GBT 12393-1990 食物中磷的测定方法.pdf

中华人民共和国国家标准食物中磷的测定方法GB 1 2 39 3一 9Me t h o d s f o r d e t e r mi n a t i o n o f p h o s p h o r u s i n f o o d s 本标准参 照采用国际标准I S O 3 9 4 6-1 9 8 2 f(淀粉和淀粉制品中总磷的测定一 分光光凿 法 和I S O2 9 6 2 一1 9 8 4 乳和乳制品中 总磷的测定分子 吸收光谱 法。1 主题内 容与适用范围 本标准规定了用分光光度法测定食物中的磷含量。本标准适用于各类食物中总磷的测定。第 一篇2 原理 食物中的有机物经酸氧化，使磷在酸性条件下与钥酸钱结合生成磷铂酸铁。此化合物经对苯 二 酚、亚硫酸钠还原成蓝色化合 物钥蓝。用分光光度计在波长6 6 0 n m处测定铂蓝的吸光值，以定量分析磷含量。本方法最低检出限为2 u B o3 试剂 本实验用水均需用蒸馏水或去离子水。试剂纯度均为分析纯。3.1 硫酸:比重1.8 4。3.2 高氯酸一 硝酸消化液:1+4 混合液。3.3 1 5%硫酸溶液(V/V):取1 5 m L硫酸徐徐加人到8 0 m L 水中混匀。冷却后用水稀释至1 0 0 m L o3.4 乍 目 酸铁溶液:称取 5 8 全 日 酸按(NH.)R M0,0 4 H,0 用1 5%硫酸稀释至l 0 0 mL。3.5 对苯 二酚溶液:和 匆 0.5 8 对苯二 酚于1 0 0 m L水中，使其溶 解，并加入一滴浓硫酸(减缓氧化作用)。3.6 亚硫酸钠溶液:利 橄 2 0 8 亚硫酸钠于l 0 0 mL水中，使其溶解。此溶液最好于实验前临时配制，否则可使相蓝溶液发生混浊。3.7 磷标准储备液(l o o p 8/mL):精 确称 取在1 0 5 下干 燥的磷酸二氢钾(优级纯)0.4 3 9 4 9,置于1 0 0 0 m L容量瓶中，加水溶 解并稀释至刻度。此溶液每毫升含1 0 0 V 8 磷。3.8 磷标准使用液(l o u g/m L):准 确吸取I O m L磷标准储备液，置于l 0 0 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。此溶液每毫升 含磷I O U e e4 仪器与 设备4.1 实验室常用设备。4.2 分光光度计。中华人民 共和国卫 生部1 9 9 0 一 0 3 一 1，批准1 9 9 0 一 1 2 一 0 1 实施GB 1 2 3 9 3一.0测定步.1 样品消化1.1 称 取各类食物的均匀干样。.1-0.5 9 或湿样25 g 于 l o o m L凯氏烧瓶中，加人3 mL硫酸、高抓酸一 硝酸消化液，置于消化炉上，瓶中液体初为棕黑色，待溶液变成无色或徽带黄色清亮民民3 mL液体时氏烧瓶，即消化完全。将溶液放冷，加2 0 m L水，冷却后转移至 1 0 0 m L容f瓶中。用水多次洗涤凯，洗液合并倒人容t瓶内，5.1.2 取与消化样品同f的硫酸5.2 磷标准曲线加水至刻度，混匀。此溶液为样品测定液。、高抓酸一 硝酸消化液，按同一方法做空白溶液。准确吸 取磷标准使用液。、0.5.1.0.2.0.3.0.4.0.5.O mL(相当于含磷盘。、5.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0 4 9)，分 别置 于2 0 m L 具 塞 试 管 中，依 次加 人2 m L 钥 酸 溶液 摇匀，静置 几 秒 钟。加人 1 mL亚硫酸钠溶液，1 mL对苯二酚溶液摇匀。加水至刻度，混匀。静置0.5 h 以后，在分光光度计6 6 0 n m波长处测定吸光度。以测出的吸光度对磷含最绘制标准曲线。，呼，呼0.0.众 侧双目0 0.0 1 0.0 2 0.0 3 0.0 4 0.0 5确。mg 磷标准曲线5.9 样品测定 准确吸取样品测定液2 m L及同t的空白 溶液(5.1.2)，分别置于2 0 m L具塞试管中，其余操作步骤同标准曲线(5.2)。以测出的吸光度在标准曲线上查 得未知液中的磷含量。5.4 计算 c V,人=x-x I O U.“二“.、1，开口r Z式中:X样品中磷含量，mg/1 0 0 g;c由标准曲线查得或由回归方程算得样品测定液中磷含量，mg t V,样品消化液定容总体积，mL，V,-测定用样品消化液的体积，mL.m-样品质量.9 aG皿 1 2 8 8 3 一.0.