GBT 38132-2019 转基因植物品系定量检测数字PCR法.pdf

GB/T38132-2019转基因植物品系定量检测数字PCR法1范围本标准规定了转基因植物品系的数字PCR定量检测方法。本标准适用于种子及物理加工种子样品中转基因玉米MON810品系、MON89034品系、MIR162品系，转基因大豆GTS40-3-2品系，转基因水稻克螟稻品系，转基因棉花GHB119品系，转基因油菜RT73品系的数字PCR法定量检测。本方法的定量检测限为0.1%（质量分数）。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T19495.1转基因产品检测通用要求和定义GB/T19495.3转基因产品检测核酸提取纯化方法GB/T19495.7转基因产品检测抽样和制样方法SN/T4853(所有部分)转基因大米定量检测数字PCR法3术语和定义、缩略语3.1术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1.1品系特异序列event specific sequence外源DNA片段插人受体作物基因组后重组产生的邻接区序列。3.2缩略语下列缩略语适用于本文件。Adh-l:玉米乙醇脱氢酶基因(Alcohol dehydrogenase 1)Adhc:乙醇脱氢酶C基因(Alcohol dehydrogenase C gene)PCR:聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction)PEP:磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(Phosphoenolpyruvate carboxylase gene)PLD:磷脂酰胆碱磷脂水解酶基因(Phospholipase D gene)4原理数字PCR其技术原理是通过将原始PCR反应体系进行分割，进而对所有小的反应体系进行扩增并后续检测。通过对反应体系进行有限的分割，从而使整个反应体系可以更加耐受核酸抑制因子，并且更加稳定、准确、快速地对痕量的转基因成分进行精准鉴定。