GB 23200.54-2016 食品安全国家标准 食品中甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂残留量的测定 气相色谱-质谱法.pdf

ICS 点击此处添加 ICS 号 点击此处添加中国标准文献分类号 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 标 准 GB GB 23200.542016 代替SN/T 22372008 食品安全国家标准 食品中甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂残留量的测定 气相色谱质谱法 National food safety standards Determination of strobilurin fungicides residues in foods Gas chromatography-mass spectrometry 2016-12-18 发布 2017-06-18 实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 中华人民共和国农业部 发布 国家食品药品监督管理总局 GB 23200.542016 I 前前 言言 本标准代替SN/T 2237-2008 进出口食品中甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂残留量检测方法 气相色谱质谱法。本标准与SN/T 2237-2008相比，主要变化如下：标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式；标准名称和范围中“出口食品”改为“食品”；标准范围中增加“其它食品可参照执行”。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN/T 2237-2008。GB 23200.542016 1 食品安全国家标准食品安全国家标准 食品中甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂残留量食品中甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂残留量的测定的测定 气相色谱气相色谱-质谱法质谱法 1 1 范围范围 本标准规定了食品中 11 种甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂残留量（见附录 A）的制样和测定方法。本标准适用于苹果、梨、葡萄、甘蓝、黄瓜、蘑菇、橙汁、茶饮料、大米、板栗、牛肉、猪肉、鸡肉、鸡蛋和牛奶等食品中 11 种甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂残留量的测定。包括嘧菌酯、醚菌胺、嘧螨酯、氟嘧菌酯、醚菌酯、苯氧菌胺（Z、E 两种构型）、肟醚菌胺、啶氧菌酯、吡唑醚菌酯和肟菌酯，其它食品可参照执行。2 2 规范性引用文件规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 3 原理原理 试样用有机溶剂超声提取，凝胶渗透色谱(GPC)系统净化，洗脱液浓缩并定容后，气相色谱质谱仪测定，外标法定量。4 4 试剂和材料试剂和材料 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682中规定的一级水。4.14.1 试剂试剂 4.1.1 甲苯（C7H8）：色谱纯。4.1.2 环己烷（C6H12）：色谱纯。4.1.3 乙酸乙酯(C4H8O2)：分析纯。4.1.4 乙腈(C2H3N)：色谱纯。4.1.5 甲醇(CH4O)：色谱纯。4.1.6 三氯甲烷(CHCl3)：分析纯。4.1.7 氯化钠（NaCl），分析纯。4.1.8 无水硫酸钠（Na2SO4），分析纯。用前在 650灼烧 4h，置于干燥器中冷却后备用。4.2 4.2 溶液配制溶液配制 4.2.1 环己烷-乙酸乙酯（1+1，V/V）：取 100 mL 环己烷，加入 100 mL 乙酸乙酯，摇匀备用。