GB 23200.36-2016 食品安全国家标准 植物源食品中氯氟吡氧乙酸、氟硫草定、氟吡草腙和噻唑烟酸除草剂残留量的测定 液相色谱-质谱质谱法.pdf

ICS 点击此处添加 ICS 号 点击此处添加中国标准文献分类号 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB GB 23200.362016 代替SN/T 22142008 食品安全国家标准 植物源食品中氯氟吡氧乙酸、氟硫草定、氟吡草腙和噻唑烟酸除草剂残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 National food safety standards Determination of fluroxypyr,dithiopyr,diflufenzopyr and thiazopyr residues in plant-derived foods Liquid chromatography-mass spectrometry 2016-12-18 发布 2017-06-18 实施 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 中华人民共和国农业部 发布 国家食品药品监督管理总局 GB 23200.362016 I 前前 言言 本标准代替SN/T 2214-2008 进出口植物源食品中氟草烟、氟硫草啶、氟吡草腙和噻草啶除草剂残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法。本标准与SN/T 2214-2008相比，主要变化如下：标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式；标准名称中“进出口植物源食品”改为“植物源食品”；标准范围中增加“其它食品可参照执行”。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN/T 2214-2008。GB 23200.362016 1 食品安全国家标准食品安全国家标准 植物源食品中氯氟吡氧乙酸、氟硫草定、氟吡草腙和噻唑烟酸除草剂残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1 1 范围范围 本标准规定了植物源食品中氯氟吡氧乙酸、氟硫草定、氟吡草腙和噻唑烟酸 4 种吡啶类除草剂的液相色谱-质谱/质谱测定方法。本标准适用于大白菜、玉米和橙子中氯氟吡氧乙酸、氟硫草定、氟吡草腙和噻唑烟酸 4 种吡啶类除草剂残留的确证和定量测定，其它食品可参照执行。2 2 规范性引用文件规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 3 原理原理 试样中残留的氯氟吡氧乙酸、氟硫草定、氟吡草腙和噻唑烟酸用乙腈提取，经 Supelclean C18 固相萃取柱净化，用液相色谱-质谱/质谱检测和确证，外标法定量。4 4 试剂和材料试剂和材料 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682中规定的一级水。4.14.1 试剂试剂 4.1.1 乙腈(CH3CN)：色谱纯。4.1.2 甲醇(CH3OH)：色谱纯。4.1.3 甲酸(HCOOH)：色谱纯。4.1.4 氯化钠(NaCl)。4.2 4.2 溶液配制溶液配制 4.2.1 0.1%甲酸的水溶液：准确吸取 1 mL 甲酸，转移入 1 000 mL 容量瓶，用水定容至刻度，混合均匀。4.2.2 0.1%甲酸-甲醇（50+50，V/V）：量取 0.1%甲酸的水溶液 500 mL 至 1 000 mL 容量瓶，用甲醇定容至刻度，混合均匀。4.3 4.3 标准品标准品 4.3.1 吡啶类除草剂标准品：参见附录 A。4.4 4.4 标标准溶液配制准溶液配制 4.4.1 标准储备溶液：准确称取适量的氯氟吡氧乙酸，氟硫草定，噻唑烟酸分别用甲醇溶解并定容至棕色容量瓶中，浓度相当于 500 mg/L，储备液可在 0 4避光存放 6 个月。