QBT 4576-2013 透明质酸钠.pdf

QB/T4576-2013透明质酸钠1范围本标准规定了透明质酸钠的术语和定义、分类、要求、试验方法、检验规则、标志、包装、运输及贮存。本标准适用于以糖质为主要原料，经微生物发酵、提取、结晶等工艺制成的透明质酸钠。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T191包装储运图示标志GB/T 601化学试剂标准滴定溶液的制备GB/T602化学试剂杂质测定用标准溶液的制备GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB4789.4食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验GB4789.15食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数GB5009.3食品安全国家标准食品中水分的测定GB5009.4食品安全国家标准食品中灰分的测定GB/T5009.11食品中总砷及无机砷的测定GB/T5009.74食品添加剂中重金属限量试验GB/T6678化工产品采样总则GB/T6682一2008分析实验室用水规格和试验方法GB7718预包装食品标签通则3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1透明质酸钠sodium hyaluronate以糖质原料加入酵母粉、蛋白胨等培养基，经发酵、提取、精制、烘干等工艺制成的由BD-N-乙酰氨基葡萄糖和BD-葡萄糖醛酸为结构单元的以-1,4-糖苷链连成的一种链状高分子酸性粘多糖。4分子式、相对分子质量及结构式4.1分子式：(C14H2oNNO11)m。4.2相对分子质量：8104210（按2007年国际原子量表）。4.3结构式：CH,OHNHCOCH1QB/T4576-20135分类按用途分伪食品工业用和其他工业用（医药工业用除外）。6要求6.1感官产品为白色或类白色粉末，能缓慢溶解于水，形成黏稠、无色或微乳白色溶液。6.2理化应符合表1的规定表1理化要求项目指透明质酸钠含量（以干基计）%87.水分%10.灰分%13.pH08.0透光率%6.3卫生应符合表2的规定。表2卫生要求指材项食品工业用其他业用重金属（以Pb计）/(gkg】10砷（以As计）Igkg)2霉菌和酵母菌/cf/100g)100沙门氏菌/25g下应检出7试验方本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂利符合GB/T6682一2008规定的三级水。试验中所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB/T601GB/T6O2、GB/T63的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种落剂配制时，均指水溶液。7.1感官取适量样品，在自然光线下，用肉眼观察样品的颜色和形态、溶解状态7.2透明质酸钠含量（以干基计）7.2.1原理透明质酸中含有篆量摩尔比的N乙酰氨基葡萄糖和葡萄醛酸，用硼砂作催化剂对透明质酸钠用硫酸进行酸解，可将葡萄糖醛酸分离出来。葡萄糖醛酸与咔唑反应形成有机络合物，该络合物显示特有的紫色，其吸光度和葡萄糖醛酸的浓度成正比。通过葡萄糖醛酸的含量可以确定透明质酸钠的含量。QB/T4576-20137.2.2试剂和溶液7.2.2.10.025mol/L硼砂硫酸液称取477g硼砂溶于500mL浓硫酸（优级硫酸）中，保存于密封的玻璃瓶中备用。7.2.2.20.1%咔唑试液称取0.125g咔唑溶于100mL无水乙醇中，置于棕色瓶中，于4C8冰箱保存，保存期限2个月。7.2.2.3标准葡萄糖醛酸溶液精确称取20mg葡萄糖醛酸标准品，置100mL容量瓶中，加水溶解并定容至刻度，摇匀备用。7.2.3仪器和设备7.2.3.1旋涡混合器7.2.3.2分光光度计。7.2.4标准曲线的绘制分别准确量取标准葡萄醛酸溶液(7.2.2.3)0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL,置于10mL容量瓶中，加水稀释至刻度，得10g/mL、20g/mL、30ug/mL、40 ug/mL和50g/mL浓度的标准品溶液。取6只具塞刻度试管分别加入不同浓度的标准品溶液各1mL,之后分别加入硼砂硫酸液(7.2.2.1)5mL,置冰浴中冷却至4C左右。先轻轻振摇，再用旋涡混合器充分混匀。将试管置沸水中加热10min,取出再置于流水中冷却至室温。分别加入咔唑试液(7.2.2.2)0.2mL于冷却后的试管中，混匀，沸水浴中再加热15min,之后冷却至室温。用1cm比色皿于530nm处测定吸光度，以吸光度值对浓度值作图即可绘出标准曲线。7.2.5分析步骤7.2.5.1准确称取透明质酸钠样品约0.020g,加适量水溶解，定量转移至200mL容量瓶中，并用水定容至刻度。7.2.5.2吸取样品溶液1mL,加入硼砂硫酸液(7.2.2.1)5mL,置冰浴中冷却至4C左右。先轻轻振摇，再用旋涡混合器充分混匀。将试管置沸水中加热10min,再置于流水中冷却至室温。分别加入咔唑试液(7.2.2.2)0.2mL,混匀，沸水浴中再加热15min,之后冷却至室温。以1cm比色皿用分光光度计于530nm处测定吸光度7.2.6计算透明质酸钠的含量按公式(1)计算cxV1062.07100%(1)m(1-X2)式中X样品中透明质酸钠的含量，单位为质量分数(%)；c根据样品的吸光度，从标准曲线上查出相应的葡萄醛酸浓度，单位为微克每毫升(g/mL):V样品定容的体积，单位为毫升(mL);m样品质量，单位为克(g):X2样品的干燥失重，单位为质量分数(%)；2.07透明质酸钠重复双糖单元分质量(401.3)/葡萄糖醛酸分质量(194.1)。结果保留至1位小数。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的2%。