ICS65020.0|CCSB04中华人民共禾口国国家标准农业农村部公吉第628号_||_2022转基因植物及其产品成分检测水稻常见转基因成分筛查DetectionofgeneticaⅡlymodifiedplantsandderivedproducts—ScreeningofcomⅡnongenetica』!ymodifiedcomponentsinrice2023ˉ03ˉ0|实施2022-|2ˉ|9发布【■x一么■=qI\尸/中华人民共和国农业农村部发布农业农村部公告第628号—||_2022一刚--口本文件按照GB/T1.1-2()20《标准化工作导则第]部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草°请注意本文件的某些内容可能涉及专利°本文件的发‖j机构不承担识别专利的责任°本文件由中华人民共和国农业农村部提出°本文件由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归口°本文件起草单位:农业农村部科技发展中心、安徽省农业科学院水稻研究所°本文件主要起草人:马卉、张秀杰、汪秀峰、陈子言、许学`梁晋刚、王颖潜、吴爽、潘伟芹、焦小雨°||农业农村部公告第628号-||_2022转基因植物及其产品成分检测水稻常见转基因成分筛查|范围本文件规定了水稻中常见转基因成分的定性筛查方法°动队Ⅷ子2|:,本仅文333333bα′.基因bialaphosresistancegene来源于士壤|吸水链霉菌(St′℃户/o′)O′ce$/U′g厂oNco加c』!‘),编码臃丝菌索乙酞转移酶(phosphinothrlc|nacetyltrans[erase’PAT)。3.6HPT基因hygromycinphosphotransferasegene来源于大肠杆菌或链球菌(S』厂″1o″D′c“/D′g′℃肘co′{c“),编码潮霉索磷酸转移酶(hygromyclnphosˉpho[rans[erase,HPT)的基因°4原理依据12种转基因水稻转化体中常见的5种调控元件和基因序列,设计特异性引物及探针’对试样进衔]农业农村部公告第628号-||-2022PCR扩增°依据是否扩增获得预期的DNA片段或典型扩增曲线,判断样品中是否含有相应的转基因成分°5试剂和材料除非另有说明,仅使用分析纯试剂和重蒸馏水°5|琼脂糖°5.210g/L澳化乙锭(EB)溶液:称取1·0g澳化乙锭,溶解于100mL水中’避光保存°警告—涅化乙锭有致癌作用’配制和使用时应戴_次性手套操作并妥善处理废弃物。注:根据需耍可选择其他效果相当的核酸染料代替嗅化乙锭作为核酸电泳的染色剂°5.310mol/L氢氧化钠(NaOH)溶液:在160mL水中〗‖人80.0g氢氧化钠’溶解后’冷却至室温’再加水定容至200mL°5.』500mmol/L乙二胺四乙酸二钠(EDTAˉNa2)溶液(pH8.0):称取18.6g乙二胺四乙酸二钠,j|]人70mL水中’缓慢滴加氢氧...