结果的孟复性 同一实验室平行测 定或重复测定结果相对偏差绝对值5%。第二篇7 原理 食品中的 有机物经酸破坏以后，磷在酸 性条件下与铂酸 钱结合生成磷铂酸铁。用抓化亚锡、硫酸阱还原磷 钥酸 铁成蓝色化合 物 相蓝。蓝色强度与磷含是成正比，可进行比色定全。B 试剂 本法所用试剂除注明外，均为分析纯。所有实验用水均为去离子水或蒸馏水。舀.1 硝酸。8.2 硫酸:比重1.8 4 0B.3 高氯酸。8.4 1 5 0/a 硫酸溶液:取1 5 mL硫酸，加人到8 0 m L水中，混匀。放冷以 后用水稀释至1 0 0-L a8.5 5%硫酸溶液:取5 mL硫酸，加人到9 0 m L水中，混匀。放冷以 后用水稀释至1 0 0 m L。8.6 3%硫酸溶液:取3 m L硫酸，加人到g o m L水中，混匀。放冷以后用水稀 释至1 0 0-L。8.7 钥酸钱溶液:同3.4。8.8氯 化 亚 锡一 硫 酸 阱 混 合 液:称 取0.1 8 抓 化 亚 锡(S n C 1 2.2 H 2 0),0.2 9 硫 酸 阱(N H 2 N H 2 H 2 S 0 4),加3%硫酸溶液并用其稀释至l 0 0 m L。此溶液置棕色瓶中，贮冰箱至少可保存一个月。8.9 磷标准储备液:精确称取在1 0 5 干燥至恒重的磷酸二氢钾(优级纯)0.4 3 9 4 9，用水溶解于1 0 0 m L容量瓶中，并加水至刻度，混匀。此溶液每毫升 含1 m 8 磷。置聚乙 烯瓶贮于冰箱中保存。8.1 0 磷 标准使用液:准确吸取磷标准储备液1.0 0-L于l 0 0 m L容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀。此溶液每毫升含l o u B 磷。9.1仪器 分光光度计。1 0 操作方法1 0.1 样品处理 称取各类食品的均匀干 样。.1-0.5 9,湿样5 9 左右于l o o-L三角 瓶中，加硝酸1 5 mL，高氯酸2 m L,硫 酸2 m L，混匀。于电热 板或电炉上小火加 热消化，瓶中液体开始变棕黑色时，不 断沿瓶壁补加硝酸至有机质分 解完全，加 大火力，至消化液发生浓密的白烟，溶液澄明 或微 带黄色。消化液 放冷，加水2 0 m L。放冷以后转移 至1 0 0 m L容量瓶中，用水多次洗涤三角 瓶，合 并洗液于容量瓶中，加水至刻 度，混匀。作为样品测定溶液。取与消化样品同量的硝酸、高抓酸、硫酸，按同一方法做试剂空白溶液。1 0.2 标准曲线绘制 取磷标准使用液。、0.2.0.4.0.6.0.8.1.O m L(相当于磷。、2.4.6.8,I O V B),分别置于2 5 m L比色管中，各加水约1 5 m L，5%硫酸溶液2.5 m L，钥酸铁溶液2 m L，氯化亚锡-硫酸腆混合液0.5 m L，各管均补加水至2 5 m L,混匀。在室温放置2 0 mi n 以后，用2 c m比色杯，在6 6 0 n m波长处，以 零管 作参 比，在分 光光度 计上分 别测 定其吸光度，以吸光 度对磷 含量绘制标准GB 1 2 忿，吕 一.0曲线。1 0.8 样品测定 准确吸取样品测定溶液1 一2 mL及同量的试剂 空白 液，分别置于2 5 m L比色管中，各加水约1 5mL,5%硫酸溶液2.5-L,铂酸铁溶液2 mL,氯化亚锡一 硫酸阱混合液0.5 mL。各管均补加水至2 5 m L，混匀。在室温放置2 0 m i n 以后，用2 c m比色杯，在6 6 0 n m波长 处，用水作参比，在分光光度计上分别测 定其吸光度。以测出的吸光度在标准曲线上查得未 知液的磷含量。1 0.1 计算X=(c 一 c o)x F I脚FZx 10 0 .1 0 0 0一 2，式中:X样品中磷含量，mB/l 0 0 B，由标准曲 线上查 得样品测 定溶液中磷含量，u 8;空白 溶液中 磷 含量，肚 9，样品 质量，B i样品消化液的总体积，mL，测定用 样品消化液的体积，mL。气m叭气附加说明:本标准由中华人民共和国卫生部卫 生监 督司 提出，食品卫生标准分委员 会审查 通过。本标准由中国预 防医 学科学院营养与食品卫生研究所、北京市卫 生防疫站起草。本标准主要起草人王光亚、曲宁、涂小明。本标准由卫生部委 托技术归口 单位卫生部食品卫生监督检验所负责 解释。