中华人民共和国国家标准乳酸菌饮料中乳酸菌的微生物学检验GB/T16347一1996Microbiologicalexaminationoflacticacidbacteriainyoghurtbeverage1主题内容与适用范围本标准规定了乳酸菌饮料中乳酸菌检验的技术要求。本标准适用于以鲜乳、乳粉或辅以大豆等为原料,经乳酸菌发酵加工制成的具有相应风味的活性乳酸菌饮料。2引用标准GB4789.28,食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3术语乳酸菌:一群能分解葡萄糖或乳糖产生乳酸,需氧和兼性厌氧,多数无动力,过氧化氢酶阴性,革兰氏阳性的无芽胞杆菌和球菌。乳酸菌菌落总数:检样在一定条件下培养后,所得1ml,检样中所含乳酸菌菌落的总数。4设备和材料:‘:温箱:36士10C。冰箱:0-4'C。恒温水浴:46士10C,电炉:可调式。吸管:容量为1,10和25mL,广口瓶或三角瓶:容量为500mL.平皿:直径为9Cm.试管:18X180mm,显微镜。月..门艺勺d月勺尸汽︺叹︺,了.……月﹃月叼月q月q月咔月q月q5培养荃和试荆5.1改良TJA培养基(改良番茄汁琼脂培养基)。5.2改良MC培养基(ModifiedChalmers培养基)。5.30.1%美兰牛乳培养基。5.46.5%抓化钠肉汤。5.5pl-I9.6葡萄搪肉汤。5.640%胆汁肉汤。57淀粉水解培养基。中华人民共和国卫生部1996一06一19批准1996一09一01实施GB/T16347一19965.8精氨酸水解培养基。5.9乳酸杆菌糖发醉管。5.10七叶昔培养基。5.11革兰氏染色液:按GB4789.28规定执行。5.123%过氧化氢溶液:按GB4789.28规定执行。5.13蛋白陈水、靛基质试剂:按GB4789.28规定执行。5.14明胶培养基:按GB4789.28规定执行。5.15硝酸盐培养基、硝酸盐试剂:按GB4789.28规定执行。5门6生理盐水:定量分装于三角瓶和试剂管内灭菌。6乳酸曲曲落总擞的测定6.1检验程序乳酸菌菌落总数检验程序如下:检作成几个适当倍数的稀释液选择2-3个适当稀释度,各以1mL之量加入灭菌平皿内每皿内加人适量改良TJA或改良MC培养基36士I'C菌落十72士3h计数报告6.2操作步孩6.2.1以无菌操作将经过充分摇匀的检样25mL(或25g)放人含有225mL灭菌生理盐水的灭菌广口瓶内作成1:10的均匀稀释液。6.2.2用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水的试管内(注意吸管尖端不要触及管内稀释液)。6.2.3另取1mL灭菌吸管,按上述操作顺序,作10倍递增稀释液,如此每递增一次,即换用1支1mL灭菌吸管。6.2.4选择2-3个以上适宜稀释度,分别在作10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度作两个平皿。6.2.5稀释液移入平皿...