4.4.2 混合标准中间溶液：准确吸取适量氯氟吡氧乙酸，氟硫草定，噻唑烟酸标准储备溶液于棕色容量瓶中，并加入与其它吡啶类除草剂等质量浓度的氟吡草腙，用甲醇定容至刻度，各种吡啶类除草剂的浓度为 1 mg/L，此中间溶液可在 04避光存放 1 个月。4.4.3 混合标准工作溶液：根据需要，使用前吸取一定量的混合标准中间溶液，用空白样品基质溶液配制。4.5 4.5 材料材料 4.5.1 固相萃取柱：Supelclean C18，500 mg/3 mL，或相当者。使用前用 5 mL 乙腈处理，保持柱体湿润。4.5.2 微孔滤膜：0.22 m，有机相型。GB 23200.362016 2 5 5 仪器和设备仪器和设备 5.1 液相色谱-质谱/质谱仪，配 ESI 离子源。5.2 天平：感量 0.0001 g 和 0.01 g。5.3 粉碎机。5.4 聚丙烯离心管：15 mL 和 50 mL，具塞。5.5 离心机：5 000 r/min。5.6 涡旋混合器。5.7 吹氮浓缩仪。5.8 固相萃取装置。6 6 试样制备与保存试样制备与保存 6.1 试样制备试样制备 6.1.1 6.1.1 大白菜和橙子大白菜和橙子 取代表性样品约500 g，（不可用水洗）切碎后，用捣碎机将样品加工成浆状，混匀，装入洁净容器，密封并标明标记。6.1.2 6.1.2 玉米玉米 取代表性样品约500 g，充分粉碎，混匀，装入洁净容器内，密封并标明标记。6.2 试样保存试样保存 试样于04冷藏保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。注：以上样品取样部位按GB 2763附录A执行。7.7.测定步骤测定步骤 7.1 7.1 提取提取 称取5 g（精确至0.01 g）样品于50 mL的离心管中，加入适量去离子水浸润片刻。加入10mL乙腈，在涡旋混合器上混匀3 min，于5000 r/min离心5 min，将上层清液转移至另一支离心管。分别用10 mL，5 mL乙腈重复以上提取过程，合并提取液。加入适量氯化钠，充分振荡，于5000离心3 min。取上层5 mL乙腈提取液至15 mL离心管，于40吹氮浓缩至约 2 mL，充分混匀。7.2 7.2 净化净化 将样品提取液转入C18 固相萃取柱。用4 mL乙腈洗脱，从上样开始收集全部流出液（约6 mL），整个固相萃取净化过程控制流速不超过1 d/s。流出液于40 氮气吹至近干，用0.1%甲酸-甲醇（50+50，V/V）定容至1.0 mL，旋涡混匀后，过0.22 m微孔滤膜，供液相色谱-质谱/质谱测定。7.3 7.3 测定测定 7.3.1 7.3.1 液相色谱色谱参考条件液相色谱色谱参考条件 a)色谱柱：ACQUITY BEH C18色谱柱，50 2.1 mm(内径)，1.7 m，或相当者。b)柱温：40。c)流速：0.3 mL/min。d)进样量：20 L。e)流动相及梯度洗脱条件见表1。表1 流动相及梯度洗脱条件 时间 min 流速 mL/min 0.1%甲酸的水溶液%甲醇%0 0.3 80 20 6 0.3 0 100 7.5 0.3 80 20 7.3.2 7.3.2 质谱质谱参考参考条件条件 a)离子化模式：电喷雾电离正离子模式（ESI+）。b)分辨率：单位质量分辨率。c)毛细管电压(kv)：3.00。d)源温度()：105。GB 23200.362016 3 e)脱溶剂气温度()：350。f)脱溶剂气流速(L/hr)：750。g)监测方式：多反应监测（MRM），设定条件见附录 A 表 A.1。7.3.37.3.3 色谱测定与确证色谱测定与确证 按照上述条件测定样品和混合基质标准溶液，样品中待测物质的保留时间与基质标准溶液的保留时间偏差在 2.5%之内；定性离子对的相对丰度与浓度相当的混合基质标准溶液的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过表 2 的规定，则可判断样品中存在相应的被测物。在仪器最佳工作条件下，对基质混合标准工作溶液进样，以峰面积为纵坐标，基质混合工作溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中待测物的响应值均应在仪器测定的线性范围内。在上述液相色谱-质谱/质谱条件下，氯氟吡氧乙酸、氟吡草腙、氟硫草定和噻唑烟酸的保留时间见附录 A 表 A.1。