GBT 12290-1990 水果、蔬菜及制品 山梨酸含量的测定.pdf

中华人民共和国国家标准水果、蔬菜及制品 山 梨酸含量的测定GB 1 2 2 9 0-9 0Fr u i t s,v e g e t a b l e s a n d d e r i v e d p r o d u c t s一De t e r mi n a t i o n o f s o r b i c a c i d c o n t e n t 本标准参照采用国际标准I S 0 5 5 1 9-1 9 7 8 水果、蔬菜及制况 一山 梨酸含量的测定)o1 主题内 容与适用范围 本标准规定了水果、蔬菜及制品中山 梨酸的提取方法和提取物中山梨酸的两种测定方法。本标准适用于水果、蔬菜及制品中山梨酸的测定。2 原理 匀化样品，存在于试样中 的山 梨酸通过蒸汽蒸 馏，可定量地蒸出。所得馏出物在铜催化剂的作用下使二氧化硫氧化以除去F 扰，然后用紫外分光光度法测定山梨酸含量，或者通过铬酸氧化后用硫代巴比妥酸处理得到粉红色溶液，用分光光度法测定。3 试剂和溶液 本标准 所用试剂均为 分析 纯试剂，使用 蒸 馏水 或相应 纯度 的水。3.1 酒石酸，结 晶状;3.2 山 梨酸标准 溶液，0.0 1 g/L e 准 确 称取0.1 0 0 9 山 梨酸 溶于1 0 一 1 2 m L 0,1 mo l/L 氢 氧化 钠 溶液中，定量 的 移人 1 0 0 0 m L 容量瓶里，用水 稀释至刻 度。吸取上 述溶液5 0.0 m L 置于5 0 0 m L 容 量瓶中 用水 稀释至刻 度;3.3 氢氧化钙溶液:0.0 2 M o l/L;3.4 铜催化剂溶液:称取0.5 9 碳酸氢钠(G B 6 4 0)和0.0 0 1 9 硫 酸铜(GB 6 6 5)(C u S O 5 H,O)用 蒸馏水溶 解并稀释至1 L o3.与 铬酸一 硫酸溶液:3.5.1 0.1 5 m o l/L 硫 酸 溶 液:取 8.4 m L 比 重 1.8 4 9/-L 的 浓 硫 酸(G B 6 2 5)加 人 水 中，稀 释至1 L。3.5.2 铬酸一 1 溶液:称取0.0 5 9 重铬酸钾(G B 6 2 4)溶于g o mL水，移人2 0 0 m L容量瓶中，加人 0.1 5 m 0 1/L 硫酸溶液，用水 稀释至刻度;3.硫代巴比妥酸溶液:称取。.5 0 0 g 硫代巴比 妥酸 溶于5 0 m L 水中。加人1 0 m L l mo l/L 氢氧化 钠溶液，移至1 0 0 m L 容量 瓶中，加人1 1 m L l m o l/L 盐 酸溶 液，用 蒸 馏水 稀 释至 刻 度。该溶液不稳定，必须在配制后5 h 内使用。4 仪器、设备 常用实验室仪器、没备。4.1 分析天平:感量0.0 0 1 g;国家技术监督局1 9 9 0 一 0 3-2 9 批准1 9 9 0 一 1 2 一 0 1 实施GB 1 2 2 9 0-9 04.2 捣碎机或胡 钵;4.3 电热恒温水浴;4.4 蒸汽蒸馏装置，见下 图燕汽发生器 4.4.1 蒸汽蒸馏仪图4.4.1 蒸汽发生器:烧瓶容量为1 0 0 0.1 5 0 0 m L，4.4.2 起泡器:玻璃管直 径3 0 m m，高 2 7 0 m m 下部封闭，末 端扩大为直 径6 0 m m 的球体，试样放在球体内，供气管末 端与 起 泡器底部 之间距离为l o m m。用电 炉或火 焰加 热均可，若 用火焰加 热时，起泡器底部应放在一个具有孔径为 4 0 m m金属板的孔上，使火焰反射，避免试样焦化。