GB 5009.253-2016 食品安全国家标准 动物源性食品中全氟辛烷磺酸（PFOS）和全氟辛酸（PFOA）的测定.pdf

中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准G B5 0 0 9.2 5 32 0 1 6食品安全国家标准动物源性食品中全氟辛烷磺酸(P F O S)和全氟辛酸(P F O A)的测定2 0 1 6-0 8-3 1发布2 0 1 7-0 3-0 1实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发 布G B5 0 0 9.2 5 32 0 1 61 食品安全国家标准动物源性食品中全氟辛烷磺酸(P F O S)和全氟辛酸(P F O A)的测定1 范围本标准规定了动物源性食品中全氟辛烷磺酸(P F O S)和全氟辛酸(P F OA)含量的同位素稀释液相色谱-串联质谱测定方法。本标准适用于动物源性食品中P F O S和P F OA含量的测定。2 原理试样中P F O S和P F OA经乙腈提取,通过分散固相萃取净化,用液相色谱-串联质谱仪测定,采用内标法定量。3 试剂和材料除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为G B/T6 6 8 2规定的一级水。3.1 甲醇(CH3OH):色谱纯。3.2 乙腈(CH3C N):色谱纯。3.3 盐酸(HC l)。3.4 氯化钠(N a C l)。3.5 乙酸铵(CH3C OONH4):色谱纯。3.6 N-丙基乙二胺固相吸附剂(P S A):4 0m6 0m,P r o E l u t填料,或相当者。3.7 C1 8吸附剂:4 0m6 0m,P r o E l u t填料,或相当者。3.8 石墨化碳黑吸附剂(G C B):4 0m6 0m,P r o E l u t填料,或相当者。3.9 乙酸铵溶液(5mm o l/L):准确称0.3 8 55g(精确至0.0 0 01g)乙酸铵,用水溶解定容至10 0 0m L。3.1 0 全氟辛烷磺酸(P F O S)和全氟辛酸(P F OA)标准品溶液:准确称取P F OA 纯度9 8%,C A S:3 3 5-6 7-1,C F3(C F2)6C OOH 和P F O S(纯度9 9%,C A S:1 7 6 3-2 3-1,C8H F1 7O3S)各1 0.0 0m g(精确至0.0 0 01g),用甲醇稀释至1 0 0m L,配置成浓度均为1 0 0g/m L的P F OA和P F O S标准溶液。-4环境下保存,有效期为6个月。3.1 1 P F OA标准储备溶液:吸取P F OA标准品溶液,用甲醇稀释,配制成浓度为1 0 0.0g/L的P F OA标准储备溶液;P F O S标准储备溶液:吸取P F O S标准溶液,用甲醇稀释,配制成浓度为1 0 0.0g/L的P F O S标准储备溶液。均在-4环境下保存,有效期为4个月。注:全氟辛烷磺酸(P F O S)在溶液中以全氟辛烷磺酸离子状态存在,样品溶液以及标准溶液以全氟辛烷磺酸定量。3.1 2 混合系列标准工作溶液:吸取标准储备溶液,用甲醇稀释,配制成P F OA浓度依次为0.0 5g/L、0.1g/L、0.5g/L、1.0g/L、2.0g/L、1 0.0g/L,P F O S浓度依次为0.1g/L、0.2g/L、1.0g/L、1 0.0g/L、2 0.0g/L、4 0.0g/L的混合系列标准工作溶液。-4环境下保存,有效期为2个月。3.1 3 1 3C4-P F OA标准品 溶液:通过甲 醇稀释配制,稀释至浓度 为5 0.0g/m L的标 准品 溶 液;G B5 0 0 9.2 5 32 0 1 62 1,2,3,4-1 3C4-P F O S标准品溶液:通过甲醇稀释配制,稀释至浓度为5 0.0g/m L的标准品溶液。均在-4环境下保存,有效期为6个月。