，然后用丙酮 1 0 X3 m l 一 冲洗残渣直至滤液近无色时止。滤液移人 5 0 0 mL分液漏斗中，加 1 0 0 mL硫酸钠溶液振摇 1 mi n，静置分层后，弃去水层，待净化。7.1.3 茶叶样品 准确称取 5.0 g 茶叶样，放人 1 0 0 mL具塞三角瓶中，加人 2 2 mI正己烷，3 mL丙酮，振摇。.5 h后浸泡过夜，而后用装有玻璃纤维的漏斗过滤，下接 2 5 mL容量瓶，用正己烷定容，然后取 5 mL(相当于1 g 茶叶 样)，待净化。7.1.4 动物性样品7.1.4.1 A法(消解法):准确称取样品2.0 g 5.0 g,置于1 5 0 m L 具塞三角瓶中，加人消解液 6 0H C I O;一 冰乙酸(I，1,V/V 4 0 mL，盖好玻璃塞，在室温下静置 1 2 h以上。然后在 8 5 0C-9 0 水浴中热消解 3h;待冷却后加人石油醚 1 0 mL，振摇 2 mi n,静置分层后用细嘴滴管将石油醚层移人 2 5 0 ml,分液漏斗中。再以2 0 m L石油醚分两次重复提取(最后一次在三角瓶中缓缓加人蒸馏水至瓶颈)。吸尽石油醚浮层，合并三次提取液于分液漏斗中，待净化。7.1.4.2 B法(索氏提取法):准确称取均样 2.0 g-5.0 g，加人 1 0 g-2 5 g 无水硫酸钠研成粉状，装人滤纸筒内，放人索氏提取器中，用 8 0 mL石油醚浸泡过夜后，抽提 4h-5h，每小时回流 4次6 次，冷却后将提取液转人 1 0 0 m工容量瓶中，在室温下用石油醚定容至刻度。7.2 净化7.2.1 A法(浓硫酸净化法):适用于土壤、粮食、果蔬、水生植物及动物肉类样品。在盛有石油醚提取液的分液漏斗中，按提取液体积的十分之一数量加人浓硫酸，振摇 1 m i n，静置分层后，弃去硫酸层(注意:用浓硫酸净化过程中，要防止发热爆炸，加浓硫酸后，开始要慢慢振摇，不断放气，然后较快振摇)，按上述步骤重复数次，直至加人的石油醚提取液二相界面清晰时止，然后向石油醚提取液中加人其体积量一半左右的硫酸钠溶液，振摇十余次，将其静置分层后弃去水层，如此重复至提取液呈中性时止(一般GB/T 1 4 5 5 1-2 0 0 32 次一4次)。石油醚提取液再经过装有 2g-3g 无水硫酸钠的筒型漏斗脱水，滤人 2 5 0 m L平底烧瓶中，用旋转蒸发器浓缩至5 mL，定容 1 0 m L，供气相色谱测定。7.2.2 B法(酸性硅藻土柱层析法):适用于茶叶、蛆蝴等小动物及动物内脏样品。取内径 0.8 c m-1.0 c m，长 1 8 c m-2 0 c m干燥的层析柱，柱底端塞上玻璃棉。加约 2 c m厚的无水硫酸钠，再装人3 g-4g 新调制的酸性硅藻土(1 0 g 硅藻土加 3 mL发烟硫酸，拌匀后，再加 3 ml-浓硫酸拌匀，即可)，上面再装 2 c m厚无水硫酸钠，用橡皮锤子轻轻敲打柱子，使其松紧适度。取待净化的提取液于旋转蒸发器中浓缩到 1 m L-2 mL，倾人装好的层析柱中，承接适当规格的容量瓶收集淋洗液。待层析往中提取液液面刚进人无水硫酸钠层后，用与提取液相同的溶剂1 0 m L(石油醚或正己烷)反复淋洗层析柱，直到容量瓶收集到定容 1 0 m L，供气相色谱测定。7.2.3 C法净化:遵照 G B/T 1 7 3 3 2-1 9 9 8中6.2的步骤进行，适用于粮食、水果、蔬菜样品，最后提取液需浓缩至1 0 M L,7.3 气相色谱测定7.3.1 测定条件 A7.3.1.1 柱 a)玻璃桂:2.0 m X2 m m(i.d)，填装涂有1.5%O V一1 7+1.9 5 0 o Q F-1 的C h r o m o s o r b W A W-DMC S,8 0目一1 0 0目的担体。b)玻璃柱:2.0 mX2 mm(i.