控制加热使起泡器中 试 样的 体积的 蒸 馏期间减少或增加的量不超过5 m L e4.4.3 分 馏柱:直 径2 0 mm，高5 0 0 m m的玻璃柱内装螺旋形1 0 0 号不锈钢网，螺旋环间距1 5 m m.或是直 径2 0 mm,高6 0 0 m m具有玻璃定心孔的分 馏柱。或是具有同等分 馏功能的其他装置。4.4.4 冷凝 器:有 效长 度 4 0 0 m m，垂直 放 置，以 保 证 蒸 汽的 冷凝 和 馏出 物 的完 全 冷却。4.4.5 接收烧瓶:2 0 0、5 0 0 m L容量瓶。4.4.6 蒸 馏装置效果检查:在正 常蒸 馏条 件下，用 2 0 m L 0.1 mo 1/L 乙 酸溶液加 人 起泡器中，在1 5一 2 0 mi n 内收集蒸 馏液2 0 0 m L，乙酸的回收率应达9 9.5%-4.5 分光光度计:检测波长2 5 6 n-或5 3 2 n m e5 分析步骤5.1 试样的制备GB 1 2 2 9 0-9 05.，.1 液体样品(汁、液、搪浆等)和粘稠样品(果酱、菜泥等)，将样品充分混合后匀化。5.1.2 固体样品(水果、蔬菜)将 样 品切成 小 块，检 去 种子 和果壳，取约 4 0 g，在 捣 碎 机 或 研 钵中(4.2)使 其 匀 化。冷冻的样品，首先 在密闭容器中 融化，将 融化 的液体与样品合并后匀化。5.2 试样的分 取5.2.1 液体样品 吸取l o.o-L 试样(5.1.1)放到起泡器(4.4.2)里。或称取试样1 0 9，精确至0.0 1 g.5.2.2 粘稠或固体样品 称 取l o g 试样(5.1.1)精确至0.0 1 g，放人 起泡器(4.4.2)里，加水量至少 需要 淹没全部 样 品，摇匀，使其充分液化。若需要可将试样在水里浸泡1 一2 h.5.3 蒸馏 将。.5 g 酒石酸(3.1)放进 盛有试 样的起泡器里，把起泡器与 烧瓶(4.4.1)和冷凝器(4.4.4)连结，同时加热烧瓶和起泡器，进行 蒸馏，保持起泡器内容物体积增减在5mL以内。5.3.1 对 液体样品(5.2.1)，收集 蒸馏液于2 0 0 m L 的容量 瓶(4.4.5)内，当 达 到刻 度 时，停止蒸馏。5.3.2 对 粘稠或固 体样 品(5.2.2)，收集 蒸 馏液于5 0 0 m L 容量 瓶(4.4.5)内，蒸馏液的体积至少比 起泡器内容物体积大2 0 倍。5.4 测定5.4.1 方法A:用 紫外分光光度法测定5.4.1.1 如果原产品含有大 蒜、洋葱、韭菜的香精油时，为消除香精油的吸光度，用移液管取2 5 mL蒸馏液(5.3)移人小蒸发皿中，加1.5 一 2.0 m L的氢氧化钙溶液(3.3)使其呈碱性，在沸水浴(4.3)上 蒸 卜，5.4.1.2然后用 蒸馏水 溶解残 渣使 其恢复到原来的体积。吸取1 0.0 m L 蒸 馏液(5.3)或 蒸干 后重新得到 的溶液(5.4.1.1)置于5 0 mL 锥形 瓶内，加l o mL 铜催化剂(3.4),摇动，静置与 空气接触几分 钟。以 试剂空白 作对照，于 分光光度计(4.5)2 5 6 n-波长处测定溶液的吸光度。5.4.1.3通常分取1 0.0 m L，相当1 2 0 0 m g/L 或k g，对于高含量的样粼只取5.0 或2.0.L月水稀释p I O.O.L。