3.1 4 内标混合使用溶液:吸取1 3C4-P F OA和1,2,3,4-1 3C4-P F O S标准品溶液,用甲醇稀释,配制成1 3C4-P F OA和1,2,3,4-1 3C4-P F O S浓度分别为1 0.0g/L和5 0.0g/L的内标混合使用溶液。-4环境下保存,有效期为4个月。3.1 5 内标混合使用溶液:吸取1 3C4-P F OA和1,2,3,4-1 3C4-P F O S内标混合使用溶液,用甲醇稀释,配制成1 3C4-P F OA和1,2,3,4-1 3C4-P F O S浓度分别为1.0g/L和5.0g/L的内标混合使用溶液。-4环境下保存,有效期为2个月。3.1 6 含有碳1 3同位素内标的混合系列标准工作溶液:吸取标准储备溶液以及内标混合使用溶液,用甲醇稀释,配制成P F OA浓度依次为0.0 5g/L、0.1g/L、0.5g/L、1.0g/L、2.0g/L、1 0.0g/L,P F O S浓度依次为0.1g/L、0.2g/L、1.0g/L、1 0.0g/L、2 0.0g/L、4 0.0g/L,以及1 3C4-P F OA和1,2,3,4-1 3C4-P F O S浓度均分别为1.0g/L和5.0g/L的含有1 3C同位素内标的混合系列标准工作溶液。-4环境下保存,有效期为2个月。3.1 7 滤膜:0.2 2m,有机相型。4 仪器和设备4.1 液相色谱-串联质谱仪:配有电喷雾离子源(E S I)。4.2 氮吹仪。4.3 粉碎机。4.4 离心机,转速50 0 0r/m i n。4.5 均质机,参考转速:34 0 0r/m i n 2 40 0 0r/m i n。4.6 分析天平:感量0.1m g和0.0 1g。5 样品制备鱼、虾、蟹、贝类、章鱼、鸡肉、猪肉、牛肉取其可食部分(去骨,去壳),切成小块,用粉碎机制成肉糜;蛋品去壳,制成匀浆;牛奶,混匀备用。将样品置于玻璃样品瓶中,密封,标识后置于-1 8保存。6 分析步骤6.1 样品前处理6.1.1 提取称取试样5g(准确至0.0 1g)(样品使用前解冻均质),置于5 0m L聚丙烯离心管中,加入内标混合使用溶液4 0 0L,加水5m L,漩涡混合1m i n,加入1 0m L乙腈(3.2)和3 0L盐酸(3.3),震荡1 0m i n。加入2g氯化钠(3.4),再次振摇1 0m i n,以50 0 0r/m i n离心1 0m i n。移取上层乙腈溶液于另一试管中,在4 5水浴中氮气吹至约4m L,待净化。6.1.2 净化将上述溶液转移至装有1 0 0m gP S A(3.6)、4 0m gC1 8(3.7)和2 0m gG C B(3.8)的1 5m L聚丙烯离心管中,振摇1 0m i n,以50 0 0r/m i n离心1 0m i n,移取上清溶液于另一试管中,在4 5水浴中氮气吹至干,用1m L甲醇(3.1)溶解,吸入1m L注射器,经0.2 2m有机滤膜过滤后,待测。G B5 0 0 9.2 5 32 0 1 63 6.2 测定6.2.1 液相色谱参考条件6.2.1.1 为降低高效液相色谱管道中引入的P F O S和P F OA的污染,液相系统中加一预柱,并对部分特氟龙材质管路替换为P E E K管路或不锈钢管路。6.2.1.2 分析色谱柱:C1 8,1 5 0mm2.1mm(内径),5m,或相当者。6.2.1.3 预吸附柱:C1 8,5 0mm4.6mm(内径),5m,或相当者。6.2.1.4 流动相梯度洗脱程序见表1。6.2.1.5 流速:2 0 0L/m i n。6.2.1.6 进样量:1 0L。表1 流动相梯度洗脱程序时间m i n5mm o l/L乙酸铵%甲醇%0.0 09 01 01.0 09 01 01.0 15 05 09.0 02 08 09.0 17 03 01 0.07 03 06.2.2 质谱参考条件6.2.2.1 离子源:电喷雾离子源负离子模式(E S I-)。6.2.2.2 扫描方式:多反应监测模式(MRM)。6.2.2.3 分辨率:单位分辨率。其他质谱条件参见附录A。6.2.3 定性测定按照6.2.1和6.2.2所述条件测定试样和标准工作溶液,试样的质量色谱峰保留时间应与标准物质一致,允许偏差小于2.5%;定性离子对的相对丰度与浓度相当的标准工作溶液的相对丰度一致,定性离子参考附录A表A.1,相对丰度允许偏差不超过表2规定的范围,则可判断样品中存在相应的被测物。