GB 14963-2011 食品安全国家标准 蜂蜜.pdf

中华人民共和国国家标准中华人民共和国国家标准GBGBGBGB 149632011食品安全国家标准蜂蜜中 华 人 民 共 和 国 卫 生 部中 华 人 民 共 和 国 卫 生 部发布2011-04-20 发布2011-10-20 实施GB 149632011I前言本标准代替 GB 149632003蜂蜜卫生标准以及 GB 187962005蜂蜜中的对应指标。本标准与 GB 149632003 相比主要变化如下：修改了范围；增加了蜂蜜的定义；将原料要求改为蜜源要求，并明确主要的有毒蜜源植物品种名称；修改了感官要求；修改了理化指标；增加了污染物限量、兽药残留限量、农药残留限量要求；增加了嗜渗酵母计数要求。GB 1496320111食品安全国家标准蜂蜜1 范围本标准适用于蜂蜜，不适用于蜂蜜制品。2 术语和定义蜂蜜蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露，与自身分泌物混合后，经充分酿造而成的天然甜物质。3 技术要求3.1 蜜源要求蜜蜂采集植物的花蜜、分泌物或蜜露应安全无毒，不得来源于雷公藤（TripterygiumwilfordiiHook.F.）、博落回Macleaya cordata(Willd.)R.Br、狼毒（Stellera chamaejasmeL.）等有毒蜜源植物。3.2 感官要求感官要求应符合表 1 的规定。表 1感官要求项目要求检验方法色泽依蜜源品种不同，从水白色（近无色）至深色（暗褐色）按 SN/T 0852 的相应方法检验滋味、气味具有特有的滋味、气味，无异味状态常温下呈粘稠流体状，或部分及全部结晶在自然光下观察状态，检查其有无杂质杂质不得含有蜜蜂肢体、幼虫、蜡屑及正常视力可见杂质（含蜡屑巢蜜除外）3.3 理化指标理化指标应符合表 2 的规定。GB 1496320112表 2理化指标项目指标检验方法果糖和葡萄糖（g/100 g）60GB/T 18932.22蔗糖（g/100 g）桉树蜂蜜，柑橘蜂蜜，紫苜蓿蜂蜜，荔枝蜂蜜，野桂花蜜10其他蜂蜜5锌（Zn）(mg/kg)25GB/T 5009.143.4污染物限量污染物限量应符合 GB 2762 的规定。3.5兽药残留限量和农药残留限量3.5.1 兽药残留限量兽药残留限量应符合相关标准的规定。3.5.2农药残留限量农药残留限量应符合 GB 2763 及相关规定。3.6 微生物限量微生物限量应符合表 3 规定。表 3微生物限量项目指标检验方法a菌落总数（CFU/g）1000GB 4789.2大肠菌群（MPN/g）0.3GB 4789.3霉菌计数（CFU/g）200GB 4789.15嗜渗酵母计数（CFU/g）200附录A沙门氏菌0/25gGB 4789.4志贺氏菌0/25gGB/T 4789.5金黄色葡萄球菌0/25gGB 4789.10a样品的分析及处理按 GB 4789.1 执行。GB 1496320113附录A嗜渗酵母计数A.1 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：A.1.1 恒温培养箱：25 1。A.1.2 冰箱：2 5。A.1.3 均质器及无菌均质袋、均质杯或灭菌乳钵。A.1.4 天平：感量 0.1 g。A.1.5 无菌试管：18 mm180 mm。A.1.6 无菌吸管：1 mL（具 0.01 mL 刻度），10 mL（具 0.1 mL 刻度），或微量移液器及吸头。A.1.7 无菌锥形瓶：500 mL，250 mL。A.1.8 无菌培养皿：直径 90 mm。A.1.9 无菌 L 型涂布棒：玻璃、塑料或者不锈钢材料制成，棒体直径不应大于 2 mm。