农业农村部公告第282号-2-2020 饲料中土霉素、四环素、金霉素、多西环素的测定.pdf

农业农村部公告第282号一2一2020表1（续）时间，minA相，%B相，%2030702430702875253075254.5.2定量测定取试样溶液和标准工作液上机分析，根据保留时间确定待测物，得到色谱峰面积响应值，作单点或多点校准，外标法定量。试样溶液中待测物的响应值均应在仪器测定的线性范围内。若试样溶液浓度超过线性范围，用EDTA-Mcllvaine缓冲溶液(4.2.8)稀释后重新测定4.6试验数据处理TANDARD品RS时G试样中待测物含量以质量分数X按式)和式(2)计算。(1)1000(2)式中：C试样溶液和药物浓度校准时，由式(2)算得到、多点从标准曲线查得，单位为微克每升(agm昆合标工作液中药物浓度，单位为微克每毫升(gmL):式样溶中药物的峰面积A混合标准T作液中讠药物的峰面积，试样的提取液总体积，单位为毫升(mL):三EARCH式样的质量，单位为克(g)释倍数1000换算系数)测定结果用平行测定的算术习值表示结果保留3位有效数字ENT4.7精密度在重复性条件下获的独立盆的溪值不大心静术平均值的20%，以大于20%的情况不超过5%前提。5液相色谱-串联质谱法(C-MS/MS)5.1原理用EDTA-Mellvaine缓冲溶液提取样品中的士霉素、四环素、金霉素、多西环素，提取液经HLB固相萃取柱净化，氮气吹干，30%甲醇溶液溶解，用液相色谱-串联质谱法测定，外标法定量。5.2试剂或材料除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和符合GB/T6682规定的一级水。5.2.1乙腈：色谱纯。5.2.2甲醇：色谱纯。5.2.330%甲醇溶液：取甲醇30mL,用水溶解并稀释至100mL。5.2.410%甲醇溶液：取甲醇10mL,用水溶解并稀释至100mL。5.2.5标准储备液(1mg/mL):准确称取相当于土霉素、四环素、金霉素和多西环素各约50mg的盐酸土霉素、盐酸四环素、盐酸金霉素和盐酸多西环素标准品，分别于50mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，配制成浓度为1g/mL的土霉素、四环素、金霉素和多西环素标准储备液，一20以下保存，有效期为1个月。3