4.3 4.3 标准品标准品 4.3.1 甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂标准物质：参见附录 A。4.4 4.4 标准溶液配制标准溶液配制 4.4.1 标准储备液：准确称取杀菌剂标准品 50 mg（精确到 0.1 mg），用甲苯溶解、转移至 50 mL 棕色容量瓶中并定容至刻度。该溶液浓度为 1 mg/mL。-18以下避光保存，保存期为 12 个月。4.4.2 标准中间液：吸取 1.00 mL。标准储备液，移入 100 ml。棕色容量瓶，用环己烷-乙酸乙酯定容，该溶液浓度为 10 g/mL。04避光保存，保存期为 1 个月。4.4.3 标准工作液：吸取一定量标准中间液，用环己烷-乙酸乙酯稀释至所需浓度，使用前配制。5 5 仪器和设备仪器和设备.5.1 气相色谱质谱联用仪(GC-MS)，配有电子轰击离子源（EI 源）。GB 23200.542016 2 5.2 凝胶色谱净化系统(GPC)。5.3 分析天平：感量 0.01 g 和 0.0001 g。5.4 均质器：最大转速 20 000 r/min。5.5 离心机：最大转速 5 000 r/min。5.6 旋涡混匀器。5.7 鸡心瓶：100 mL。5.8 塑料离心管：50 mL。5.9 氮吹仪。6 6 试样制备与保存试样制备与保存 6.1 6.1 试样制备试样制备 6.1.1 6.1.1 水果和蔬菜类水果和蔬菜类 抽取苹果、蘑菇、黄瓜等水果或蔬菜样品约 500 g，将其切碎后，用捣碎机将样品加工成浆状，混匀，均分成两份作为试样，分装入洁净的样品瓶内，密闭并标明标记。6.1.2 6.1.2 粮谷和坚果类粮谷和坚果类 抽取大米等粮谷和板栗等坚果类样品约 500 g，将其用粉碎机粉碎并通过 2.0 mm 圆孔筛，混匀，均分成两份作为试样，分装入洁净的盛样袋内，密闭并标明标记。6.1.3 6.1.3 肉类及动物内脏肉类及动物内脏 抽取牛肉、鸡肉、猪肉等样品约 500 g，切碎后，用捣碎机将样品加工成浆状，混匀，均分成两份作为试样，分装入洁净的样品瓶内，密闭并标明标记。6.1.4 6.1.4 蛋类蛋类 抽取蛋类样品约 500 g，去壳，用捣碎机将样品加工成浆状，混匀，均分成两份作为试样，分装入洁净的样品瓶内，密闭并标明标记。6.1.5 6.1.5 饮料和奶类饮料和奶类 抽取饮料和奶类样品约 500 g，混匀，均分成两份作为试样，分装入洁净的样品瓶内，密闭并标明标记。注：以上样品取样部位按 GB 2763 附录 A 执行。6.2 6.2 试样保存试样保存 粮谷类、坚果类等试样于 04保存；新鲜水果、蔬菜类和肉、蛋、奶类和饮料等试样于-18以下冷冻保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。7 7 分析步骤分析步骤 7.1 7.1 提取提取 7.1.1 7.1.1 水果、蔬菜、饮料类样品水果、蔬菜、饮料类样品 将制备好的试样在室温下解冻后，放置约 30 min。称取 15 g 混匀的试样（精确至 0.01 g）于 50 mL塑料离心管中，加入 5g 氯化钠，旋涡混匀 1 min，加入 30 ml 环己烷-乙酸乙酯，再旋涡混匀 1 min，超声波提取 10 min，以 4 000 r/min 的转速离心 10 min。取上清液过填装有 5 g 无水硫酸钠的漏斗，分取20 mL 滤液（相当于 10 g 样品）放入鸡心瓶中。40以下旋转浓缩至近干。7.1.27.1.2 粮谷类样品、坚果类样品粮谷类样品、坚果类样品 取出制备好的试样，在室温放置约 30 min。称取 15 g 混匀的试样（精确至 0.01 g）于 50 mL。塑料离心管中，加入 5g 氯化钠，再加入 30 ml 乙腈，旋涡混匀 1 min，超声提取 30 min，以 4 000 r/min 的转速离心 10 min。取上清液过填装有 2g 无水硫酸钠的漏斗，分取 20 ml 滤液（相当于 10 g 样品）放入鸡心瓶中。40以下旋转浓缩至近干。7.1.3 7.1.3 肉类和动物内脏肉类和动物内脏 将制备好的试样在室温下解冻后，放置约 30 min。准确称取 15 g 混匀的试样（精确至 0.01 g）于50 mL 塑料离心管中，加入 5 g 氯化钠旋涡混匀 1 min，静置 10 min，再加入 30 mL 乙腈，超声提取 30 min，以 4 000 r/min 的转速离心 10 min。