GB 29698-2013 食品安全国家标准 奶及奶制品中17β-雌二醇、雌三醇、炔雌醇多残留的测定 气相色谱-质谱法.pdf

GB29698-20134.175mol/L盐酸溶液：取浓盐酸48mL,用水溶解并稀释至100mL。4.18衍生化试剂：取二硫赤糖醇0.01g,用N-甲基三甲基硅基三氟乙酰氨(MSTFA)5mL溶解，于液面下加三甲基硅烷10L,混匀，28放置过夜，避光防潮密封保存。衍生化试剂应无色，如果发生棕红色等颜色变化，表明试剂失效。4.191mg/mL17-雌二醇、雌三醇、炔雌醇标准贮备液：精确称取17-雌二醇、雌三醇、炔雌醇标准品各10mg,分别于10mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，配成浓度为1mg/mL的标准贮备液。一20以下保存，有效期6个月。4.2010mg/L173-雌二醇、雌三醇、炔雌醇混合标准工作液：精密量取1mg/mL17-雌二醇、雌三醇和炔雌醇标准贮备液各1.0mL,于100mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配制成浓度为10mg/L的混合标准工作液，28保存，有效期1个月。5仪器和设备5.1气相色谱-质谱联用仪：EI源。5.2分析天平：感量0.00001g。5.3天平：感量0.01g。5.4氮吹仪。5.5固相萃取装置。5.6均质器。5.7旋涡混合器。5.8离心机。5.9烘箱。5.10pH计。5.11旋转浓缩仪。5.12滤膜：0.22m。6试样制备与保存6.1试料的制备取适量新鲜或冷藏的空白或供试样品，混合，并使均质。取均质后的供试样品，作为供试试料。一取均质后的空白样品，作为空白试料。取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。6.2试料的保存28保存。7测定步骤7.1标准工作曲线制备精密量取10mg/L混合标准工作液适量，用甲醇稀释，配制成浓度为10、50、100、200、500和1000g/L系列标准工作液，于40水浴氮气吹干，按衍生化步骤处理，供气相色谱法-质谱测定。以2GB29698-2013300,425,440(炔雌醇)。7.5.3测定法7.5.3.1定性测定通过试样色谱图的保留时间与相应标准品的保留时间、各色谱峰的特征离子与相应浓度标准溶液各色谱峰的特征离子相对照定性。试样与标准品保留时间的相对偏差不大于5%；试样特征离子的相对丰度与浓度相当混合标准溶液的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过表1的规定，则可判断试样中存在相应的被测物。表1定性确诊时相对离子丰度的最大允许误差%相对丰度502050102010允许偏差士10士15土20士507.5.3.2定量测定取适量试样溶液和相应的标准溶液，做单点或多点校准，按外标法，以峰面积定量，标准溶液及试样液中17-雌二醇、雌三醇和炔雌醇的响应值均应在仪器检测的线性范围之内。在上述色谱条件下，标准溶液、空白试样和空白添加试样的色谱图及质谱图见附录A。7.6空白试验除不加试样外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。8结果计算和表述试料中173-雌二醇、雌三醇、炔雌醇的残留量按式(1)计算。AXcsXVX=As Xm(1)式中：X供试试料中相应的17-雌二醇、雌三醇、炔雌醇残留量，单位为微克每千克（g/kg);A试样中相应的17-雌二醇、雌三醇和炔雌醇的峰面积；cs标准溶液中相应的17-雌二醇、雌三醇和炔雌醇浓度，单位为微克每升（g/L);V溶解残余物体积，单位为毫升(mL);As标准溶液中相应的17-雌二醇、雌三醇和炔雌醇的峰面积；m供试试料质量，单位为克(g)。注：计算结果需扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留三位有效数字。9检测方法灵敏度、准确度和精密度9.1灵敏度本方法检测限为0.5g/kg,定量限为1.0g/kg。9.2准确度本方法在1g/kg10g/kg添加浓度水平上的回收率为60%120%。4