中华人民共和国国家标准犌犅４７８９．３４—２０１６食品安全国家标准食品微生物学检验双歧杆菌检验２０１６１２２３发布２０１７０６２３实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局发布犌犅４７８９．３４—２０１６Ⅰ前言本标准代替ＧＢ４７８９．３４—２０１２《食品安全国家标准食品微生物学检验双歧杆菌的鉴定》。本标准与ＧＢ４７８９．３４—２０１２相比，主要变化如下：———增加了双歧杆菌的计数方法；———增加了ＭＲＳ培养基；———修改了标准的适用范围；———修改了附录Ｂ为可选项。犌犅４７８９．３４—２０１６１食品安全国家标准食品微生物学检验双歧杆菌检验１范围本标准规定了双歧杆菌（犅犻犳犻犱狅犫犪犮狋犲狉犻狌犿）的鉴定及计数方法。本标准适用于双歧杆菌纯菌菌种的鉴定及计数。本标准适用于食品中仅含有单一双歧杆菌的菌种鉴定。本标准适用于食品中仅含有双歧杆菌属的计数，即食品中可包含一个或多个不同的双歧杆菌菌种。２设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：２．１恒温培养箱：３６℃±１℃。２．２冰箱：２℃～５℃。２．３天平：感量０．０１ｇ。２．４无菌试管：１８ｍｍ×１８０ｍｍ、１５ｍｍ×１００ｍｍ。２．５无菌吸管：１ｍＬ（具０．０１ｍＬ刻度）、１０ｍＬ（具０．１ｍＬ刻度）或微量移液器（２００μＬ～１０００μＬ）及配套吸头。２．６无菌培养皿：直径９０ｍｍ。３培养基和试剂３．１双歧杆菌培养基：见Ａ．１。３．２ＰＹＧ培养基：见Ａ．２。３．３ＭＲＳ培养基：见Ａ．３。３．４甲醇：分析纯。３．５三氯甲烷：分析纯。３．６硫酸：分析纯。３．７冰乙酸：分析纯。３．８乳酸：分析纯。４检验程序双歧杆菌的检验程序见图１。犌犅４７８９．３４—２０１６２图１双歧杆菌的检验程序５操作步骤５．１无菌要求全部操作过程均应遵循无菌操作程序。犌犅４７８９．３４—２０１６３５．２双歧杆菌的鉴定５．２．１纯菌菌种５．２．１．１样品处理：半固体或液体菌种直接接种在双歧杆菌琼脂平板或ＭＲＳ琼脂平板。固体菌种或真空冷冻干燥菌种，可先加适量灭菌生理盐水或其他适宜稀释液，溶解菌粉。５．２．１．２接种：接种于双歧杆菌琼脂平板或ＭＲＳ琼脂平板。３６℃±１℃厌氧培养４８ｈ±２ｈ，可延长至７２ｈ±２ｈ。５．２．２食品样品５．２．２．１样品处理：取样２５．０ｇ（ｍＬ），置于装有２２５．０ｍＬ生理...
