GBT 12990-1991 水质 微型生物群落监测 PFU法.pdf

GB/T12990-915试验用材料及设备5.1PFU的制备：50mm65mm75mm聚氨酯泡沫塑料块，白或淡黄色均可。使用前在蒸馏水中浸泡1224h,取出并挤去水分，用细绳将PFU束腰捆紧，留出150200mm长的绳头便于悬挂。5.2静态毒性试验用材料：a.55mm260mm540mm的搪瓷盘或塑料盘。b.玻璃培养柜，可隔成三层。层距660mm。每层装40W日光灯。5.3动态毒性试验用的材料：a.可调恒流稀释装置1台。b.直径400mm、高200mm的有机玻璃平底圆形试验槽，槽底均匀分布6个直径10mm的出水孔。.8个。c.母液罐。d.搪瓷桶1个，用于稀释水。6仪器和试剂6.1配有相差镜头的生物显微镜一台。6.2毒物测试用试剂和仪器。（依测试毒物而定）。6.3测叶绿素a含量常规方法中用的试剂和仪器。(90%丙酮、抽滤装置、721分光光度计、孔径0.71.0m玻璃纤维滤膜)。6.4测去灰分干重常规方法中用的试剂和仪器。（烘箱、马烘炉、10mL坩埚、分析天平）。7试验步骤7.1野外监测7.1.1PFU的挂放：挂放数量依工作要求而定。PFU均需有重物垂吊，以免漂移。悬挂的方式有三种：a.漂浮式（图1）：两边浮桶用石块固定位置后，用绳索把两个浮桶牵住。b.沉式（图2）：把PFU绑成一束，用石块下沉，用重物系一束PFU抛向水中，不得把PFU沉在底部，以免影响污染监测的效果。c.分散式（图3）：在同一采样点分散几处挂放，每处只放24个PFU。绳端固定在岸边。浮桶30甲阳水面PFU底图1漂浮式图2沉式GB/T12990-91比，然后再把恒流稀释装置的出水管滴流到试验槽的中央（如图6），根据实验要求可调试至所需的稀释倍数。如果采用0.5稀释因子(Dilutionfactor),理论上可得到毒物浓度为100%、50%、25%、12.5%、6.25%、0%等组。可根据人力删去个别低浓度组。调试浓度梯度后，再在试验槽中先挂空白PFU,再挂种源PFU,两者距离相等。试验期间仍须按时分析浓度梯度。7.2.5采样：在静态试验中按1,3,7,11,15天采样，在动态试验中按0.5,1,3,7,11,15天采样。采样是随机的。小心地解开PFU绳索，从试验盘（槽）中提出，挤出溶液于烧杯后，仍将PFU小心放回原地绑好，做好记号表示此PFU已用过。试验结束后对各盘中种源PFU进行镜检。7.3原生动物镜检镜检时用细吸管从烧杯底部吸3滴水样于载玻片上，盖上22mm22mm盖玻片。按高、中、低倍镜顺序仔细全片检查三片原生动物种类。要求看到85%种类。若要求种类多样性指数(Speciesdiversityindex),则须定量计算。把水样摇匀，吸0.1mL水样于0.1mL计数框内，全片进行活体计数。稀释水母液罐稀释装置试验槽试验槽试验槽试验槽试验槽试验槽试验槽试验槽123图6动态毒性试验流水、稀释系统示意图8结果的表示和有效性8.1微型生物群落结构和功能参数：PFU法的结果可用各种参数来表示（见下表）。对表内的这些参数的生态学意义已有许多说明，有的也已划定了指示水质好坏的范围。表1中分类学的参数表示要进行种类鉴定，主要是原生动物；非分类学参数是指用仪器（如Gilson呼吸仪）或化学分析方法测定整个微型生物群落。群集过程是根据MacArthur-wilson岛屿区系平衡模型修订公式：S=Se(1-e-gr)1+He-式中：St时的种数；S平衡时的种数；G群集速度常数；T达到90%S所需时间；H污染强度。在S与毒物浓度之间能获得统计学的相关公式，据此公式可获得EC、EC2、EC的效应浓度和预报MATC。