ICS月4465.020.30暑昌中华人民共和国国家标准GB/T14926.50一14926.55-2001实验动物微生物学检测方法(3>Laboratoryanimal-Microbiologicalexaminationmethods2001一08一29发布2002一05一01实施中华人民共和匡国家质量监督检验检疫总周GB/T14926.5014926.55-2001目录GB/T14926.50-2001实验动物酶联免疫吸附试验···················································⋯⋯1GB/T14926.51-2001实验动物免疫酶试验.................................................................5GB/T14926.52-2001实验动物免疫荧光试验...............................................................9GB/T14926.53-2001实验动物血凝试验·····································⋯⋯‘二‘二”‘二‘二’二’..12GB/T14926.54-2001实验动物血凝抑制试验............................................................15GB/T14926.55-2001实验动物免疫酶组织化学法·.....................................................19GB/T14926.51-2001前言本标准修订了GB/T14926.18-1994《实验动物淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒检测方法》中的免疫酶试验方法,将其作为一个独立标准列出。本标准由中华人民共和国科学技术部提出并归口。本标准起草单位:中国实验动物学会。本标准主要起草人:贺争鸣。中华人民共和国国家标准实验动物免疫酶试验GB/T14926.51-2001Laboratoryanimal-Immunoenzymeassay(IEA)范围本标准规定了免疫酶试验(IEA)所用试剂、器材和操作步骤等。本标准适用于实验动物病毒抗体的检测。原理含有病毒抗原的细胞固定于玻片上,遇相应抗体形成抗原抗体复合物。此抗原抗体复合物仍保持其抗原活性,可与相应的第二抗体酶结合物结合,遇酶底物产生颜色反应。在普通显微镜下,根据颜色的反应判定结果。主要试剂与器材试剂,抗原片1.1抗原片的制备3313131将病毒接种敏感细胞(表1),待细胞出现病变或确知细胞内含有丰富的病毒抗原后,用胰酶消化分散细胞,PBS洗涤三次,最后用适量PBS悬浮细胞。将细胞悬液滴于玻片孔内同时消化不感染病毒的同批同种细胞,滴加同一玻片另一孔内,作为正常细胞对照。孔内滴加的细胞以细胞铺开、不重叠为宜。室温干燥后,冷丙酮(40C)固定10min。用蒸馏水漂洗后充分干燥,置于一20℃备用。3.1.1.2抗原片的鉴定每批抗原片在使用前,用相应的阳性血...