四种吡啶类除草剂标准物质的总离子流色谱及多反应监测（MRM）色谱图参见附录 B 图 B.1 和图 B.2。表 2 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度 50%20%至50%10%至20%10%允许的最大偏差 20%25%30%50%7.4 7.4 空白实验空白实验 除不加试样外，均按上述测定步骤进行。8 8 结果计算和表述结果计算和表述 按下式（1）计算试样中四种吡啶类除草剂的含量。msVCsAX （1）式中：X 样品中四种吡啶类除草剂的含量，单位为微克每千克，g/kg；A样液中吡啶类除草剂峰面积；As标准工作溶液中吡啶类除草剂峰面积；Cs 从标准工作曲线所得四种吡啶类除草剂浓度，单位为微克每升，g/L；V 样液最终定容体积,单位为毫升，mL；m 最终样液代表的试样质量,单位为克，g。注：计算结果须扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。9 9 精密度精密度 9.1 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录D的要求。9.2 在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录 E 的要求。10 10 定量限和回收率定量限和回收率 10.1 10.1 定量限定量限 大白菜和橙子基质：氯氟吡氧乙酸、氟硫草定、氟吡草腙和噻唑烟酸的定量限均为 5 g/kg；玉米基质：氯氟吡氧乙酸和氟吡草腙的定量限为 10 g/kg，氟硫草定和噻唑烟酸的定量限为 5 g/kg。10.2 10.2 回收率回收率 在0.005 mg/kg0.04 mg/kg添加浓度范围内,4种吡啶类除草剂的添加回收率参见附录C。GB 23200.362016 4 附附 录录 A A （资料性附录）（资料性附录）4 4 种种吡啶类除草剂吡啶类除草剂的的基本信息、保留时间和基本信息、保留时间和质谱参数质谱参数 表表 A.1 4A.1 4 种种吡啶类除草剂吡啶类除草剂的的基本信息、保留时间和基本信息、保留时间和质谱参数质谱参数 序号 农药中文名称 农药英文名称 CAS 号 分子式 分子量 保留时间min 母离子m/z 子离子m/z 滞留时间s 锥孔电压V 碰撞能量eV 1 氯氟吡氧乙酸 fluroxypyr C7H5Cl2FN2O3 69377-81-7 255.03 2.85 255 209*0.2 30 15 181 0.2 30 20 2 氟吡草腙 diflufenzopyr C15H12F2N4O3 109293-97-2 334.28 3.50 335 206*0.2 30 15 162 0.2 30 15 3 氟硫草定 dithiopyr C15H16F5NO2S2 97886-45-8 401.41 5.25 402 354*0.05 30 18 272 0.05 30 30 4 噻唑烟酸 thiazopyr C16H17F5N2O2S 117718-60-2 396.37 4.81 397 377*0.2 30 21 335 0.2 30 29 注：*为定量检测离子。对于不同质谱仪器，仪器参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳。GB 23200.362016 1 附附 录录 B B （资料性附录）（资料性附录）标准品的总离子流色谱图与多反应监测（标准品的总离子流色谱图与多反应监测（MRMMRM）色谱图）色谱图 图 B.2 5 g/L 吡啶类除草剂标准多反应监测（MRM）色谱图 图 B.1 5 g/L 吡啶类除草剂标准总离子流色谱图 1：氯氟吡氧乙酸；2：氟吡草腙；3：噻唑烟酸；4：氟硫草定。1 2 3 4 氯氟吡氧乙酸 氯氟吡氧乙酸 噻唑烟酸 噻唑烟酸 氟硫草定 氟硫草定 GB 23200.362016 2 附附 录录 C C （资料性附录）（资料性附录）不同基质中不同基质中4 4种种吡啶类除草剂吡啶类除草剂的添加回收率的添加回收率 表表C.1 C.1 不同基质中不同基质中4 4种种吡啶类除草剂吡啶类除草剂的添加回收率的添加回收率 序号