QBT 5295-2018 美白化妆品中鞣花酸的测定高效液相色谱法.pdf

ICS71.100.70分类号：Y42备案号：65907-2018QB中华人民共和国轻工行业标准QB/T5295-2018美白化妆品中鞣花酸的测定高效液相色谱法Determination of ellagic acid in whitening cosmetics-High performance liquid chromatography2018-10-22发布2019-04-01实施中华人民共和国工业和信息化部发布QB/T5295-2018美白化妆品中鞣花酸的测定高效液相色谱法1范围本标准规定了用高效液相色谱法测定化妆品中鞣花酸的含量。本标准适用于水类、乳液类、膏霜类美白化妆品中鞣花酸的测定。本方法鞣花酸的检出限、定量限分别为4.0mg/kg、15mgkg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理试样经甘氨酸氢氧化钠缓冲溶液涡旋振荡，超声提取，离心沉淀，分离过滤，固相萃取去除杂质，采用反相高效液相色谱分离，二极管阵列检测器检测，外标法定量。4试剂和材料除非另有规定，所用试剂均为分析纯。水为GB/T6682规定的一级水。4.1乙腈（色谱纯）。4.2甲醇。4.350%甲醇溶液（体积分数）。4.4磷酸。4.50.2%磷酸溶液（体积分数）。4.6甲酸。4.75%甲酸甲醇溶液（体积分数）。4.8氢氧化钠。4.91%氢氧化钠溶液：按照1g氢氧化钠溶解于100mL水中的比例配制。4.10鞣花酸：含量不小于95%，中文名称、英文名称、NCI名称、CAS号、分子式、相对分子质量和结构式参见附录A表A1。4.11鞣花酸标准储备溶液：准确称取鞣花酸(4.10)10.0mg于100mL的棕色容量瓶中，加入50%甲醇(4.3)40mL,一边缓慢滴加1%氢氧化钠溶液(4.9)一边摇晃至标样完全溶解，然后用50%甲醇(4.3)定容至刻度。即得浓度为100gmL的标准储备液，该溶液现配现用。4.12鞣花酸标准工作溶液：分别吸取100gmL标准溶液(4.11)0mL、0.25mL、2.50mL、5.00mL、12.50mL于25mL棕色容量瓶中，再用50%甲醇(4.3)稀释至刻度：连同标准储备溶液(4.11)一起形成浓度为0gmL、1g/mL、10g/mL、20g/mL、50gmL、100g/mL标准系列溶液，该溶液现配现用。4.13甘氨酸。4.140.1mol/LpH9甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液：100mL含0.2mol/L甘氨酸的50%甲醇溶液和17.6mL含0.2mo/L氢氧化钠的50%甲醇溶液混合，再通过微调甘氨酸和氢氧化钠溶液的加入量使提取液pH达到9，然后加水稀释至200mL。4.15石英砂。1QB/T5295-20185仪器和设备5.1高效液相色谱仪（二极管阵列检测器】5.2分析天平：感量为1mg5.3分析天平：感量为0.001g5.4棕色容量瓶：25mL和250mL5.5具塞离心刻度试管：25mL5.6超声振荡器。5.7离心机：转速不小于00o0rnin。5.8滤膜：孔径0.22um5.9涡旋振荡器。5.10阴离子交换固相萃取小柱(MAX或相当者)6 mL5.11pH计：精度0.1。5.12移液管或移液器：1mL、5L和10mL。6测定步骤6.1样品处理6.1.1提取水类化妆品取样品1g(精确至0.001g)于刻度离心管中，加入甘氨酸-氢氧化的缓冲溶液(4.14)至10mL,涡旋振浅05min,水浴超声提取20min,冷却至室温后，100004min离4分离10min,上清液经0.22m滤膜过滤。乳液类、膏霜类化妆品取样品1g(精确至001g于洲度离心管中，在加入甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液(4.14)至10mL,加入少量英砂(4.15)，涡旋振荡0.5mi水浴超声提取20hi,冷却至室温后，10000rmin离心分离10im,水层清液经0.22um滤膜过滤，6.1.2净化将阴离子交换固析萃取柱先用5mL甲醇(4.2)和5mL水活化然后准确移6.1步骤中离心后的样品上清液5mL加小柱。上样结束后用5mL甲醇(42)洗涤，然后用5%甲酸-申溶液(4.7)5mL洗脱，收集洗脱液用水定容至5mL,经922m滤膜过滤。上心过程的流速的控制在1nL/min。6.2测定条件高效液相色谣请测定参考条件如下：a)色谱柱敖格：C色谱柱，250mm4.6mm(粒径5m)或相当者：b)流动相：乙腈(41)+0.2%酸(4.5)=18+82（体积Hc)柱温：30d)流动相流量10me)进样量：10nf)检测波长：254nm6.3标准工作曲线绘制按6.2色谱条件检测。以标准系列溶液(0ugmL、1gmL0ugmL、20Hg/mL、50ugmL、1004gmL)的浓度为横坐标，对应的峰面积为纵座标，进行线性回归得到标准曲线方程。鞣花酸标准品的高效液相色谱图参见附录B中的图B.1。6.4测定按6.2的色谱条件，取6.1.2步骤中滤液进样，得到试样溶液的峰面积，根据保留时间和二极管阵列的光谱图定性，鞣花酸标准品的DAD光谱图参见附录B中的图B.2。从标准曲线上查得试样溶液中鞣花