A.1.10 显微镜：10100。A.2 培养基和试剂A.2.1 30葡萄糖溶液（pH 6.50.5）A.2.1.1 成分无水葡萄糖30.0 g蒸馏水100 mLA.2.1.2 制法称量适量葡萄糖，溶解在蒸馏水中，必要时调节 pH 为 6.4 左右。分装后，115 高压灭菌 20 min。A.2.2 氯硝胺 18%甘油（DG18）琼脂A.2.2.1 成分酪蛋白胨5.0 g无水葡萄糖10.0 g磷酸二氢钾1.0 g硫酸镁（MgSOHO）0.5 g氯硝胺0.002 g无水甘油200 g琼脂15 g氯霉素0.1 g蒸馏水1000 mLA.2.2.2 制法除氯霉素外，将全部成分加热煮沸至完全溶解，如有必要，调节 pH 为 6.4 左右。加入抗菌素，121 高压灭菌 15 min，最终的 pH 应为 5.60.2。灭菌后，立即在 44 47 水浴冷却至 50 以下，在每个灭菌平皿中倾注大约 15 mL20 mL 培养基，放置在水平的台面上冷却固化备用。如有必要，可以放在 36 培养箱中过夜，使琼脂表面干燥无水珠。避光保存。A.3 检验程序嗜渗酵母检验程序见图 A.1。GB 1496320114图 A.1 嗜渗酵母检验程序图A.4 操作步骤A.4.1 样品采集和保存样品采集后，应尽可能及时检验。若不能及时检验，普通样品应置 2 5 冰箱保存，在 24 h 内检验。冷冻样品应在 45 以下不超过 15 min 或在 2 5 不超过 18 h 解冻。A.4.2 样品稀释A.4.2.1 取样以无菌操作在天平上称取固体或液体检样 25 g，加入 30葡萄糖稀释液 225 g，用旋转刀片式均质器以 8000 r/min 均质 1 min，或拍击式均质器拍击 2 min，制备成 1:10 的均匀稀释液。如无均质器，则将样品放入加有玻璃珠的无菌锥形瓶中，并充分振荡。A.4.2.2 梯度稀释用灭菌吸管吸取 1:10 稀释液 1 mL，注入含有 9 mL 30葡萄糖稀释液的试管内，置于漩涡混悬仪上混匀，制备 1:100 的稀释液。另取 1 mL 灭菌吸管，按前操作依次制备 10 倍递增稀释液，每递增稀释一次，换用 1 支 1 mL 灭菌吸管。A.4.3 涂布和培养A.4.3.1 根据对检样污染情况的估计，选择 2 个3 个连续的适宜稀释度，每个稀释度接种 2个 DG18 琼脂平板。在充分混合稀释液之后，立即在每个平板表面接种 0.1 mL，接着用无菌的 L 型涂布棒进行充分的琼脂表面涂布。注意涂布棒下端不得触碰培养皿的侧缘。进行样品检验的同时，应同时在 2 个 DG18 琼脂平板表面接种 0.1 mL 的稀释液作为空白对照。A.4.3.2 接种完成后，尽快将全部平板置 25 1 恒温箱内避光培养。培养时勿翻转培养皿。为防止出现霉菌的过度蔓延生长掩盖了目标菌落，在培养 48 h 后，即开始每日观察平板上面真菌生长情况。培养 7 d 结束。A.4.4 菌落计数25 1，5 d7 d样品 25 g225 g 30葡萄糖溶液，充分振荡或均质10 倍系列稀释报告选择 2 个3 个适当稀释度，各 0.1 mL 涂布 2 个 DG18 琼脂菌落计数。根据需要，显微镜下观察可疑菌落GB 1496320115A.4.4.1 选择菌落数量在 15150 之间的平板，计数菌落数量。A.4.4.2 典型的嗜渗酵母在 DG18 琼脂平板上呈现为圆形、中心隆起、不透明、边缘整齐的菌落，直径 1 mm2 mm。必要时，可利用低倍显微镜直接观察平板上生长的菌落是否为细菌菌落。如出现霉菌菌落干扰时，不应计数丝状菌落。A.4.5 报告参照 GB 4789.2 的报告方式，以 CFUg 为单位报告样品中嗜渗酵母的数量。