GB 29700-2013 食品安全国家标准 牛奶中氯羟吡啶残留量的测定 气相色谱-质谱法.pdf

GB29700-2013食品安全国家标准牛奶中氯羟吡啶残留量的测定气相色谱-质谱法1范围本标准规定了牛奶中氯羟吡啶残留量检测的制样和气相色谱-质谱的测定方法。本标准适用于牛奶中氯羟吡啶残留量的检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理试料中残留的氯羟吡啶，用乙腈提取，碱性氧化铝柱净化，N,O-双三甲基硅基三氟乙酰胺与三甲基氯硅烷衍生，气相色谱-质谱测定，外标法定量。4试剂与材料以下所用试剂，除特殊注明外均为分析纯试剂，水为符合GB/T6682规定的一级水。4.1氯羟吡啶对照品：含量99%。4.2无水硫酸钠：使用前在马弗炉内500煅烧5h,冷却后，过100目筛，备用。4.3碱性氧化铝：使用前在马弗炉内300煅烧3h,冷却后按每100g加水5mL,混匀，干燥器中过夜，备用。4.4N,O-双三甲基硅基三氟乙酰胺。4.5三甲基氯硅烷。4.6乙腈。4.7甲苯：色谱纯。4.8氦气：纯度99.999%。4.9衍生剂：取N,O-双三甲基硅基三氟乙酰胺99mL,加三甲基氯硅烷1mL,混匀。4.10氧化铝层析柱：氧化铝柱用30mm15mm具塞玻璃层析柱，下配G砂芯板，先装人适量的乙腈，然后装填1cm高的无水硫酸钠，中间装4cm高的碱性氧化铝，顶端再装1cm高的硫酸钠，轻轻敲实填匀，备用。4.11100g/mL氯羟吡啶标准贮备液：精明称取氯羟吡啶对照品适量，于100mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，配制成浓度为100g/mL的氯羟吡啶标准贮备液。-20以下保存，有效期6个月。1GB29700-20134.1214g/mL氯羟吡啶标准工作液：精密量取1004g/mL氯羟吡啶标准贮备液1.0mL,于100mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配制成浓度为1g/mL的氯羟吡啶标准工作液，28保存，有效期1周.5仪器与设备5.1气相色谱-质谱联用仪：配电子轰击离子源(E)。5.2分析天平：感量0.00001g。5.3天平：感量0.01g。5.4高速冷冻离心机。5.5旋转蒸发仪。5.6摇床。5.7聚丙烯离心管：50mL。6试料的制备与保存6.1试料的制备取适量新鲜或冷藏的空白或供试牛奶，混合均匀。一取均质后的供试样品，作为供试试料。取均质后的空白样品，作为空白试料。取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。6.2试料的保存一20以下保存。7测定步骤7.1基质匹配标准曲线的制备精密量取14g/L氯羟吡啶标准工作液适量，分别添加至经提取、净化步骤处理的6份空白试料洗脱液中，经衍生处理，制得浓度分别为5、10、20、100、250和500g/L的系列基质匹配标准溶液，供气相色谱法-质谱测定。以测得峰面积为纵坐标，对应的标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。求回归方程和相关系数。7.2提取称取试料2g士0.02g,于50mL聚丙烯离心管中，加乙腈5mL振荡30min。于46000/min离心10min,取上清液，残渣中加乙腈5mL,重复提取一次。合并两次上清液，加异丙醇2mL,于50旋转蒸发至近干，用乙腈5mL溶解残余物，备用。7.3净化碱性氧化铝柱用乙腈15mL活化，取备用液过柱，自然流干，加乙腈10mL洗脱，收集洗脱液，于50氮气吹干。GB29700-2013X=AcsXyAs X m式中：X一一一供试试料中氯羟吡啶的含量，单位为微克每千克（g/kg):A试样溶液中氯羟吡啶的峰面积；cs一一空白基质标准工作液中氯羟吡啶的质量浓度，单位为微克每升（g/L):V一一最终试样体积，单位为毫升(mL);As一一空白基质标准工作液中氯羟吡啶的峰面积；m一一供试试料质量，单位为克(g)。注：计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留三位有效数字。9检测方法灵敏度、准确度和精密度9.1灵敏度本方法的检测限为24g/kg,定量限为5g/kg。9.2准确度本方法在54g/kg100g/kg添加浓度水平上的回收率为60%110%。9.3精密度本方法的批内相对标准偏差20%，批间相对标准偏差20%。4