ICS65.020.0|CCSB04中华人民共禾口国国家肃示准农业农村部公告第628号_9-2022转基因植物及其产品成分检测大豆常见转基因成分筛查DetectionofgeneticallyInodifiedpla]nltsandderivedproducts-Screeningofcommongeneticallymodifiedcomponentsinsoybean2023ˉ03ˉ0|实施2022ˉ|2ˉ{9发布淳中华人民共和国农业农村部±Ⅶ农业农村部公告第628号-9-2022≡目‖-一口本文件按照GB/Tl..l—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起革。请注意本文件的某些内容可能涉及专利°本文件的发布机构不承担识别专利的责任°本文件由中华人民共利国农业农村部提{l}。本文件由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会归口°本文件起草单位:农业农村部科技发展中心、山西农业大学°本文件主要起草人:高建华、张秀杰、史宗勇、陈子言、刘珊、许冬梅、张雨碘、李夏莹、梁晋刚、王颖潜、郭俊‖||(、赵娟丽°|农业农村部公告第628号~9一2022转基因植物及其产品成分检测大豆常见转基因成分筛查|范围本文件规定了大豆中常见转基因成分的定性筛查方法°3.5c′.yJAc基因c′.yIACgene编码苏云金芽抱杆菌(BαcM′!‘$t/i〖《′ˉj′!gje′〗厕N)cry1Ac杀虫晶体蛋白的基因°3.6E9终止子terminatorofrib11los佳|’5ˉbiphosphatecarboxylasesmallsubunit来自豌豆核酮糖],5二磷酸竣化酶小亚基(rlbuloseˉ],5bjphosphatecarboxy|asesma‖subunlt)基因的3′端终止序列°4原理依据l6币||转基因大豆转化体中常见|{|05嗣||调控元件利基因序列,选择特异性引物及探针’对试样进拘]农业农村部公告第628号-9-2022I〕CR扩增°依据是否扩增获得预期的I〕NA片段或典型扩增‖|线,判断样品中是否含有相应的转基因成分°5试剂和材料除非另有说明,仅使用分析纯试剂和重蒸馏水°5|琼脂糖°5210g/L澳化乙锭(EB)溶液:称取L0g漠化乙锭’溶解于]00mL水中,避光保存°警告—澳化乙锭有致癌作用’配制和使用时应戴-次性手套操作并妥善处理废弃物。注:根据需耍可选择共他效果相当的核酸染料代替澳化乙锭作为核酸电泳的染色剂°53l0mol/L氢氧化钠(Na()H)溶液:在160mL水中加人80.0g氢氧化钠’溶解后,冷却至室温,再川|水定容至200mL°54500mmol/L乙二胺四乙酸二钠(EDTAˉNa2)溶液(pH8.0):称取18.6g乙二胺四乙酸二钠’加入70mL水中’缓慢滴加氢氧化钠溶液(见5.3)直至EDTAˉNa2完全溶解’用氢氧化钠溶液(见5.3)调pH至80’加...