标准曲线的绘制 吸 取山 梨酸标 准 溶 液(3.2)0.0.1.0,2.0.3.0、5.0、1 0.0 m L 分 别 置入 5 0 m L 锥形 瓶中，相应加入 蒸 馏水1 0.0.9.0.8.0.7.0.5.0、O.O m L 使体积为l o m L，所得溶液的 浓度为:0.1、2.3.5.j o m g/L 的 山 梨 酸，分 别 向 每 瓶中 加 铜 催 化 剂l o m L。以 试 剂 空 白 为 对 照，于 分 光 光 度 计 2 5 6 n-波长处测定溶液的吸光度。以山梨酸的含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。5.4.25.4.2.方法B:分光光度法1 如 果原 产 品中 含 乙 醇，吸取 2 5 m L 的 蒸 馏液(5.3)移 人 小 蒸发 皿中，加1.5-2.0 mL的氢氧化钙溶液使之呈碱性，在沸水浴上蒸发到原体积的一半，用 蒸馏水冲洗皿，定量转移至2 5 mL 的容量 瓶中，定容、摇匀。如果原产品含(柑桔、大蒜、洋葱、韭菜的)香精油时，可按步骤5.4.1.1 进行。5.4.2.2 吸取1 0.0 m L 蒸馏液(5.3)或经处理制 得的溶 液(5.4.2.1)于2 5 m L 容 量瓶中，加 人4 m L铬 酸一 硫 酸 溶 液(3.5)，放人 沸水 浴中 l o m i n。加4 m L 硫代 巴比 妥酸 溶液(3.6)，再 置 沸水 浴中2 0 mi n。溶液呈 粉红色，取出 放在冰水浴中 冷却，用 蒸馏水 稀释至刻度。同时按上述方法制备试剂空白溶液。在3 0 m i n 内，以试 剂空白 作对照，于分光光度计 5 3 2 n m 波长处测定溶液的吸光度。5.4.2.3 标准曲线的绘制 配 制2.0 mg/L 山 梨酸标准液，用4 体积水 稀释1 体积 的标准 溶液(3.2)。吸取该液0.0、z.0、GB 1 2 2 9 0-9 04.0.6.0.8.0.1 0.0 m L 分别置人6 个2 5 mL 的容量瓶内，相应加人水1 0.0.8.0.6.0.4.0.2.0、0.0 mL，使体积至l o mL,所得标准系列的浓度为0、0.4.0.8.1.2、1.6、2.0 mg/L山梨酸。以下步骤按试样的测定(5.4.2.2)进行。以山梨酸的含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制 标准曲 线。6 分析结果表示6.1 计算方法和公式6.1.1 液体样品山梨酸含量以mg/L 表示，山梨酸按式(1)(mg/L)计算:m i x 2 0 0 ”(1)一。式中:。;在标准曲线上查得蒸溜液(5.3.1)中山梨酸的含量，mg/L;Vi 在5.4.1.2 或5.4.2.2 中 所取的体积，mL(见5.4.1.2“注)。6.1.2 粘稠或固体样 品 山梨酸含量以mg/k g 表示，按式(2)计算:山梨酸(mg/k g)m,xVx1 0二 二 一.。.-.。x犷 1(2)阴式中:二。试样的重量，9。m;在标准曲线上查得蒸馏液(5.3.2)Y 收集 蒸 馏液的体积(5.3.2)，m L;中 山 梨酸的 含量，mg/L;IJ,在5.4.1.2 或5.4.2.2 中所取的体积，mL(见5.4.1.2“注)。6.2 允 许 差同一人员对同 一试 样同 时或连续两 次测定 结果之 间差异 不超过 平均值的5%。附加 说明:本 标 准由中 华 人 民 共 和国 农业 部 提出，全国 农 业 分 析 标 准化 技 术委 员 会 归口。本标 准由中国 农业科 学院分析测试中 心负 责起草。本标准主要起草人李伟格、陈必芳。