取上清液过填装有 5g 无水硫酸钠的漏斗，分取 20 ml 滤液（相当于10 g 样品）放入鸡心瓶中。40以下旋转浓缩至近干。7.1.4 7.1.4 蛋类、奶类样品蛋类、奶类样品 GB 23200.542016 3 将制备好的试样在室温下解冻后，放置约 30 min。准确称取 10 g 混匀的试样（精确至 0.01 g）于50 ml 塑料离心管中，加入 5 ml 甲醇、约 10 g 无水硫酸钠以及 20 ml 三氯甲烷，旋涡混匀 1min，振荡20 min，以 4 000 r/min 的转速离心 10 min。用移液器吸取下层三氯甲烷相，过填有 5g 无水硫酸钠的漏斗，收集于鸡心中。再加入 20 ml 三氯甲烷重复上述步骤进行二次提取。用 20 ml 乙腈冲洗漏斗和无水硫酸钠若干次。合并滤液于鸡心瓶中，40以下水浴减压浓缩至近干。7.2 7.2 净化净化 7.2.1 用 4 mL 环己烷-乙酸乙酯溶解鸡心瓶中残留物，转移至 GPC 进样瓶中，供 GPC 净化用。7.2.2 GPC 条件：采用 bio beads(S-X3)凝胶净化柱，流动相为环己烷乙酸乙酯，流速 4 mL/min，检测波长 254 nm。进样体积为 2 mL。在第 15 min20 min 时间段内收集洗脱液至鸡心瓶中，或根据淋洗曲线确定收集时间段。7.2.3 浓缩：将鸡心瓶中收集的洗脱液在 40以下浓缩至近干。7.2.4 溶解：用 1.0 mL 环己烷-乙酸乙酯溶解鸡心瓶内残留物，转移到 GC 进样瓶中，供 GC-MS 检测。7.3 7.3 测定测定 7.3.1 7.3.1 气相色谱分析参考条件气相色谱分析参考条件 a)色谱柱：HP-5 ms 石英毛细管柱，30 m0.25 mm（i.d），膜厚 0.25 m，或相当者；b)色谱柱温度程序：160保持 1 min，以 15/min 上升至 280，保持 4 min，以 10/min 上升至 300，保持 10 min。c)载气程序流速：0.8 mL/min 保持 10 min，以 0.5 mL/min 上升至 1.5 mL/min，保持 12 min；d)进样口温度：280。e)质谱仪接口温度：280。f)载气：高纯氦气，纯度99.999%。g)进样方式：无分流进样，1.5 min 后开阀。h)进样量：2.0 L。i)GC-MS 接口温度：280。7.3.2 7.3.2 质谱分析参考条件质谱分析参考条件 a)电离方式：EI。b)电离能量：70 eV。c)四极杆温度：150。d)离子源温度：230。e)检测方式：选择离子模式(SIM)。f)监测离子(m/z)：11 种杀菌剂的选择监测离子见表 1。g)溶剂延迟：6 min。表表 1 111 11 种杀菌剂的保留时间、定性定量离子种杀菌剂的保留时间、定性定量离子 序号 农药名称 参考保留时间/min 定量离子 m/z 定性离子 1 m/z 定性离子 2 m/z 定性离子 3 m/z 1 啶氧菌酯 7.99 335.1 303.1 173.1 145.1 2 E-苯氧菌酯 8.17 238.1 191.1 167.1 284.1 3 醚菌酯 8.37 206.1 131.1 116.1 313.2 4 Z-苯氧菌酯 8.45 196 191 238 345.9 5 嘧螨酯 8.89 189.1 204.1 426.2 352.1 6 肟菌酯 9.14 131.1 116.1 172.1 377.2 7 醚菌胺 9.88 295.2 16.1 237.2 未选 8 肟醚菌胺 10.23 205.2 132.1 221.1 116.1 9 吡唑醚菌酯 11.41 325.0 132.0 164.0 未选 10 氟嘧菌酯 13.15 363.3 313.1 306.1 398.2 GB 23200.542016 4 11 嘧菌酯 14.90 344 372.1 388.1 403.2 7.3.3 7.3.3 定性测定定性测定 在上述气相色谱质谱分析条件下，11 种杀菌剂的参考保留时间约为 7.9 min-15 min（见表 1）。标准品的选择离子监测 GC-MS 图参见附录 A 中图 A.1。样品溶液按照气相色谱质谱测定条件进行测定时，如果检出的色谱峰保留时间与标准溶液中某