表2 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度%5 02 05 01 02 01 0允许的最大偏差%2 02 53 05 0G B5 0 0 9.2 5 32 0 1 64 6.2.4 定量测定以各混合系列标准工作溶液中的P F OA或P F O S浓度和P F OA或P F O S与其相对应的1 3C同位素标记物的峰面积比绘制标准曲线,按照内标法进行定量计算。在6.2.1所述的色谱条件下,P F OA和P F O S的参考保留时间约为7.6 6m i n和8.7 8m i n,1 3C4-P F OA和1,2,3,4-1 3C4-P F O S的参考保留时间约为7.6 6m i n和8.7 9m i n,标准溶液的多反应监测(MRM)图参见附录B。标准工作溶液和样液中待测物的响应值均应在标准曲线的线性响应范围内,如果含量超过范围,则重新取样分析,增加相应内标添加量,使内标浓度与待测液浓度相匹配,然后用甲醇稀释到适当浓度后分析。6.3 空白试验除不加试样外,均按6.1及6.2所述操作步骤进行。7 质量控制7.1 取样抽样取样抽样均应采用不锈钢仪器,避免接触塑料。7.2 有机溶剂和试验器皿本标准中使用到的所有有机溶剂及试验器皿,在使用前,应进行空白试验。如本底值高于定量限,应对有机溶剂进行重蒸,或更换试验器皿,直至本底值低于定量限。8 分析结果的表述试样中P F OA和P F O S的含量按式(1)计算:X=(A-A0)Vfm(1)式中:X 试样中P F OA或P F O S的含量,单位为微克每千克(g/k g);A 试液中P F OA或P F O S色谱峰与相对应内标物色谱峰的峰面积比值,经标准曲线求得的对应的P F OA或P F O S浓度,单位为微克每升(g/L);A0 空白溶液中P F OA或P F O S色谱峰与相对应内标物色谱峰的峰面积比值,经标准曲线求得的对应的P F OA或P F O S浓度,单位为微克每升(g/L);V 试液最终定容体积,单位为毫升(m L);f 试液稀释倍数;m 试样的质量,单位为克(g)。计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保留两位有效数字。G B5 0 0 9.2 5 32 0 1 65 9 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的3 0%。1 0 其他本方法P F OA和P F O S的检出限分别为0.0 0 2g/k g和0.0 2g/k g,定量限分别为0.0 1g/k g和0.1g/k g。G B5 0 0 9.2 5 32 0 1 66 附 录 A质谱参考条件 质谱参考条件:a)喷嘴电压:-5 0 0V;b)雾化气压力:4 5P a;c)鞘气温度:2 6 0;d)鞘气流速:1 1L/m i n;e)干燥气温度:3 0 0;f)干燥气流速:6L/m i n;g)毛细管电压:-35 0 0V;h)定性离子对、定量离子对、碎裂电压、碰撞电压、驻留时间见表A.1。表A.1给出了P F OA、P F O S、1 3C4-P F OA和1,2,3,4-1 3C4-P F O S的定性离子对、定量离子对、碎裂电压、碰撞电压、驻留时间。表A.1 P F O A、P F O S、1 3C4-P F O A和1,2,3,4-1 3C4-P F O S的定性离子对、定量离子对、碎裂电压、碰撞电压、驻留时间化合物母离子子离子碎裂电压V碰撞电压e V驻留时间m sP F OA4 1 3.03 6 8.9a2 1 9.01 6 9.0-8 0-8 0-8 0-4-1 2-1 61 0 01 0 01 0 0P F O S4 9 8.91 3 0.0a9 9.08 0.0-2 0 0-2 0 0-2 0 0-5 0-5 5-9 01 0 01 0 01 0 01 3C4-P F OA